目的本實(shí)驗(yàn)通過制備線栓法大鼠大腦中動(dòng)脈阻斷模型（MCAO模型）,構(gòu)造與人體環(huán)境類似的腦缺血模型,應(yīng)用尼莫地平并研究藥物對大鼠腦缺血自噬的作用及影響,及藥物對大鼠腦缺血的治療作用。方法（1）MCAO模型的建立、篩選及評(píng)分90只SD大鼠隨機(jī)分為三組,尼莫地平處理組,模型對照組（對照組）,假手術(shù)組,每組30只（n=30）。尼莫地平處理組為在MCAO模型完成的基礎(chǔ)上,拔除線栓以造成缺血再灌注損傷,在拔除線栓前1H,拔線栓后6H、12H分別腹腔注射尼莫地平1mg/kg。模型對照組,基本要求同尼莫地平處理組,僅將注射藥物替換為等體積的0.9%的生理鹽水。假手術(shù)組在模型制備過程中,線栓僅插入1cm,以避免大腦中動(dòng)脈形成缺血灶,仍在同一時(shí)間點(diǎn)注射生理鹽水。24H后對模型進(jìn)行檢測,根據(jù)模型錄入標(biāo)準(zhǔn),選取符合標(biāo)準(zhǔn)的模型。（2）Western blot免疫印跡檢查結(jié)果及分析將完成模型制備的大鼠按各組要求注入藥物,分入藥物處理組、模型對照組、假手術(shù)組,并做好標(biāo)記。缺血再灌注后1h、6h、12h,三個(gè)時(shí)間點(diǎn),提取各組腦蛋白,并測定蛋白濃度,通過調(diào)整上樣量使每組蛋白總量一致。通過Western blot免疫印跡測... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

缺血再灌注1H時(shí)相關(guān)蛋白表達(dá)Figure3.1expressionofrelatedproteinat1Hofischemiareperfusionβ-actin45KD

圖 3.1 缺血再灌注 1H 時(shí)相關(guān)蛋白表達(dá) expression of related protein at 1H of ischemia ren1 6Ⅱ 1R 2tin 4 模型對照組 假手術(shù)組 藥物處理組

如圖 3.1、3.2、3.3，為各時(shí)間段相關(guān)蛋白表達(dá)情況。圖3.4、3.5、3.6 為根據(jù)各條帶灰度值分析結(jié)果。（2）在模型對照組中，隨著時(shí)間的進(jìn)展，Beclin1 表達(dá)逐步提高，并在 12h 時(shí)達(dá)到最高。LC3-Ⅱ表達(dá)同樣隨時(shí)間逐步增高，但在 6h 時(shí)表達(dá)略高于 12h 組。而自噬通路蛋白 m-TOR 的表達(dá)則相反，在缺血再灌注發(fā)生初期表達(dá)要高于晚期。（3）藥物處理組中 Beclin1 及 LC3-Ⅱ的表達(dá)增高，但增幅不如對照組明顯。通路蛋白 m-TOR 在藥物處理組的表達(dá)與模型對照組相反，其表達(dá)隨著時(shí)間推移逐漸增多。（4）假手術(shù)組由于未發(fā)生缺血再灌注損傷，三種蛋白的表達(dá)未見明顯變化，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（5）分析三個(gè)時(shí)間點(diǎn)結(jié)果

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2911310