發(fā)布時間：2021-01-14 13:10

　　第一部分RNA干擾技術(shù)對PC12細(xì)胞CENP-E基因表達(dá)影響觀察1、目的：建立干擾CENP-E基因表達(dá)的質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)染PC12細(xì)胞，觀察CENP-E的表達(dá)。2、方法：人工合成PShRNA-CENP-E質(zhì)粒1、2、3，將3種質(zhì)粒，與對照組空載體質(zhì)粒以脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法共同轉(zhuǎn)染PC12細(xì)胞，在轉(zhuǎn)染24小時后用熒光顯微鏡評價轉(zhuǎn)染的效率。然后用Western bloting、免疫組化評價細(xì)胞內(nèi)CENP-E表達(dá)變化。3、結(jié)果：成功合成的3種PShRNA-CENP-E質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染PC12細(xì)胞的成功率約為72.5%，Western Bloting和免疫組化示：質(zhì)粒3轉(zhuǎn)染后，細(xì)胞內(nèi)CENP-E的表達(dá)水平下降。4、結(jié)論：PShRNA-CENP-E質(zhì)粒3能特異性降低PC12細(xì)胞中CENP-E表達(dá)。第二部分NGF誘導(dǎo)PC12細(xì)胞神經(jīng)元樣分化及l(fā)actacystin誘導(dǎo)下建立帕金森細(xì)胞模型1、目的：誘導(dǎo)PC12長出突觸呈神經(jīng)元樣化，觀察不同濃度lactacystin誘導(dǎo)PC12細(xì)胞凋亡情況，選擇最適合濃度構(gòu)建PD細(xì)胞模型。2、方法：培養(yǎng)PC12細(xì)胞，傳代后，加入終濃度為50μg/L的神經(jīng)生長因子（NGF）培養(yǎng)24小時... 

【文章來源】：廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文縮略詞對照表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在讀碩士期間發(fā)表論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]CENP-E變異體在不同腫瘤細(xì)胞株及癌組織中的表達(dá)差異[J]. 閆琛,凌康,劉子杰,翁亞光.  中國生物制品學(xué)雜志. 2010(07)
[2]CENP-E基因表達(dá)下調(diào)可增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞對紫杉醇的敏感性[J]. 李素彥,翁亞光,蔡燕.  腫瘤. 2009(02)
[3]蛋白酶體抑制劑誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元重啟細(xì)胞周期的作用及機(jī)制[J]. 張振濤,曹學(xué)兵,孫圣剛,王嵐,徐麗,徐巖.  卒中與神經(jīng)疾病. 2006(03)
[4]Progress and perspective of the kinetochore-associated motor proteins[J]. LIU Dan, JIN Changjiang & YAO Xuebiao Institute of Cell Dynamics, University of Science and Technology of China, Hefei 230027, China Correspondence should be addressed to Yao Xuebiao (e-mail: yaoxb@ustc.edu.cn).  Chinese Science Bulletin. 2003(02)



本文編號：2976919