目的:本研究旨在探討不同濃度大蒜素對星形膠質細胞增殖和遷移的影響。方法:1.三種大鼠大腦皮質星形膠質細胞原代培養(yǎng)方法比較。30只新生24小時以內(nèi)的Wistar大鼠,隨機分成3組,每組10只。每組稱取等量皮質。A組:通過胰蛋白酶消化+渦旋振蕩、差速離心+振蕩法;B組:通過胰蛋白酶消化、差速貼壁+恒溫搖床振蕩法;C組:通過機械吹打、差速貼壁+恒溫搖床振蕩法;定期顯微鏡下觀察細胞貼壁情況、生長狀態(tài)、生長速度,純化后每組計數(shù)細胞數(shù)目,測定細胞純度。本實驗重復三次,綜合上述結果對A組培養(yǎng)方法進行評價。2.探討不同濃度大蒜素對星形膠質細胞增殖和遷移的影響。以第一部分A組方法進行星形膠質細胞原代培養(yǎng)、測定純度。傳代后以不同濃度大蒜素（對照組0 μg/ml,A 組 50μg/ml,B 組 100μg/ml,C 組 200 μg/ml）干預 24 小時,通過CCK8及劃痕實驗,評價不同濃度大蒜素對星形膠質細胞增殖及遷移能力的影響。結果:1.1各組同等細胞密度下提取所得細胞懸液量:A組41.8±0.15ml,B組41.3±0.1ml,C 組 41.5±0.1ml,三組比較 F=11.3,P=0.009,兩... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１倒置顯微鏡下觀察：箭頭處為雜細胞??

??：：?—?＾??＊?’?＇?－，、??圖１倒置顯微鏡下觀察：箭頭處為雜細胞??２．?３各組細胞計數(shù)：??各組細胞經(jīng)１８日培養(yǎng)均己覆蓋培養(yǎng)瓶瓶底達到９０％以上，Ａ組；Ｂ組、Ｃ組（經(jīng)恒溫??搖床振蕩進一步純化后）經(jīng)０．１２５％胰酶消化、離心、重懸后計數(shù)。各組收獲細胞：各組收??獲細胞數(shù)：Ａ?組（１４．２１?土?０．０５）?ｘｌＯ７?Ｂ?組（１３．９６±０．０３）?ｘｌ０７Ｃ?組（１３．４３±０．０３）?ｘｌＯ７。??三組比較?Ｆ＝２９４．１１８，?Ｐ＜０．?００１，兩兩組間比較：ＰＡ／Ｂ＝０．?０１３，?ＰＡ／Ｃ＜０．?００１，?ＰＢ／Ｃ＝０．?００１。三組間??存在統(tǒng)計學差異，各組收獲細胞數(shù)如圖２所示：??

圖３各組細胞擴增率??２．?５各組細胞純度鑒定結果：??各組處理后所得細胞經(jīng)ＧＦＡＰ－ＦＩＴＣ免疫焚光結合ＤＡＰＩ染色（見圖４），每次每組隨機??選�。祩�高倍視野，每組各１５個高倍視野，分別計算純度。眾多研究人員使用差速貼壁??及搖床振蕩純化，都得到了比較高純度的星形膠質細胞［２°＿２２］［２８］。各組純度結果：Ａ組：９７．?８７％??土０．４９％?Ｂ組：９５．?９０％土０．４５％?Ｃ組：９６．?３８％?±０．５９％，見表４。三組之間純度結果分析：??Ｆ＝５９．?２５８，Ｐ〈０．?００１，具有統(tǒng)計學差異；兩兩比較：ＰＡ／Ｂ＜０．?００１，?Ｐｖｅ〈０．?００１，ＰＢＡ．＝０．?０５３。Ａ?組??純度最高且與Ｂ、Ｃ組間具有顯著的統(tǒng)計學差異；Ｂ、Ｃ組之間無統(tǒng)計學差異。??圖４星形膠質細胞免疫焚光圖：綠色為ＧＦＡＰ染色，藍色為ＤＡＰＩ染色???表４?各組提取所得星形膠質細胞純度（％）???組別?均數(shù)?標準差?樣本量??Ａ?組?９７．８７?０．４９?１５??Ｂ?組?９５．９０?０．４５?１５??Ｃ?組?９６．３８?０．５９?１５??

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：2916968