目的:神經(jīng)損傷的治療是臨床上有待解決難點(diǎn)問題之一,已有實(shí)驗(yàn)證明抑制或敲除PTEN（phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten）基因,能夠顯著促進(jìn)受損視神經(jīng)及皮質(zhì)脊髓束的軸突再生。因此我們擬通過檢測PTEN基因在坐骨神經(jīng)損傷后的表達(dá)量的變化以及抑制PTEN基因表達(dá)后外周感覺神經(jīng)元軸突的再生情況來證實(shí)PTEN基因?qū)Ω杏X神經(jīng)元軸突再生的影響。方法:1、本實(shí)驗(yàn)利用成年雌性ICR（Institute of Cancer Research）小鼠坐骨神經(jīng)切斷模型（Axotomy）,提取正常成年雌性ICR小鼠的背根神經(jīng)節(jié)與坐骨神經(jīng)切斷術(shù)后3天的成年雌性ICR小鼠的DRG（dorsal root ganglia）,分別進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡（Western-Blot）、逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）以及切片染色檢測PTEN基因在坐骨神經(jīng)損傷以后的表達(dá)情況。2、分別取正常成年雌性ICR小鼠與Axotomy術(shù)后三天小鼠的DRG進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),各組內(nèi)分別加入不同濃度的PTEN抑制劑,培養(yǎng)二十四小時(shí)后,測量軸突的長度,檢測抑制PTEN基因的表... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

成年小鼠未做雙側(cè)坐骨神經(jīng)損傷手術(shù)和坐骨神經(jīng)損傷術(shù)后3天，取L

提取對(duì)照組（Ctrl）以及坐骨神經(jīng)損傷組（Axotomy，損傷后飼養(yǎng)三天）的小鼠L4、L5背根神經(jīng)節(jié)進(jìn)行切片，以Phospho-S6RibosomalProtein(p-S6)抗體作為一

SF1670組與對(duì)照組之間、bpv（pic）組與對(duì)照組之間均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（圖5a、b）。圖3 取成年小鼠L4，5背根神經(jīng)節(jié)（DRG），充分消化后加入不同濃度PTEN抑制劑，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，后刮取貼壁的細(xì)胞，提取蛋白進(jìn)行Western-Blot實(shí)驗(yàn)，兩組的β-肌動(dòng)蛋白（β-actin）用來標(biāo)定蛋白總量相同，加入PTEN抑制劑的條帶灰度明顯深于對(duì)照組，表明加入PTEN抑制劑后


本文編號(hào)：2898413