本文關(guān)鍵詞：褪黑素對缺氧缺血所致的新生大鼠未成熟腦白質(zhì)損傷的干預(yù)作用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景與目的腦白質(zhì)損傷是早產(chǎn)兒(尤其是胎齡為23周-32周)腦損傷的主要形式,主要表現(xiàn)為腦室周圍白質(zhì)損傷(Periventricular white matter damage,PWMD),亦即腦室周圍白質(zhì)軟化(Periventricular leukomalacia,PVL),常可留有不同程度后遺癥,包括腦癱及認知功能障礙。目前新生兒缺氧缺血性腦病(Hypoxic-ischemic encephalopathy,HIE)尚缺乏特異的治療方法。褪黑素(melatonin,MT)是松果體分泌的吲哚胺類激素,具有很高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)親和性,易透過血腦屏障。近年發(fā)現(xiàn)外源性褪黑素對缺氧缺血(Hypoxia-ischaemic,HI)導(dǎo)致的新生兒腦損傷有預(yù)防和保護作用。目前,在國內(nèi),關(guān)于MT的對新生兒腦損傷的研究主要集中在對大腦灰質(zhì)神經(jīng)元的影響,而對腦白質(zhì)的影響的研究未見報道;在國外,Nicola J.Robertson等的研究表明褪黑素增強低溫對新生兒缺氧缺血性腦病(HIE)的保護作用,機制為改善腦能量代謝與抑制丘腦、基底核及白質(zhì)內(nèi)細胞的凋亡。而在早產(chǎn)兒,尤其是23周-32周的早產(chǎn)兒腦白質(zhì)中,主要的細胞是少突膠質(zhì)前體細胞(Oligodendrocyte progenitor cell,OPC),即O4陽性的少突膠質(zhì)細胞;這一時期的OPC對缺氧缺血(HI)是最敏感的。白質(zhì)在HI作用后,OPC除發(fā)生灶狀壞死之外,還通過一系列機制啟動了凋亡過程,進而導(dǎo)致OPC數(shù)目減少。這也是早產(chǎn)兒PWMD機制的重要一環(huán)。而針對MT對PWMD中OPC的凋亡、數(shù)目及對遠期腦白質(zhì)的髓鞘化的影響在國內(nèi)外均未見報道。本研究以新生大鼠PWMD模型為研究對象,對這一問題進行探討,以期為早產(chǎn)兒HI所致的PWMD提供一種可能的治療手段。材料和方法48只健康3日齡清潔級的S-D(Sprague-Dawley)大鼠,體質(zhì)量6-9g,雌雄不限,用抽簽法隨機地分為:假手術(shù)組(SHAM組)、缺氧缺血組(HI組)和褪黑素干預(yù)組(HI+MT組),每組分別有16只(即n=16)。SHAM組:只做左側(cè)的頸總動脈的鈍性分離,不結(jié)扎動脈,也不進行缺氧處理;HI組:首先鈍性分離并結(jié)扎新生大鼠左邊的頸總動脈,放回母鼠旁恢復(fù)1小時后,把大鼠放入缺氧艙中,其中充有氮氧混合氣(94%N2、6%O2),時間為2小時;HI+MT組:分別于手術(shù)前、手術(shù)后、手術(shù)后1小時及手術(shù)后24小時分別按10mg/kg腹腔注射褪黑素溶液(10mg MT溶于5ml無水乙醇,再加入95ml生理鹽水,現(xiàn)用現(xiàn)配),SHAM組、HI組則在相同時間點腹腔注射等體積溶劑。各組大鼠飼養(yǎng)至術(shù)后2天時,每組用抽簽法隨機取8只,用吸入乙醚麻醉,麻醉結(jié)束后,先用生理鹽水約40ml進行心臟灌注后,再用40 g/L的多聚甲醛約40ml進行灌注,接著開顱取腦(注意:操作動作要輕柔,以免損傷腦組織),取出的腦標(biāo)本在室溫下用40 g/L多聚甲醛固定,24~48h后進行脫水和透明,然后用石蠟對標(biāo)本進行包埋,然后切片(注意:切片厚度約3μm),分別行HE常規(guī)染色觀察腦室周圍白質(zhì)組織的顯微結(jié)構(gòu)、O4免疫組化觀察O4陽性細胞數(shù)目和Caspase-3免疫組化觀察Caspase-3的表達的情況;每組另外8只于術(shù)后14天時,按照上述方法獲取標(biāo)本,最后切片,行HE常規(guī)染色及MBP免疫組化觀察側(cè)腦室擴大的情況及MBP表達的情況。結(jié)果1術(shù)后2天腦室周圍白質(zhì)SHAM組手術(shù)側(cè)結(jié)構(gòu)正常,染色清晰;HI組結(jié)構(gòu)疏松,纖維紊亂,可見軟化灶;HI+MT組介于前兩組之間,O4陽性細胞數(shù)目在SHAM組(76.418±7.333)、HI+MT組(58.359±14.571)、HI組(43.647±12.887)依次減少,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);Caspase-3的表達在SHAM組(105.627±31.745)、HI+MT組(146.329±34.181)、HI組(198.337±57.738)的依次增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);2術(shù)后14天腦腦室周圍白質(zhì)手術(shù)側(cè)腦室指數(shù)在SHAM組(0.988±0.236)、HI+MT組(1.793±0.418)、HI組(2.746±0.678)依次增大,MBP光度值則依次減少(分別為38.738±9.416,22.832±5.933,13.469±3.729)。結(jié)論褪黑素對缺氧缺血所致的未成熟腦白質(zhì)損傷的保護作用是通過抑制少突膠質(zhì)細胞前體的凋亡,而增加殘存少突膠質(zhì)細胞前體的數(shù)目,進而改善腦白質(zhì)發(fā)育過程中的髓鞘化。
【關(guān)鍵詞】：少突膠質(zhì)細胞前體 褪黑素 Caspase-3 缺氧缺血損傷 腦室周圍白質(zhì)損傷
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742
【目錄】：

• 摘要4-7
• abstract7-11
• 中英文縮略詞表11-13
• 1 引言13-16
• 2 實驗材料和方法16-24
• 3 實驗結(jié)果24-26
• 4 討論26-32
• 5 結(jié)論32-33
• 6 附圖33-36
• 7 參考文獻36-40
• 綜述部分 黑素對圍產(chǎn)期缺氧缺血所致的腦損傷的治療作用的研究綜述40-58
• 參考文獻52-58
• 個人簡歷及在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及研究成果58-59
• 致謝59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 徐麗;金清東;宮喜;劉卉;周瑞祥;;褪黑素的抗胃癌效應(yīng)及其引起的Bcl-2、Bax、p21和p53的表達變化[J];生理學(xué)報;2014年06期

  本文關(guān)鍵詞：褪黑素對缺氧缺血所致的新生大鼠未成熟腦白質(zhì)損傷的干預(yù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：284787