2-DG抗癇作用的評價目的：探討2-DG抗癇作用的療效。方法：6-8周成年雄性C57BL/6小鼠進行隨機分配為對照組、致癇組、2-DG干預(yù)組,建立匹羅卡品致癇模型。對不同組行為學(xué)的變化進行監(jiān)測,觀察其自發(fā)性癇性發(fā)作的癲癇潛伏期、癲癇評分、癇性發(fā)作持續(xù)時間,同時觀察不同組腦電圖的變化。結(jié)果：1.對不同組（對照組、致癇組、2-DG干預(yù)組）行為學(xué)監(jiān)測顯示：與對照組相比,匹羅卡品致癇后,致癇組、2-DG干預(yù)組41.5%的C57BL/6小鼠存在自發(fā)性癇性發(fā)作。相對于致癇組,中、高劑量2-DG干預(yù)組小鼠潛伏期增加,癲癇發(fā)作評分、癇性發(fā)作持續(xù)時間降低（癲癇潛伏期：15±4分鐘VS35±4、33±5分鐘；癲癇評分為5.1±0.5VS3.9±0.4、3.8±0.5；癇性發(fā)作持續(xù)時間為122±7分鐘VS35±6分鐘、42±7分鐘）,而且有統(tǒng)計學(xué)意義。2.對不同組（對照組、致癇組、2-DG干預(yù)組）腦電圖監(jiān)測顯示：對照組腦電圖是以α、β波為主且波幅較��；匹羅卡品致癇模型組可見大量的尖波、棘波和尖慢波：2-DG干預(yù)組腦電圖是也主要是以α、β波為主且波幅較小。結(jié)論：2-DG在匹羅卡品癲癇模型中具有抗癇作用。2-D... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
2 2-DG抗癇作用的評價
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 材料
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 匹羅卡品癇性發(fā)作模型小鼠行為學(xué)監(jiān)測
        2.3.2 不同組小鼠癲癇潛伏期、癇性發(fā)作持續(xù)時間、癲癇評分結(jié)果
        2.3.3 不同組小鼠小鼠癲癇持續(xù)狀態(tài)的腦電圖記錄結(jié)果
    2.4 討論
        2.4.1 匹羅卡品致癇小鼠模型
        2.4.2 2-DG的抗癇作用
    2.5 結(jié)論
ATP亞基KIR6.1、KIR6.2發(fā)揮抗癇作用">3 2-DG上調(diào)K_ATP亞基KIR6.1、KIR6.2發(fā)揮抗癇作用
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 材料
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 采用RT-PCR技術(shù)測定正常對照組、匹羅卡品致癇組、不同劑量2-DG干預(yù)組小鼠致癇后海馬組織4小時,1、7、30、60天mRNA的變化
        3.3.2 采用western-blot技術(shù)測定正常對照組、匹羅卡品致癇組、不同劑量2-DG干預(yù)組小鼠致癇后海馬組織4小時,1、7、30、60天蛋白的變化
    3.4 討論
ATP通道在抗癇作用中的作用與機制">        3.4.1 K_ATP通道在抗癇作用中的作用與機制
        3.4.2 2-DG通過上調(diào)Kir6.1和Kir6.2 mRNAs和蛋白表達發(fā)揮抗癇作用
    3.5 結(jié)論
ATP通道抗癇作用機制體外實驗研究">4 2-DG經(jīng)K_ATP通道抗癇作用機制體外實驗研究
    4.1 前言
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 實驗方法
        4.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
        4.2.4 常見故障和解決方法
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 在體外海馬腦片CA3區(qū),給予10uM荷包牡丹堿、7.5mM高鉀模擬癇性發(fā)作,誘發(fā)動作電位頻率增加,應(yīng)用盲法膜片鉗技術(shù)監(jiān)測使用10mM 2-DG前后神經(jīng)元細胞動作電位頻率的變化
Glu模擬致癇模型（每10s刺激3次,每次刺激頻率100HZ）,記錄給予2DG后海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTP_Glu（谷氨酸介導(dǎo)突觸傳遞的長時程增強）的變化；給予KATP通道激活劑Diazoxide（300nM）后LTP_Glu的變化以及在KATP通道抑制劑Gliben（20uM）預(yù)處?@@#54-58">        4.3.2 在體外海馬腦片上,高頻電刺激誘發(fā)LTP_Glu模擬致癇模型（每10s刺激3次,每次刺激頻率100HZ）,記錄給予2DG后海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTP_Glu（谷氨酸介導(dǎo)突觸傳遞的長時程增強）的變化；給予KATP通道激活劑Diazoxide（300nM）后LTP_Glu的變化以及在KATP通道抑制劑Gliben（20uM）預(yù)處?@@#54-58
    4.4 討論
        4.4.1 體外海馬腦片癇性模型
ATP通道在抗癇作用中的作用與機制">        4.4.2 K_ATP通道在抗癇作用中的作用與機制
ATP通道激活發(fā)揮抗癇作用">        4.4.3 2-DG介導(dǎo)K_ATP通道激活發(fā)揮抗癇作用
    4.5 結(jié)論
5 2-DG抗癇作用的信號通路研究
    5.1 前言
    5.2 材料與方法
        5.2.1 材料
        5.2.2 實驗方法
        5.2.3 統(tǒng)計學(xué)處理
    5.3 結(jié)果
        5.3.1 采用Elisa技術(shù)測定正常對照組、匹羅卡品致癇組、不同劑量2-DG干預(yù)組小鼠致癇后1、7、30、60天DAG的變化
Glu模擬致癇模型（每10s刺激3次,每次刺激頻率100HZ）,給予PKC激動劑phorbol預(yù)處理后,應(yīng)用盲法膜片鉗技術(shù)記錄給予2-DG后海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTP_Glu的變化">        5.3.2 在體外海馬腦片上,高頻電刺激誘發(fā)LTP_Glu模擬致癇模型（每10s刺激3次,每次刺激頻率100HZ）,給予PKC激動劑phorbol預(yù)處理后,應(yīng)用盲法膜片鉗技術(shù)記錄給予2-DG后海馬CA3區(qū)神經(jīng)元LTP_Glu的變化
    5.4 討論
        5.4.1. PLCγ1作為2-DG介導(dǎo)BDNF和trkB信號通路發(fā)揮抗癇作用的下游信號通路
        5.4.2 DAG作為2-DG介導(dǎo)BDNF→trkB→PLCγ1信號通路的第二信使
        5.4.3 PKC作為2-DG介導(dǎo)BDNF→trkB→PLCγ1→DAG信號通路的功能蛋白
ATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信號通路的離子通道受體">        5.4.4 K_ATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信號通路的離子通道受體
    5.5 結(jié)論
        5.5.1 DAG的下降與2-DG的抗癇作用有關(guān)；PKC激動劑能抑制2-DG的抗癇作用
參考文獻
綜述
    糖酵解在癇性發(fā)作中的能量代謝特點
        參考文獻
    糖酵解抑制劑2脫氧葡萄糖抗癇機制
        參考文獻
攻讀博士學(xué)位期間論文發(fā)表和參與課題
致謝



本文編號：3012644