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骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合人參皂苷Rb1治療腦出血小鼠的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2017-04-04 11:09

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【摘要】:目的觀察骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植聯(lián)合人參皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1,GRb1)治療的腦出血小鼠的神經(jīng)行為學(xué)和腦出血灶及周邊區(qū)細(xì)胞凋亡的變化,并探討GRb1對(duì)腦外源性BMSCs分化的影響。方法以雄性C57BL/6小鼠注射膠原酶建立腦出血模型,將神經(jīng)功能缺損評(píng)分(Neurological Severity Scores,NSS)高于8分者納入后續(xù)實(shí)驗(yàn),并將其隨機(jī)分為BMSCs移植聯(lián)合GRb1治療組(BMSCs+GRb1組)、BMSCs移植組(BMSCs組)、GRb1治療組(GRb1組)和模型對(duì)照組(MC組),每組12只。術(shù)后第三天分別給予BMSCs腦內(nèi)移植聯(lián)合GRb1腹腔注射、BMSCs腦內(nèi)移植、GRb1腹腔注射,MC組小鼠不作處理;又根據(jù)處死時(shí)間的不同,每組小鼠又分成14d和28d兩個(gè)亞組,每個(gè)亞組6只。采用NSS評(píng)分觀察各組小鼠治療后1d、3d、7d、14d和28d時(shí)的神經(jīng)功能缺損情況,并將評(píng)分作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)取腦制成冰凍切片,HE染色觀察各組腦組織的形態(tài)學(xué)變化,Hoechest33258染色觀察出血灶周邊細(xì)胞凋亡情況,免疫熒光染色檢測(cè)外源性BMSCs表達(dá)MAP2、GFAP及NESTIN的情況,將統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果1.神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分:BMSCs+GRb1組和BMSCs組均比mc組在1d、3d、7d和14d時(shí)評(píng)分降低(p㩳0.05),grb1組僅比mc組在1d和3d時(shí)評(píng)分降低(p㩳0.05);bmscs+grb1組比bmscs組和grb1組在1d、3d、7d和14d時(shí)評(píng)分更低(p㩳0.05),bmscs組比grb1組在3d、7d和14d時(shí)評(píng)分降低(p㩳0.05)。2.he染色:各治療組在相同時(shí)間點(diǎn)對(duì)比出血灶組織結(jié)構(gòu)修復(fù)程度均優(yōu)于mc組,其中bmscs+grb1組的組織結(jié)構(gòu)修復(fù)程度最好。各組內(nèi)比較,28d組組織修復(fù)程度優(yōu)于14d組。3.hoechest33258染色:bmscs+grb1組和bmscs組的出血灶周邊細(xì)胞凋亡數(shù)目在14d和28d時(shí)均比mc組降低(p㩳0.05),grb1組比mc組在14d時(shí)降低(p㩳0.05);bmscs+grb1組比bmscs組在14d和28d時(shí)降低(p㩳0.05),bmscs組比grb1組僅在28d時(shí)降低(p㩳0.05)。4.免疫熒光:1.出血灶周邊外源性bmscs表達(dá)gfap情況:bmscs+grb1組bmscs表達(dá)gfap的陽性率在14d和28d時(shí)高于bmscs組(p㩳0.05),bmscs+grb1組和bmscs的gfap陽性率在28d時(shí)均高于14d。2.出血灶周邊外源性bmscs表達(dá)map2情況:bmscs+grb1組和bmscs組表達(dá)map2陽性細(xì)胞率隨時(shí)間延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì),bmscs+grb1組比bmscs組在14d和28d時(shí)增多(p㩳0.05)。3.出血灶周邊外源性bmscs表達(dá)nestin情況:bmscs+grb1組和bmscs組表達(dá)nestin陽性率隨時(shí)間延長(zhǎng)呈下降趨勢(shì),bmscs+grb1組比bmscs組在14d和28d時(shí)增多(p㩳0.05)。4.結(jié)論1.bmscs移植聯(lián)合人參皂苷rb1比單純bmscs移植和人參皂苷rb1治療更能夠促進(jìn)腦出血后神經(jīng)功能恢復(fù)。2.bmscs移植和人參皂苷Rb1治療均有利于受損腦組織的結(jié)構(gòu)修復(fù)和抑制出血灶周邊細(xì)胞凋亡,兩者聯(lián)合治療效果更佳。3.人參皂苷Rb1可以促進(jìn)BMSCs在腦內(nèi)向神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元分化,同時(shí)有利于BMSCs向神經(jīng)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化。
【關(guān)鍵詞】:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 人參皂苷Rb1 腦出血 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 微管相關(guān)蛋白-2 巢蛋白 小鼠
【學(xué)位授予單位】:四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R743.34
【目錄】:
  • 摘要4-7
  • Abstract7-11
  • 前言11-14
  • 材料和方法14-25
  • 結(jié)果25-42
  • 討論42-53
  • 結(jié)論53-54
  • 參考文獻(xiàn)54-59
  • 英漢縮略詞對(duì)照表59-60
  • 致謝60-61
  • 綜述(神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦出血的現(xiàn)狀研究)61-71
  • 參考文獻(xiàn)68-71

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):285421


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