本文關(guān)鍵詞：5-HT6受體拮抗劑SB271046對(duì)癲癇大鼠海馬神經(jīng)元的保護(hù)作用及可能機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立氯化鋰-匹羅卡品癲癇大鼠模型,在癲癇發(fā)作后24小時(shí)內(nèi)的不同時(shí)間點(diǎn),觀察自噬水平的變化。予5-羥色胺6受體(Serotonin 6 receptor,5-HT6R)拮抗劑SB271046干預(yù),觀察致癇大鼠海馬神經(jīng)元的自噬、凋亡和神經(jīng)元變性的變化,利用分子生物學(xué)技術(shù)檢測(cè)JNK信號(hào)通路,探討5-HT6受體拮抗劑改善癲癇的可能機(jī)制�！痉椒ā�1、動(dòng)物分組:分組一:體重220-250g成年雄性SD大鼠(N1=30只),隨機(jī)分為空白組和癲癇組,觀察癲癇發(fā)作后2h、6h、12h、24h相對(duì)于空白組的自噬變化。分組二:體重220-250g成年雄性SD大鼠(N2=40),先隨機(jī)分為空白組、癲癇組,每組10只。然后造模成功后的癲癇組隨機(jī)分為安慰劑組(癲癇+側(cè)腦室注射二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO))、5-HT6受體拮抗劑組(癲癇+側(cè)腦室注射SB271046),每組10只。2、癲癇模型:首選腹腔注射氯化鋰,16-20個(gè)小時(shí)后在腹腔注射匹羅卡品,根據(jù)Racine分級(jí)認(rèn)為發(fā)作級(jí)數(shù)達(dá)到IV級(jí)以上并且能持續(xù)30min,認(rèn)定為造模成功。3、給藥方式:癲癇造模前24小時(shí)側(cè)腦室注射5-HT6受體拮抗劑SB27104630ug預(yù)處理,癲癇造模成功的大鼠在地西泮解痙后再次側(cè)腦室注射5-HT6受體拮抗劑SB271046 30ug,給藥2小時(shí)后斷頭取腦,檢測(cè)大鼠海馬組織各項(xiàng)指標(biāo)變化。4、通過(guò)western blot檢測(cè)海馬JNK信號(hào)通路的c-Jun氨基末端激酶(c-Jun Nterminal kinase,JNK)、細(xì)胞癌基因jun(Cellular oncogene jun,c-Jun),自噬指標(biāo)微管相關(guān)蛋白輕鏈3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3II/LC3I)、beclin1及凋亡相關(guān)的Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-assosiated x protein,bax)、B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,bcl-2)的變化。逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(Reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)beclin1、bax、bcl-2在各組的變化情況。5、根據(jù)上述側(cè)腦室注射5-HT6受體拮抗劑SB271046給藥24小時(shí)后斷頭取腦,通過(guò)綠色熒光變性神經(jīng)元染劑(Fluoro-Jade C,FLC)染色熒光顯微鏡下觀察神經(jīng)元變性情況�！窘Y(jié)果】1、癲癇發(fā)作后2h、6h、12h、24h,western blot檢測(cè)LC3II/I的值逐漸升高。2、JNK信號(hào)通路:western blot檢測(cè)的p-JNK/JNK、c-Jun,與空白組比較,造模后p-JNK/JNK、c-Jun水平升高(P0.05),5-HT6受體拮抗劑組與癲癇組比較p-JNK/JNK、c-Jun水平降低(P0.05)。3、自噬指標(biāo):western blot檢測(cè)的LC3II/LC3I、beclin1,與空白組比較,造模后LC3II/LC3I、beclin1水平升高(P0.05),5-HT6受體拮抗劑組與癲癇組比較p-JNK/JNK、c-Jun水平降低(P0.05)。檢測(cè)的Beclin1的RT-PCR結(jié)果與western blot的變化趨勢(shì)相同。4、凋亡指標(biāo):western blot檢測(cè)的Bax,與空白組比較,造模后Bax水平升高(P0.05),5-HT6受體拮抗劑組與癲癇組比較Bax水平降低(P0.05)。與空白組比較,造模后Bcl-2水平降低(P0.05),5-HT6受體拮抗劑組較癲癇組無(wú)明顯變化(P0.05)。Bax的RT-PCR與western blot的變化趨勢(shì)相同。Bcl-2的RTPCR結(jié)果顯示:癲癇組較空白組降低(P0.05),5-HT6受體拮抗劑組較癲癇組升高(P0.05)。5、神經(jīng)元變性:通過(guò)FLC染色發(fā)現(xiàn)在海馬CA1區(qū)癲癇組變性的神經(jīng)元較空白組明顯升高(P0.05)。5-HT6受體拮抗劑組較癲癇組無(wú)明顯變化(P0.05)�！窘Y(jié)論】1、癲癇持續(xù)狀態(tài)發(fā)生24小時(shí)內(nèi)海馬的自噬水平逐漸升高,神經(jīng)元變性增加。2、5-HT6R拮抗劑SB-271046可能通過(guò)抑制JNK/c-jun信號(hào)通路,抑制癲癇大鼠海馬的自噬和凋亡,從而對(duì)癲癇大鼠海馬的神經(jīng)元產(chǎn)生保護(hù)作用,從而改善癲癇發(fā)作。3、5-HT6R拮抗劑SB-271046可能對(duì)癲癇大鼠海馬變性的神經(jīng)元影響不明顯。
【關(guān)鍵詞】：癲癇 5-HT6受體 SB271046 自噬 凋亡 神經(jīng)元變性
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R742.1
【目錄】：

