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cxcl12基因修飾的內(nèi)皮祖細胞進一步促進少突膠質(zhì)前體細胞的功能作用研究

發(fā)布時間:2021-02-18 17:20
  缺血性卒中不僅會導致腦灰質(zhì)的損傷,同時也會導致腦白質(zhì)的損傷。因此在腦損傷修復過程中需要新的少突膠質(zhì)細胞的參與來促進白質(zhì)的修復,而缺血性卒中后誘導少突膠質(zhì)前體細胞(OPC)增殖和分化為少突膠質(zhì)細胞的能力十分有限。研究發(fā)現(xiàn),趨化因子CXCL12和內(nèi)皮祖細胞(EPC)可通過向脫髓鞘部位招募OPC或促進OPC增殖和分化為少突膠質(zhì)細胞來促進髓鞘再生;谇捌趯嶒灲Y(jié)果,我們假設(shè)內(nèi)皮祖細胞和CXCL12的積極作用可以疊加,從而協(xié)同提升OPC的生理功能。在本研究中,我們通過慢病毒載體在內(nèi)皮祖細胞中過表達cxcl12基因來獲得CXCL12-EPC細胞。收集CXCL12-EPC的條件培液(conditioned media,CM)用于處理OPC,探究CXCL12-EPC的CM對OPC增殖、遷移、分化和存活能力的影響,進一步探究CM對OPC下游因子CXCR4、CXCR7、PDGFRα和MBP表達的影響。在本實驗中以人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)、EPC和GFP-EPC的CM作為實驗對照。為了探究CXCL12在OPC中所介導的信號通路,我們采用重組蛋白CXCL12處理OPC,并分別阻斷或下調(diào)了CXCL12兩個... 

【文章來源】:上海交通大學上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

cxcl12基因修飾的內(nèi)皮祖細胞進一步促進少突膠質(zhì)前體細胞的功能作用研究


EPC培養(yǎng)及鑒定結(jié)果

照片,慢病毒,轉(zhuǎn)染


上海交通大學碩士學位論文ture of EPC and immunofluorescence identification results. B: Flidentification of EPC. Scale bar=50 μm.功轉(zhuǎn)染 EPC慢病毒滴度分別是 LV-GFP:5x108個病毒顆粒/ml顆粒/ml。根據(jù)要轉(zhuǎn)染的 EPC 細胞數(shù)計算出需要的病毒光顯微鏡下拍攝同 視野的明場和熒光照片,計算病2-2 所示,90%以上的 EPC 能表達綠色熒光,說明染 EPC 細胞,滿足后續(xù)實驗需要。

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本文編號:3039854

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