背景神經(jīng)母細胞瘤（neuroblastoma,NB）為一種腎上腺起源的腫瘤,是新生兒發(fā)病率較高的癌癥。有大約50%的NB的發(fā)生是在2歲以內(nèi)的嬰幼兒時期,NB占兒童腫瘤的比例約為6-10%,致死率約為15%。NB是一種神經(jīng)源性惡性腫瘤,NB細胞在體內(nèi)和體外培養(yǎng)中,都出現(xiàn)了分化成神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞的現(xiàn)象,因此將NB細胞作為一種細胞模型研究腫瘤分化和凋亡及其機制具有重要意義。目前國內(nèi)外采用較多的用于研究腫瘤的生長、分化、凋亡等機制的NB細胞系主要有SH-SY5Y、SK-N-SH、SK-SN-BE2、LA-N-5等。而我們實驗采用的NB細胞SH-SY5Y、SK-N-SH能夠支持質(zhì)粒的復(fù)制,使克隆的基因片段得到高效的表達,可表達神經(jīng)元標(biāo)志性物質(zhì),其細胞形態(tài)及其某些生理功能與正常神經(jīng)元有相似之處,是目前國際上研究神經(jīng)細胞功能比較理想的細胞模型。PCNP（PEST-containing nuclear protein）是一種新近發(fā)現(xiàn)的含有PEST序列的核蛋白,PCNP作為泛素連接酶NIRF（Np95/ICBP90-like RING figer protein）的底物首次于2004年由日本科學(xué)家... 

【文章來源】：河南大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

PCNP大數(shù)據(jù)分析結(jié)果

核蛋白 PCNP 對人神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖和凋亡的影響PCNP 的表達量相比對照組較低(P<0.01)；圖 B 為 Western內(nèi)參，Western blot 檢測 PCNP 蛋白表達；圖 C 對 PCNP 進行的 SH-SY5Y 細胞和 SK-N-SH 細胞穩(wěn)定株在 26KD 處 PCNP而沉默的穩(wěn)定株 PCNP 表達明顯低于對照(P<0.01)，證明 PCNP 過表達及沉默穩(wěn)定株均構(gòu)建成功。A

核蛋白 PCNP 對人神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖和凋亡的影響減弱細胞克隆形成能力平板克隆檢測 NB 細胞克隆形成能力，如圖 1-4。圖 A 為平板克隆數(shù)進行統(tǒng)計分析，可見 PCNP 過表達后 SH-SY5Y 和 SK-N-SH減少(P<0.01)，PCNP 沉默后細胞克隆數(shù)比對照組增加(P<0.01)，因神經(jīng)母細胞瘤細胞克隆形成能力，而沉默促進細胞克隆形成能力


本文編號：2931263