目的：采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的方法上調(diào)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞中LRIG1基因的表達(dá),探討LRIG1基因?qū)θ四X膠質(zhì)瘤細(xì)胞細(xì)胞周期、凋亡率、DNA損傷修復(fù)、細(xì)胞增殖及放療敏感性的影響及其可能的作用機(jī)制。方法：通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)染含有LRIG1基因的質(zhì)粒進(jìn)入人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞,得到高表達(dá)LRIG1的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染細(xì)胞。通過(guò)G418篩選并建立穩(wěn)定表達(dá)LRIG1的細(xì)胞株。采用Western Blot及RT-PCR方法檢測(cè)細(xì)胞中LRIG1、P27、Bax、 Bcl-2及Rad51基因或蛋白表達(dá)的變化。CCK-8法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率。細(xì)胞染色后流式細(xì)胞儀測(cè)定其細(xì)胞周期分布及凋亡率�？寺⌒纬蓪�(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞放療敏感性。彗星分析試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞放療前后DNA損傷的修復(fù)。結(jié)果：成功建立穩(wěn)定表達(dá)LRIG1細(xì)胞株,熒光顯微鏡下可見(jiàn)細(xì)胞表達(dá)綠色熒光蛋白,其LRIG1蛋白表達(dá)量高于空載體對(duì)照組（P<0.05）。轉(zhuǎn)染含LRIG1質(zhì)粒后,人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞LRIG1mRNA表達(dá)上調(diào)（P<0.05）。LRIG1基因顯著抑制了人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖,轉(zhuǎn)染LRIG1基因72h后較未轉(zhuǎn)染的U251細(xì)胞的細(xì)胞增殖抑制率為26.4%。LRI... 

【文章來(lái)源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
第一部分 穩(wěn)定表達(dá)LRIG1基因的人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株的建立和鑒定
    前言
    材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
第二部分 LRIG1基因表達(dá)上調(diào)對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡及周期的影響及其機(jī)制
    前言
    材料和方法
    結(jié)果
    討論
第三部分 LRIG1對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞放療敏感性的影響及其機(jī)制
    前言
    材料和方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：2960413