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Rho激酶在中樞炎性脫髓鞘病變軸突生長和突觸形成中的作用機制研究

發(fā)布時間:2021-01-15 19:51
  第一部分多發(fā)性硬化患者血清及法舒地爾處理后對神經(jīng)元突觸的影響目的:了解多發(fā)性硬化(Multiple sclerosis, MS)患者血清對神經(jīng)元突觸的影響及Rho激酶抑制劑法舒地爾(Fasudil)的作用。方法:收集63例MS患者血清,36例正常對照血清。首先隨機抽取8例MS血清和8例正常血清,采用CycLex(?) Rho-kinase Assay Kit測定血清Rho激酶活性。隨后將血清分成單獨血清組和血清加Rho激酶抑制劑Fasudil組。單獨血清以1:10加入培養(yǎng)第6-7天的原代小鼠皮層神經(jīng)元,血清加Fasudil組預(yù)先在血清中加Fasudil(終濃度15μg/ml培養(yǎng)液)并室溫作用1小時,然后加入至培養(yǎng)神經(jīng)元。神經(jīng)元繼續(xù)培養(yǎng)48小時后用MTT法檢測細胞活力,測定LDH釋放率。4%多聚甲醛固定細胞后,進行MAP-2和Tau染色,熒光顯微鏡下觀察突觸生長情況,并測量神經(jīng)突起長度。取部分固定神經(jīng)元進行突觸標記蛋白Synaptophysin免疫熒光染色,提取的蛋白用Western Blot技術(shù)分析Synaptophysin表達。結(jié)果:與正常血清相比,MS血清Rho激酶活性增高。MS血... 

【文章來源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
引言
    參考文獻
第一部分 多發(fā)性硬化患者血清及法舒地爾處理后對神經(jīng)元突觸的影響
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第二部分 Rho激酶在原代神經(jīng)元突觸損傷和形成中的作用及其機制研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
第三部分 Rho激酶抑制劑法舒地爾在實驗性自身免疫性腦脊髓炎中對神經(jīng)元突觸形成的作用及其機制研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    參考文獻
全文總結(jié)
綜述
    參考文獻
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致謝



本文編號:2979413

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