目的:通過(guò)建立大鼠腦缺血再灌注模型,研究自噬在大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷中的作用;探討自噬在不同時(shí)間點(diǎn)的動(dòng)態(tài)變化;探討丁苯酞注射液（butyphthalide injection,NBP）對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠細(xì)胞自噬的影響。方法:選取清潔級(jí)別雄性SD（Sprague Dawley）大鼠64只,體重250-300g,隨機(jī)分為4組,分別為假手術(shù)組（sham組）、模型組（I/R組）、丁苯酞組（NBP組）、自噬抑制劑組（3-MA組）,每組16只大鼠,將每組分成2個(gè)時(shí)間段,即缺血再灌注后24h組及72h組（每組8只）,除sham組外,I/R組、NBP組及3-MA組采用改良線栓法制作大腦中動(dòng)脈阻塞2h模型,NBP組于缺血同時(shí)予以腹腔注射丁苯酞注射液（6mg/kg/天,每天2次）,其中72h組連續(xù)注射三天;3-MA組于術(shù)前半小時(shí)腹腔注射3-MA（10mg/kg）;取3個(gè)時(shí)間點(diǎn)即再灌注后2h、再灌注后24h和再灌注后72h,進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分;取2個(gè)時(shí)間點(diǎn),即缺血再灌注后24h和72h后取材,采用TTC（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride）染色法檢測(cè)各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

腦梗死模型制作

造模成功后出現(xiàn)honer征

碩士學(xué)位論文10圖2-3：提尾懸掛時(shí)不能完全伸展圖2-4:心臟灌注后取出的腦組織左側(cè)前肢2.2.5TTC染色測(cè)腦梗死體積每組于再灌注后24h和再灌注后72h分別取3只大鼠處死，斷頭，小心剝出完整的腦組織置于-20℃冰箱中冰凍20分鐘，隨即取出，在冰塊上切除額極，自視交叉水平處行冠狀位切片，每片厚度約2mm，共切成5片。立即放入2%TTC染液中，37℃恒溫箱避光孵育30分鐘，期間使用鑷子輕柔翻動(dòng)，使腦組織染色均勻。將已染色好的腦組織置入固定液中（4%多聚甲醛），24小時(shí)后數(shù)碼相機(jī)拍照。染色呈紅色為正常腦組織，染色呈白色為梗死腦組織。將圖像導(dǎo)入ImageProPlus6.0計(jì)算腦梗死體積比。2.2.6HE染色觀察腦組織神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)（1）新鮮標(biāo)本取材每組大鼠分別于缺血再灌注后24h和72h大鼠處死取新鮮腦組織，用已消毒刀片切病灶側(cè)腦組織標(biāo)本，置入固定液中（4%多聚甲醛）固定。（2）水洗、脫水、透明固定后水洗15min。進(jìn)行酒精梯度脫水，濃度及時(shí)間分別為75%50min、85%50min、95%20min、95%20min、100%20min、100%20min。用二甲苯透明，2道，各30min。（3）浸蠟、包埋

【參考文獻(xiàn)】：
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