缺血性腦卒中,又稱腦缺血,是一類由于血管狹窄或閉塞造成的短暫或永久性的腦供血不足引起的神經(jīng)系統(tǒng)疾病。隨著社會的發(fā)展,缺血性腦卒中的發(fā)病率逐年增高,已嚴(yán)重危害人類的健康。缺血性腦卒中病理機(jī)制復(fù)雜,目前尚無有效的藥物治療手段。細(xì)胞自噬是指細(xì)胞通過自噬泡和溶酶體途徑對胞內(nèi)物質(zhì)進(jìn)行降解的過程。對線粒體的選擇性自噬被稱為線粒體自噬。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),在腦缺血后的再灌注過程中,神經(jīng)元內(nèi)的線粒體自噬被激活并發(fā)揮抗缺血性腦損傷作用,提示調(diào)控線粒體自噬可能是一種干預(yù)缺血性腦卒中的新策略。但是,缺血后神經(jīng)元線粒體自噬發(fā)生及調(diào)控的過程尚不完全清楚。神經(jīng)元形態(tài)高度極化,具有纖長的軸突,神經(jīng)元軸突中分布有大量的線粒體,它們對神經(jīng)功能的維持十分重要。然而,自噬的最終執(zhí)行者——溶酶體主要集中于神經(jīng)元細(xì)胞胞體。這樣的分布差異提示缺血神經(jīng)元軸突線粒體可能存在特異的自噬調(diào)控機(jī)制,然而目前尚無研究報道。本課題旨在明確缺血神經(jīng)元中軸突線粒體的清除過程,并闡明其調(diào)控機(jī)制。本研究將有助于加深對神經(jīng)元線粒體自噬的認(rèn)識,并為進(jìn)一步利用線粒體自噬干預(yù)缺血性腦損傷提供新思路,為抗缺血性腦損傷的藥物靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)提供重要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。第一部分... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

氛精剝奪一再淮激活神經(jīng)元線粒體自噬

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文?第一部分??１．４．４熒光標(biāo)記氧糖剝奪－再灌神經(jīng)元中的線粒體與自噬泡??由于軸突中的自噬泡未完全成熟，其酸性可能不足以使ＧＦＰ熒光淬滅。因此，??我們進(jìn)一步使用Ｍｉｔｏ－ＧＦＰ與ｍＣｈｅｒｒｙ－ＬＣ３分別標(biāo)記線粒體與自嗤泡，觀察它們的??共定位情況。結(jié)果顯示：ＯＧＤ－Ｒｅｐ增加了神經(jīng)元胞體與軸突中的自噬泡的數(shù)量（圖??１－５．八與８），提示〇００－１＾口激活了自噬。但０００－１＾？僅在胞體內(nèi)增加了含線粒??體的自喔泡，即線粒體自嗟泡（１１１丨１；０＾１＾０３０１１＾）的數(shù)量（圖１－５．八與〇。自嗟抑??制剖巴佛洛霉素Ａ１?（ｂａｆｉｌｏｍｙｃｉｎＡｌ，?ＢａｆＡｌ）可引起自嗟泡的累積（圖１－５．?Ａ與??Ｂ），但該作用也只增加了胞體中線粒體自噬泡的數(shù)量（圖１－５．Ａ與Ｃ），而不引起??軸突線粒體自噬泡的數(shù)量變化。以上結(jié)果明確了?ＯＧＤ－Ｒｅｐ中，線粒體自噬激活僅??存在于神經(jīng)元胞體中。??Ａ

Ｆｉｇｕｒｅ?１－６．?Ａｔｇ７?ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ?ｆａｉｌｓ?ｔｏ?ｒｅｖｅｒｓｅ?ＯＧＤ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ?ａｘｏｎａｌ??ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ?ｌｏｓｓ．??（Ａ－Ｅ）?Ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｆｒｏｍ?ｔｈｅ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ｇｅｒｍｌｉｎｅ?ｍｉｃｅ?ｗｅｒｅ??ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ?ｔｏ?２０?ｍｉｎ?ｏｆ?ＯＧＤ?ｉｎ?ＤＩＶ８．?Ｔｈｅ?ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ?ｍａｒｋｅｒ?Ｈｓｐ６０?ａｎｄ?ｎｅｕｒｏｎａｌ??ｍａｒｋｅｒ?Ｐ－Ｔｕｂｕｌｉｎ?ＩＩＩ?ｗｅｒｅ?ｓｔａｉｎｅｄ?ｂｙ?ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ?ａｔ?４０?ｍｉｎ?ａｆｔｅｒ?ｒｅｐｅｒｆｌｉｓｉｏｎ．??（Ａ）?Ｔｈｅ?ＡＴＧ７?ｌｅｖｅｌ?ｉｎ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ａｔｇ７１ｌ１Ｊ＼?ｎｅｓ－Ｃｒ＾?ｍｉｃｅ??ｗａｓ?ｍｅａｓｕｒｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ．?（Ｂ）?Ｉｍａｇｅｓ?ｓｈｏｗ?ｔｈｅ?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ?ｓｔｒａｉｇｈｔｅｎｅｄ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Regulation of mitophagy in ischemic brain injury[J]. Yang Yuan,Xiangnan Zhang,Yanrong Zheng,Zhong Chen.  Neuroscience Bulletin. 2015(04)



本文編號：2903119