肝性腦病（hepatic encephalopathy, HE）是由肝功能嚴(yán)重不足引起的神經(jīng)功能紊亂綜合征，是肝病患者最常見的并發(fā)癥和死亡原因之一。關(guān)于其發(fā)病機(jī)制的學(xué)說眾多，至今尚未完全闡明，臨床上也無特效療法。HE的運(yùn)動(dòng)障礙和中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system, CNS）內(nèi)的基底神經(jīng)節(jié)的精細(xì)調(diào)控狀態(tài)密切相關(guān)。在基底神經(jīng)節(jié)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)中，黑質(zhì)網(wǎng)狀部（substantia nigra pars reticulate, SNr）是運(yùn)動(dòng)調(diào)控環(huán)路上的關(guān)鍵一環(huán)，主要由γ-氨基丁酸（Gamma-amino butyric acid, GABA）能投射神經(jīng)元組成。研究表明，GABA與HE的腦細(xì)胞功能紊亂密切相關(guān)，但其作用機(jī)制尚不明確。氯離子（Cl^-）是細(xì)胞內(nèi)最重要的陰離子。特別在神經(jīng)系統(tǒng)，神經(jīng)元內(nèi)外氯離子濃度保持相對平衡狀態(tài)，即形成氯離子穩(wěn)態(tài)，是維持神經(jīng)元和局部環(huán)路形態(tài)和機(jī)能穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境基礎(chǔ)。氯離子穩(wěn)態(tài)失衡可引起GABA能傳遞的改變，氯離子穩(wěn)態(tài)及其調(diào)控因子已經(jīng)成為多種GABA相關(guān)神經(jīng)病理性疾病的潛在治療靶點(diǎn)。研究顯示CNS內(nèi)不同部位的氯穩(wěn)態(tài)失衡參與多種神經(jīng)... 

【文章來源】：中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：127 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
Abstract
前言
文獻(xiàn)回顧
實(shí)驗(yàn)一 轉(zhuǎn)基因小鼠黑質(zhì)網(wǎng)狀部氯穩(wěn)態(tài)失衡參與肝性腦病的病理過程
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 主要材料及試劑
        2.3 常用儀器
        2.4 誘導(dǎo)建立ALF和 HE
        2.5 神經(jīng)功能的評估
        2.6 組織學(xué)分析
        2.7 曠場實(shí)驗(yàn)檢測運(yùn)動(dòng)能力
        2.8 組織制備和熒光測量檢測細(xì)胞內(nèi)的氯離子濃度
        2.9 實(shí)時(shí)定量RT-PCR和Western blot組織的制備
        2.10 實(shí)時(shí)定量RT-PCR
        2.11 Western blot分析
        2.12 雙重免疫熒光標(biāo)記
        2.13 SNr內(nèi)GABA能神經(jīng)元亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)中檢測免疫熒光標(biāo)記 KCC2 表達(dá)情況
        2.14 尼氏染色
        2.15 立體定位手術(shù)和黑質(zhì)內(nèi)注射藥物
        2.16 血氨及大腦氨含量的測定
        2.17 大腦含水量測定
        2.18 數(shù)據(jù)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 TAA導(dǎo)致HE和運(yùn)動(dòng)遲緩
        3.2 TAA導(dǎo)致SNr內(nèi)GABA能神經(jīng)元內(nèi)的氯離子濃度的增加
        3.3 TAA降低SNr內(nèi)KCC2的表達(dá)及其對GABA能神經(jīng)元細(xì)胞膜的靶向錨定
        3.4 TAA沒有改變SNr內(nèi)神經(jīng)元數(shù)目
        3.5 黑質(zhì)內(nèi)注射藥物的作用
    4 討論
實(shí)驗(yàn)二 臨床檢測氯穩(wěn)態(tài)失衡參與肝性腦病的病理過程
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)對象
        2.2 主要材料及試劑
        2.3 常用儀器
        2.4 實(shí)時(shí)定量 RT-PCR 檢測
        2.5 血氨的測定
        2.6 數(shù)據(jù)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 實(shí)驗(yàn)組和對照組外周血中KCC2和NKCC1 mRNAs水平的比較
        3.2 KCC2、NKCC1 mRNAs水平與患者臨床特征之間的關(guān)系
        3.3 KCC2、NKCC1 mRNAs水平與患者血氨水平的關(guān)系
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡歷和研究成果
致謝



本文編號：3009627