本文關(guān)鍵詞：Resveratrol調(diào)控AMPK-SIRT1-p53通路對多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護作用及機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是中老年人常見的神經(jīng)變性性疾病,以選擇性中腦黑質(zhì)(substantia nigra,SN)多巴胺能神經(jīng)元變性丟失及神經(jīng)元內(nèi)路易小體(lewy’s body,LB)形成為主要病理特征。PD確切的發(fā)病機制至今尚未完全闡明,目前認為氧化應(yīng)激、α-共核蛋白(α-synuclein,ASN)積聚、線粒體功能障礙、泛素蛋白酶體途徑功能缺乏、自噬、炎癥、異常的凋亡等多因素共同作用,最終導(dǎo)致一系列的運動癥狀和非運動癥狀。組織化學(xué)和分子生物學(xué)研究均證實,PD多巴胺能神經(jīng)元的變性死亡與DNA斷裂損傷以及細胞凋亡相關(guān)因子caspase家族蛋白的異常有關(guān)。p53是一種常見的轉(zhuǎn)錄因子,通過多種信號通路參與了細胞周期、細胞代謝和自噬、細胞凋亡等過程的調(diào)節(jié),尤其在細胞凋亡中的作用備受矚目。p53蛋白含有多個保守的結(jié)構(gòu)域,能夠被多種轉(zhuǎn)錄后修飾機制所調(diào)控,如磷酸化、泛素化和類泛素化、硝基化、甲基化和乙酰化等。白藜蘆醇是一種多酚類化合物,具有抗氧化、抗炎以及抗癌的生物學(xué)功能。最近有研究證實,白藜蘆醇對PD動物模型和細胞模型均能發(fā)揮神經(jīng)保護作用。白藜蘆醇發(fā)揮上述作用的主要機制是通過對SIRT1的激活。SIRT1是一種NAD+依賴的去乙酰化酶,通過直接靶向去乙�；M蛋白或其他轉(zhuǎn)錄因子如p53而被認為是一種可能的保護因子。本研究立足于PD基本的發(fā)病機制,從細胞凋亡角度探討白藜蘆醇對PD的神經(jīng)保護作用。基于上述思想,本研究主要從以下兩個部分展開:第一,白藜蘆醇激活的SIRT1對p53蛋白乙�；M行調(diào)控,抑制p53蛋白的活性進而抑制細胞凋亡發(fā)揮神經(jīng)保護作用。我們發(fā)現(xiàn),魚藤酮對SH-SY5Y細胞的損傷呈濃度及時間依賴性;白藜蘆醇預(yù)處理能夠緩解魚藤酮誘導(dǎo)的細胞凋亡。魚藤酮可以抑制細胞內(nèi)SIRT1的表達,白藜蘆醇預(yù)處理SH-SY5Y細胞后,SIRT1蛋白的含量較單獨魚藤酮處理組明顯增加,同時伴隨著p53蛋白乙酰化水平的降低;抑制SIRT1后,p53乙�；斤@著升高。以上結(jié)果表明魚藤酮誘導(dǎo)的SH-SY5Y細胞凋亡可能與SIRT1有關(guān),白藜蘆醇預(yù)處理發(fā)揮對PD的神經(jīng)保護作用是由SIRT1介導(dǎo)的,后者通過靶向去乙�；痯53抑制其活性進而抑制p53介導(dǎo)的細胞凋亡。第二,白藜蘆醇激活的SIRT1靶向H3K9共價修飾(乙�；�/甲基化)對P53基因轉(zhuǎn)錄活性的影響。我們利用染色質(zhì)免疫共沉淀和蛋白質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)檢測SIRT1對H3K9的共價修飾作用,進而研究其對P53基因轉(zhuǎn)錄的影響。實驗結(jié)果顯示,魚藤酮誘導(dǎo)SIRT1降低,引起H3K9乙酰化水平的升高和三甲基化水平的降低;而白藜蘆醇預(yù)處理SH-SY5Y細胞后,相對于單獨的魚藤酮處理組,激活的SIRT1可以引起H3K9乙�；降慕档�,同時伴隨著H3K9三甲基化水平的升高,兩者共同作用促進染色質(zhì)的濃縮,阻礙了轉(zhuǎn)錄因子以及相關(guān)酶類的參入,最終抑制P53基因的轉(zhuǎn)錄,發(fā)揮了對PD多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護作用。SH-SY5Y細胞轉(zhuǎn)染si RNA SIRT1后,我們發(fā)現(xiàn)H3K9乙�；矫黠@較對照組升高,同時H3K9三甲基化水平降低,從而導(dǎo)致P53基因的表達上調(diào)。以上實驗結(jié)果證實白藜蘆醇激活的SIRT1能夠在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控P53基因的表達,抑制基因的轉(zhuǎn)錄進而抑制p53介導(dǎo)的細胞凋亡,發(fā)揮神經(jīng)保護作用。
【關(guān)鍵詞】：帕金森病 resveratrol AMPK SIRT1 p53
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.5
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-11
• 中英文縮略詞11-12
• 第一章 緒論12-19
• 1.1 表觀遺傳學(xué)12-13
• 1.2 表觀遺傳學(xué)與PD13-14
• 1.3 p53與PD14-17
• 1.4 SIRT1靶向H3K9共價修飾對P53基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控17-19
• 第二章 SIRT1調(diào)控p53蛋白乙酰化修飾對多巴胺能神經(jīng)元的保護作用19-46
• 2.1 引言19
• 2.2 材料與方法19-34
• 2.2.1 實驗材料19-23
• 2.2.2 實驗方法23-34
• 2.3 結(jié)果34-41
• 2.4 小結(jié)41
• 2.5 討論41-46
• 第三章 SIRT1靶向H3K9共價修飾（乙�；�/甲基化）對P53基因轉(zhuǎn)錄活性的影響46-59
• 3.1 引言46
• 3.2 材料和方法46-53
• 3.2.1 實驗材料46-48
• 3.2.2 實驗方法48-53
• 3.3 結(jié)果53-55
• 3.4 小結(jié)55
• 3.5 討論55-59
• 參考文獻59-66
• 附錄一66-73
• 參考文獻69-73
• 附錄二73-75
• 致謝75-76

【相似文獻】

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馮婭;Resveratrol調(diào)控AMPK-SIRT1-p53通路對多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護作用及機制研究[D];上海交通大學(xué);2015年

  本文關(guān)鍵詞：Resveratrol調(diào)控AMPK-SIRT1-p53通路對多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護作用及機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：285286