目的：1．檢測Notch1胞內(nèi)段（NICD1）對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞NF-κB信號活性的影響2．比較NICD1與其衍生肽段ΔNICD1（1773-2230）對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞NF-κB信號活性影響的差異性3．檢測NICD1與其衍生肽段ΔNICD1（1773-2230）對NF-κBp65和NF-κBp50表達(dá)水平的影響4．明確NICD1及其衍生肽段ΔNICD1（1773-2230）與NF-κBp50之間的相互作用關(guān)系方法：1．以pNL-IRES2-EGFP-NICD1為模板，通過PCR法擴(kuò)增獲取目的基因NICD1和ΔNICD1（1773-2230）序列，再以p3xFlag-CMV-10為目標(biāo)載體，構(gòu)建標(biāo)簽融合的真核表達(dá)載體p3xFlag-CMV-10-NICD1和p3xFlag-CMV-10-ΔNICD1。2．以p3xFlag-CMV-10-NICD1和p3xFlag-CMV-10-ΔNICD1分別轉(zhuǎn)染人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞，并以WesternBlot法鑒定NICD1和ΔNICD1在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的表達(dá)情況。3．提取NICD1和ΔNICD1過表達(dá)的U251細(xì)胞的核蛋白，采用電泳遷移率分析實(shí)... 

【文章來源】：福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Notch1和Hes1、Hes5在星形細(xì)胞瘤中的表達(dá)及其相關(guān)性研究[J]. 王春華,鄭志竑,楊衛(wèi)忠,陳春美.  福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(03)
[2]蛋白質(zhì)相互作用的研究方法[J]. 孫宇,賈凌云,任軍.  分析化學(xué). 2007(05)

博士論文
[1]notch-1基因在膠質(zhì)瘤中的作用及對Akt-mTOR通路的調(diào)控[D]. 趙能江.福建醫(yī)科大學(xué) 2010

碩士論文
[1]Notch1基因?qū)θ四z質(zhì)瘤U251細(xì)胞增殖和周期的影響及其機(jī)制的初步研究[D]. 郭亞.福建醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號：2983798