第一部分OTULIN對局灶腦缺血/再灌注大鼠腦內小膠質細胞活化和神經(jīng)炎癥的影響及機制研究目的1.研究OTULIN在局灶腦缺血/再灌注大鼠大腦皮質缺血旁組織內表達的時間規(guī)律;2.探索OTULIN過表達對局灶腦缺血/再灌注大鼠是否具有神經(jīng)保護作用;3.探索OTULIN對局灶腦缺血/再灌注大鼠神經(jīng)炎癥反應的調控作用及機制;4.探索OTULIN對小膠質細胞介導的神經(jīng)炎癥反應的影響及機制。方法1.SD大鼠隨機分為假手術（Sham）組和模型（tMCAO）組,再灌注后6 h至72 h,采用實時定量多聚酶聯(lián)反應（RT-qPCR）和免疫印跡（Western Blot）分別檢測大鼠大腦皮質缺血旁組織內OTULIN mRNA和蛋白質含量。再灌注后72 h,免疫熒光觀察Sham組和tMCAO組大鼠大腦皮質缺血旁組織內小膠質細胞標記物Iba-1與OTULIN蛋白共染情況。2.側腦室轉染OTULIN過表達慢病毒（LV-OTULIN）,空載慢病毒（LV-Scramble）作為對照。大鼠隨機分為假手術（Sham）組、模型（tMCAO）組、模型+LV-Scramble（tMCAO+LV-Scramble）組和模型+LV... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：123 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

局灶腦缺血/再灌注損傷誘導SD大鼠腦內OTULINmRNA和蛋白表達增多Fig.1.1Focalcerebralischemia/reperfusioninducedOTULINmRNAandproteinexpression.（A）腦冠狀位切片（TTC染色）：*代表梗死區(qū)，□代表大腦皮質缺血旁組織

結果提示 LV-OTULIN 可有效促進大鼠大腦皮質 OTULIN mRNA（圖 1.2A）和蛋白（圖1.2B-C）表達（P<0.001）。接下來，我們進一步驗證側腦室轉染 LV-OTULIN 對 tMCAO 大鼠大腦皮質OTULIN 表達的影響。LV-OTULIN 及 LV-Scramble 側腦室轉染后第 7 d，大鼠隨機分 為 假 手 術 （ Sham ） 組 、 模 型 （ tMCAO ） 組 、 模 型 +LV-Scramble（tMCAO+LV-Scramble）組和模型+LV-OTULIN（tMCAO+LV-OTULIN）組，于再灌注后 72 h 采用 RT-qPCR 和 Western Blot 檢測 OTULIN mRNA 及蛋白含量。結果表明tMCAO +LV-OTULIN組大腦皮質OTULIN mRNA和蛋白表達較tMCAO組及tMCAO+LV-Scramble 組 均 顯 著 上 調 （ P<0.001 ）， 而 tMCAO 組 和tMCAO+LV-Scramble 組 OTULIN mRNA 和蛋白含量無明顯差異（P>0.05）。

54圖 1.3 OTULIN 過表達對局灶腦缺血/再灌注大鼠具有神經(jīng)保護作用Fig. 1.3 OTULIN overexpression exerted neuroprotective effects in focal cerebralischemia/reperfusion rats.（A）各組大鼠 Longa 評分（n=6）。（B）各組大鼠 Garcia 評分（n=6）。（C）各組大鼠 Bederson評分（n=6）。（D）TTC 染色檢測各組大鼠腦梗死體積。（E）柱狀圖顯示各組大鼠腦梗死體積統(tǒng)計分析結果（n=5）。（E）免疫熒光共聚焦顯示各組大鼠大腦皮質缺血旁組織內 NueN+和


本文編號：2898353