本文關(guān)鍵詞：枸杞多糖對(duì)腦出血大鼠腦保護(hù)作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究枸杞多糖(Lycium Barbarum Polysaccharides,LBP)對(duì)腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)模型大鼠繼發(fā)性腦損傷的影響,進(jìn)而探索LBP腦保護(hù)作用及其可能機(jī)制方法180只SD大鼠,隨機(jī)分為假手術(shù)(Ⅰ)組、模型(Ⅱ)組、LBP低劑量(Ⅲ)組、LBP中劑量(Ⅳ)組、LBP高劑量(Ⅴ)組、尼莫地平(Ⅵ)組,每組30只;術(shù)前15日,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別給予LBP 50、100、200mg·kg-1灌胃,Ⅵ組給予尼莫地平10mg·kg-1灌胃,Ⅰ、Ⅱ組給予等體積生理鹽水,1次/日;灌胃結(jié)束,采用自體血二次注入法制作大鼠腦出血模型;腦出血后4h、8h、12h、24h、48h,對(duì)各組大鼠進(jìn)行Bederson神經(jīng)功能評(píng)分;48h后,部分大鼠直接斷頭取腦,部分大鼠4%多聚甲醛灌注后取腦;檢測(cè)各組大鼠腦組織水腫體積、腦含水量、MDA含量、SOD活性;HE染色后,觀察腦出血區(qū)及其周圍腦組織中各細(xì)胞的大小、形態(tài);利用TUNEL法檢測(cè)神經(jīng)細(xì)胞凋亡;利用Western Blot、免疫組化、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)ICH后PAR-1、TNF-α、Bcl-2的表達(dá)。結(jié)果1、與假手術(shù)組比較,模型組各時(shí)點(diǎn)神經(jīng)功能評(píng)分均顯著增高(P0.05);與同時(shí)點(diǎn)模型組比較,中、高劑量組神經(jīng)功能評(píng)分在12h、24h和48h明顯低于模型組(P0.05),尼莫地平組24h和48h明顯低于模型組(P0.05);2、與假手術(shù)組比較,模型組腦組織水腫體積較大、腦含水量較高、SOD活性較低、mda含量較多(p0.05或p0.01)。與模型組比較,各給藥組腦組織水腫體積減小、腦含水量降低、sod活性增高、mda含量降低顯著(p0.05或p0.01);3、he染色發(fā)現(xiàn):腦出血后,出血區(qū)有血凝塊形成,期間夾雜著死亡細(xì)胞的胞核及細(xì)胞碎片,出血區(qū)周圍腦組織可見不同程度的破壞,神經(jīng)細(xì)胞與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞排列紊亂;但未能發(fā)現(xiàn)各給藥組與模型組之間的差異;4、tunel實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),外界機(jī)械刺激均可以引起神經(jīng)細(xì)胞凋亡,但是較單純的手術(shù)進(jìn)針而言,腦出血導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞凋亡更加顯著。表現(xiàn)為:tunel陽(yáng)性細(xì)胞在腦出血組,大量分布于出血區(qū)及其周圍腦組織中,而在假手術(shù)組,僅少量分布于針道周圍。lbp各劑量組與尼莫地平組tunel陽(yáng)性細(xì)胞比例較模型組顯著下降(p0.01或p0.05);5、ich組par-1陽(yáng)性細(xì)胞的比例,par-1蛋白的表達(dá),par-1mrna的表達(dá)較假手術(shù)組(p0.05或p0.01).與模型組比較,lbp各劑量組par-1蛋白的表達(dá)顯著減少(p0.05),par-1陽(yáng)性細(xì)胞比例顯著降低(p0.01),par-1mrna的表達(dá)顯著減少(p0.01);6、腦出血后,tnf-α的表達(dá)顯著增加、bcl-2的表達(dá)顯著減少,而lbp能夠抵抗腦出血導(dǎo)致的這些改變,表現(xiàn)為:(1)、lbp各組tnf-α蛋白的表達(dá)、tnf-α陽(yáng)性細(xì)胞比例、tnf-αmrna的表達(dá)均較模型組顯著減少(p0.01或p0.05);(2)、lbp各組bcl-2蛋白的表達(dá)、bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞比例及bcl-2mrna的表達(dá)顯著增加(p0.01或p0.05)。結(jié)論1、枸杞多糖的預(yù)防性應(yīng)用,能夠減輕腦出血導(dǎo)致的神經(jīng)功能缺失(該作用在腦出血12h以后才逐漸顯現(xiàn))、腦組織水腫、氧自由基損傷、神經(jīng)細(xì)胞凋亡。2、枸杞多糖對(duì)腦出血繼發(fā)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的抑制機(jī)制,可能是通過干預(yù)par-1的表達(dá),也可能是通過抑制細(xì)胞凋亡的內(nèi)源途徑和外源途徑來實(shí)現(xiàn)。
【關(guān)鍵詞】：腦出血 枸杞多糖 繼發(fā)性腦損傷 保護(hù)作用 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.34
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-10
• 符號(hào)說明10-14
• 前言14-16
• 材料和方法16-34
• 1.實(shí)驗(yàn)材料16-20
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組16
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與儀器16-18
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材18
• 1.4 主要實(shí)驗(yàn)試劑配制18-20
• 2.實(shí)驗(yàn)方法20-34
• 2.1 造模前灌胃給藥20-21
• 2.2 腦出血模型的制備21
• 2.3 大鼠神經(jīng)功能評(píng)分21-22
• 2.4 腦組織水腫體積測(cè)定22
• 2.5 腦含水量測(cè)定22
• 2.6 腦組織勻漿MDA含量檢測(cè)22-23
• 2.7 腦組織勻漿SOD活性檢測(cè)23-24
• 2.8 石蠟切片的制作24-25
• 2.9 HE染色25
• 2.10 TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)25-26
• 2.11 免疫組化實(shí)驗(yàn)26-27
• 2.12 Western blot實(shí)驗(yàn)27-30
• 2.13 RT-PCR實(shí)驗(yàn)30-33
• 2.14 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析33-34
• 結(jié)果34-47
• 1 LBP對(duì)大鼠神經(jīng)功能評(píng)分的影響34-35
• 2 LBP對(duì)大鼠腦組織水腫體積及腦含水量的影響35-37
• 3 LBP對(duì)大鼠腦組織MDA含量及SOD活性的影響37
• 4 LBP對(duì)大鼠腦組織切片HE染色結(jié)果的影響37-39
• 5 LBP對(duì)大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響39-40
• 6 LBP對(duì)ICH后腦組織中PAR-1 表達(dá)的影響40-42
• 7 LBP對(duì)ICH后腦組織中TNF-α 表達(dá)的影響42-44
• 8 LBP對(duì)ICH后腦組織中Bcl-2 表達(dá)的影響44-47
• 討論47-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 綜述57-69
• 綜述參考文獻(xiàn)65-69
• 致謝69-70
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文70-71
• 個(gè)人簡(jiǎn)介71

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本文編號(hào)：284435