本文關鍵詞：亮氨酸干預mTOR表達對局灶性腦缺血自噬的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討亮氨酸干預mTOR表達對局灶性腦缺血自噬及腦缺血損傷的影響。方法:選取健康成年雄性SD大鼠隨機分為生理鹽水組(對照組)、葡萄糖組和亮氨酸組,各組均采用線栓法制作大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,并依據(jù)分組在建模后立即頸靜脈灌注0.9%生理鹽水、5%葡萄糖、1.5%亮氨酸。在缺血6h、12h、24h時麻醉處死大鼠,取缺血側(cè)皮層腦組織,采用Western blot法和免疫組化法檢測mTOR、LC3-Ⅱ的表達情況,以行為學癥狀、腦組織干濕比重及病理改變評價缺血性腦損傷的病變程度。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示,在相同缺血時間段,亮氨酸組與生理鹽水、葡萄糖組相比較,缺血側(cè)大腦皮層內(nèi)mTOR表達增高,LC3-Ⅱ表達減少,差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);免疫組化結(jié)果顯示,只有在缺血12h時,亮氨酸組與生理鹽水、葡萄糖組比較才存在上述差異,而在24h時mTOR表達無統(tǒng)計學差異(p0.05),在6h時LC3-Ⅱ表達無統(tǒng)計學差異(p0.05);將具有神經(jīng)功能障礙且評分為1-3分的實驗大鼠行腦組織病理切片檢查,可見所有大鼠均有局灶性腦缺血相關病理改變,且隨缺血時間的延長,壞死、消失的神經(jīng)細胞增多;在相同缺血時間段,生理鹽水、葡萄糖、亮氨酸各組之間行為學評分、腦組織干濕比重無統(tǒng)計學差異(p0.05),但各組在不同的缺血時間段腦組織干濕比重有統(tǒng)計學差異(p0.05)。結(jié)論:1、神經(jīng)功能障礙評分可一定程度上反映模型動物局灶性腦缺血的形成;2、在腦缺血發(fā)生后6-24h內(nèi),亮氨酸可促進mTOR的表達,在12h時達高峰,此時可一定程度上減弱自噬相關蛋白LC3-Ⅱ的表達;3、在腦缺血發(fā)生6-24h內(nèi),亮氨酸及其刺激mTOR的表達對腦缺血病變相關指標如神經(jīng)功能評分、腦水腫程度及病理改變無明顯改善作用,但隨著缺血時間的延長,腦損害逐步加重。
【關鍵詞】：腦缺血 亮氨酸 mTOR 自噬
【學位授予單位】：南昌大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.3
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文縮略詞表8-10
• 第1章 引言10-14
• 第2章 材料與方法14-22
• 2.1 實驗動物14
• 2.2 主要試劑14-15
• 2.3 主要儀器15
• 2.4 實驗分組15-16
• 2.5 制作大鼠MCAO模型及頸靜脈灌注16-17
• 2.6 Zea Longa評分及建立MCAO模型后的入選標準17
• 2.7 指標的測定及方法17-21
• 2.7.1 腦水腫程度測定17
• 2.7.2 HE染色17-19
• 2.7.3 免疫組化19-20
• 2.7.4 Westen blot法20-21
• 2.8 統(tǒng)計學分析21-22
• 第3章 實驗結(jié)果22-33
• 3.1 神經(jīng)功能障礙評分22-23
• 3.2 腦水腫程度測定23-24
• 3.3 HE染色24-25
• 3.4 免疫組織化學染色分析25-29
• 3.4.1 mTOR結(jié)果分析25-27
• 3.4.2 LC3-Ⅱ結(jié)果分析27-29
• 3.5 Western blot結(jié)果分析29-33
• 第4章 討論33-38
• 4.1 大鼠MCAO模型的建立與評價33-34
• 4.2 亮氨酸激活mTOR34-35
• 4.3 參與調(diào)節(jié)mTOR的主要信號通路及亮氨酸、mTOR抑制自噬的機制探討35-36
• 4.4 自噬對腦缺血作用的探討36-38
• 第5章 結(jié)論38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻40-44
• 綜述 IL-33/ST2 信號通路在缺血性腦損害中的保護作用44-50
• 參考文獻49-50

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本文編號：303972