• 英文縮略詞表4-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 材料和方法12-26
• 結(jié)果26-33
• 討論33-37
• 結(jié)論37-38
• 參考文獻(xiàn)38-43
• 綜述43-53
• 參考文獻(xiàn)49-53
• 致謝53

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 趙春玲,張春來(lái),李莉華,馮志強(qiáng),李先華,李達(dá)兵;IL-1受體拮抗劑減輕離體豬腎缺血再灌注損傷的作用及其機(jī)制[J];中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志;2001年03期

2 韓振杰 ,楊偉林;AngⅡ受體拮抗劑的研究進(jìn)展[J];中國(guó)處方藥;2005年06期

3 ;大麻受體拮抗劑有助于減肥[J];廣西科學(xué);2006年02期

4 潘沛;呂加國(guó);;α_(1A)-受體拮抗劑研究新進(jìn)展[J];中國(guó)藥學(xué)雜志;2006年20期

5 李寧;康從民;呂英濤;;M受體拮抗劑的研究進(jìn)展[J];化學(xué)通報(bào);2008年12期

6 臧鴻斌;張瓊予;賀薇;騰贊;;第二代5-HT3受體拮抗劑——帕洛諾司瓊的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年16期

7 王秋月;董亮;王曼麗;陳國(guó)良;;PAF受體拮抗劑的研究進(jìn)展[J];沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年03期

8 孫柯兒;IL-1受體拮抗劑的臨床應(yīng)用前景[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));1998年02期

9 ;最新的抗血小板療法——Ⅱb/Ⅲa受體拮抗劑[J];高血壓雜志;1998年03期

10 張建萍,王正榮,王浴生;血管緊張素Ⅱ受體及受體拮抗劑研究進(jìn)展[J];四川生理科學(xué)雜志;2000年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張洪泉;許正新;葛曉群;李吉平;孫云;;白介素1受體拮抗劑對(duì)致敏豚鼠的抗喘作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第八次全國(guó)代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

2 張洪泉;許正新;孫云;葛曉群;李吉平;;重組人白細(xì)胞介素1受體拮抗劑對(duì)豚鼠實(shí)驗(yàn)性哮喘的作用[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第八次全國(guó)代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

3 王琳;張會(huì)婷;危佳;楊明暉;;AT1受體拮抗劑V8結(jié)構(gòu)和化學(xué)位移的量子化學(xué)研究[A];第十四屆全國(guó)波譜學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2006年

4 王雪鵑;Miheala Ginj;Hulmet Maecke;;新型生長(zhǎng)抑素受體拮抗劑的研制及臨床前研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)核醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2011年

5 劉河;;手性M受體拮抗劑的合成研究[A];2013年中國(guó)藥學(xué)大會(huì)暨第十三屆中國(guó)藥師周論文集[C];2013年

6 徐峰;張洪泉;;白細(xì)胞介素-1受體拮抗劑拮抗豚鼠哮喘的相關(guān)機(jī)制[A];中國(guó)藥理學(xué)會(huì)第八次全國(guó)代表大會(huì)暨全國(guó)藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

7 李俏;任義勝;;組胺H_2受體拮抗劑研究進(jìn)展及臨床應(yīng)用[A];全國(guó)醫(yī)院藥事工作研討會(huì)暨2005臨床藥師論壇——在職臨床藥師實(shí)踐與培養(yǎng)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2005年

8 葛偉;李源;陳軍;;系統(tǒng)非競(jìng)爭(zhēng)性NMDA受體拮抗劑MK-801對(duì)老齡鼠原發(fā)性熱痛敏的作用[A];新世紀(jì) 新機(jī)遇 新挑戰(zhàn)——知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展（下冊(cè)）[C];2001年

9 程剛英;倪廣慧;張曼;趙娟;朱一婧;姜鳳超;;新型整合素α_vβ_3受體拮抗劑的設(shè)計(jì)及抗腫瘤活性[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

10 杜旭輝;楊金升;石向群;閆俊強(qiáng);;NR2 B受體拮抗劑及其在缺血性腦血管病中的應(yīng)用[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏開(kāi)敏;H_(2)受體拮抗劑的不恰當(dāng)聯(lián)用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

2 呂工;AⅡ受體拮抗劑臨床應(yīng)用研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2000年

3 呂工;AⅡ受體拮抗劑身手不凡[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年

4 魏開(kāi)敏;H_(2)受體拮抗劑的不恰當(dāng)聯(lián)用[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2003年

5 麥國(guó)榮;血小板GPⅡb／Ⅲa受體拮抗劑研究進(jìn)展[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

6 北京積水潭醫(yī)院 張石革 梁建華;組胺H2受體拮抗劑的臨床應(yīng)用進(jìn)展[N];中國(guó)高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報(bào);2001年

7 記者 王瀟雨;M受體拮抗劑臨床應(yīng)用專家共識(shí)發(fā)布[N];健康報(bào);2014年

8 鐘遠(yuǎn)超;組胺H_（2）受體拮抗劑有望避免神經(jīng)元的缺血損害[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2004年

9 韓詠霞;H_2受體拮抗劑宜于晚間服用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

10 小成;日本三共公司瞄準(zhǔn)ATⅡAS市場(chǎng)[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2002年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱鳳昌;人白介素6受體拮抗劑2460A和2520A的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

2 陳晶;鼠Ⅰ形可溶性白細(xì)胞介素1受體拮抗劑139A的研究和人可溶性腫瘤壞死因子受體拮抗劑的篩選及研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

3 王麗韞;M受體拮抗劑手性分子的藥理學(xué)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

4 黃s鷖

本文編號(hào)：306221