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缺氧狀態(tài)下膠質(zhì)瘤釋放的sEV可誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞向周細(xì)胞轉(zhuǎn)化并促進(jìn)腫瘤血管生成

發(fā)布時(shí)間:2021-01-22 11:07
  目的:探討低氧狀態(tài)下膠質(zhì)瘤釋放的小胞外囊泡(sEV)誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(GSC)向周細(xì)胞轉(zhuǎn)化,并促進(jìn)腫瘤血管生成和腫瘤發(fā)生發(fā)展。方法:采用超高速離心法和透射電鏡(TEM)、納米粒子跟蹤分析(NTA)及免疫印跡法(Western blot)對(duì)缺氧或常氧條件下膠質(zhì)瘤衍生的sEV進(jìn)行分離和鑒定。將PBS作為空白組,常氧sEV作為對(duì)照組,缺氧sEV作為實(shí)驗(yàn)組分別與GSC或HUVEC共培養(yǎng),再用0.4μm的Transwell小室構(gòu)建HUVEC與GSC的共培養(yǎng)體系。抑制劑組用細(xì)胞松弛素D預(yù)處理部分防止細(xì)胞吸收sEV。CCK-8法檢測(cè)GSC或HUVEC增殖率,Transwell(8.0μm)室或劃痕實(shí)驗(yàn)觀察各細(xì)胞遷移情況,小管形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞的血管生成能力,Western blot及Elisa法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞上清和常氧缺氧sEV內(nèi)各靶蛋白變化。最后建立裸鼠腫瘤皮下模型,將PBS、常氧sEV、缺氧sEV的用尾靜脈的方式輸注,并將依魯替尼和貝伐單抗作為靶向抑制劑持續(xù)給藥,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)瘤體的生長(zhǎng),用免疫組化和熒光觀察瘤體血管生成情況。結(jié)果:與PBS相比,常氧sEV和缺氧sEV的處理能促進(jìn)GSC和HUVEC的增... 

【文章來(lái)源】:重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
2 結(jié)果
3 討論
全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
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本文編號(hào):2993117

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