本文關(guān)鍵詞：D-Ser~2-OXM對(duì)MPTP誘導(dǎo)的帕金森模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是僅次于阿爾茲海默病的第二大中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,其主要的病理特征為中腦黑質(zhì)致密部(Substantia nigra pars compacta,SNpc)多巴胺(Dopamine,DA)能神經(jīng)元進(jìn)行性死亡、紋狀體區(qū)DA含量顯著降低以及殘存神經(jīng)元內(nèi)路易氏小體沉積。一般認(rèn)為PD的病因及發(fā)病機(jī)制涉及到線粒體氧化應(yīng)激、免疫反應(yīng)、興奮性氨基酸毒性、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、細(xì)胞凋亡與自噬等多方面。近來研究證明,PD與糖尿病(Type2 Diabetes Mellitus,T2DM)有著共同的病理生理途徑,并且胰高血糖素樣肽1(Glucagon-like protein 1,GLP-1)已被批準(zhǔn)上市應(yīng)用于T2DM的治療�；趦刹〉南嗨菩约癎LP-1中樞作用,提出一個(gè)治療PD的新策略:用治療T2DM的藥物來干預(yù)PD。本實(shí)驗(yàn)室前期研究表明GLP-1類似物如liraglutide、Lixisenatide、(Val8)GLP-1及受體激動(dòng)劑京尼平苷均能明顯改善PD小鼠的行為異常,通過調(diào)節(jié)相關(guān)凋亡蛋白的表達(dá)保護(hù)DA能神經(jīng)元。胃泌酸調(diào)節(jié)素類似物(D-Ser_2-oxyntomodulin,D-Ser_2-OXM)具有胰高血糖素受體和GLP-1受體雙重的激活特性,相比于GLP-1單受體激動(dòng)藥及其類似物,D-Ser_2-OXM的改善糖代謝、減肥作用更加明顯。我們推測(cè)D-Ser_2-OXM可能通過激活腦內(nèi)胰高血糖素和GLP-1雙受體通路抑制PD病理生理學(xué)變化,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)作用及防止DA能神經(jīng)元變性。第一部分D-Ser_2-OXM對(duì)MPTP誘導(dǎo)的亞急性PD模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用目的:1.觀察D-Ser_2-OXM能否改善亞急性PD小鼠行為學(xué)障礙、減輕中腦DA能神經(jīng)元損傷。2.探討d-ser2-oxm是否能降低中腦神經(jīng)炎癥反應(yīng)、增加突觸數(shù)量或促進(jìn)軸突重建以及調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá),對(duì)抗mptp誘導(dǎo)的da能神經(jīng)元的丟失。3.探討d-ser2-oxm是否通過pi3k/akt通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。方法:1.動(dòng)物分組及模型制備:c57bl/6小鼠稱重后隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組(control):生理鹽水(ns,ip.)+ns(ip.);d-ser2-oxm單給藥組(oxy):ns(ip.)+oxy(ip.);mptp組(mptp):mptp(ip.)+ns(ip.);d-ser2-oxm治療組(mptp+oxy):mptp(ip.)+oxy(ip.)。四組接受ns或mptp(20mg/kg,i.p)連續(xù)7d;在注射mptp1h后用給予ns或d-ser2-oxm(ip.),連續(xù)14d。2.行為學(xué)實(shí)驗(yàn):于處死前一天,完成行為學(xué)實(shí)驗(yàn),觀測(cè)小鼠行為學(xué)的變化。3.免疫組化方法分別檢測(cè)各組小鼠中腦黑質(zhì)th、gfap、iba-1、synaptophysin及紋狀體th表達(dá)情況。4.tunel染色分別檢測(cè)各組小鼠黑質(zhì)區(qū)凋亡細(xì)胞數(shù)量。5.采用蛋白質(zhì)印跡法(westernblotting)分別檢測(cè)各組小鼠黑質(zhì)中th、α-synuclein、bax、bcl-2、tnf-α、synaptophysin、akt、p-aktser473的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1.成功復(fù)制亞急性pd小鼠模型。給予mptp后,小鼠出現(xiàn)震顫、豎尾、呼吸急促等異常表現(xiàn),約1h后上述癥狀逐漸減輕。通過自主活動(dòng)、轉(zhuǎn)棒、游泳、牽引等行為學(xué)檢測(cè)小鼠的協(xié)調(diào)能力與肢體的靈活性。與對(duì)照組比較,mptp模型組小鼠的直立次數(shù)、爬格數(shù)、掉落潛伏期、牽引評(píng)分及游泳評(píng)分顯著降低。而d-ser2-oxm治療組小鼠的行為活動(dòng)較mptp模型組小鼠有所改善。2.免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示:mptp模型組小鼠黑質(zhì)syn、th及紋狀體th陽性表達(dá)較對(duì)照組顯著減少,與mptp模型組相比,d-ser2-oxm治療組小鼠黑質(zhì)syn、th及紋狀體th陽性表達(dá)明顯增加。gfap、iba-1在中腦黑質(zhì)區(qū)的表達(dá)發(fā)現(xiàn):mptp損傷之后,gfap、iba-1陽性表達(dá)較對(duì)照組的顯著增多。而d-ser2-oxm治療組小鼠黑質(zhì)區(qū)gfap、iba-1陽性表達(dá)較mptp組明顯減少。5.tunel染色結(jié)果顯示:各組小鼠黑質(zhì)區(qū)均可見tunel陽性細(xì)胞。與對(duì)照組比較,mptp模型組tunel陽性染色率顯著性升高。而d-ser2-oxm治療組小鼠的tunel陽性染色率較模型組明顯降低。6.westernblotting方法檢測(cè)結(jié)果顯示:mptp模型組小鼠的tnf-α表達(dá)量及bax/bcl-2比值較對(duì)照組顯著增加,th、syn陽性表達(dá)及p-aktser473水平較對(duì)照組顯著降低;給予d-ser2-oxm治療后,可降低黑質(zhì)區(qū)tnf-α的表達(dá),下調(diào)bax/bcl-2比值,此外還可以增加黑質(zhì)區(qū)th、syn蛋白的表達(dá),提高akt的磷酸化。各組小鼠黑質(zhì)區(qū)α-synuclein蛋白水平并無顯著改變。結(jié)論:1.d-ser2-oxm能夠改善亞急性pd模型小鼠行為學(xué)障礙,減少中腦黑質(zhì)及紋狀體da能神經(jīng)元的凋亡,增加其存活數(shù)量。2.d-ser2-oxm能夠抑制中腦神經(jīng)炎癥反應(yīng)、增加突觸數(shù)量或促進(jìn)軸突重建以及調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá),對(duì)抗mptp損傷引起的da能神經(jīng)元的丟失。3.d-ser2-oxm可能通過激活pi3k/akt通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。第二部分d-ser2-oxm對(duì)mptp誘導(dǎo)的慢性pd模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用目的:觀察d-ser2-oxm可否改善慢性pd模型小鼠行為學(xué)障礙及病理特征性改變。方法:1.動(dòng)物分組及模型制備:c57bl/6小鼠稱重后隨機(jī)分為4組:正常對(duì)照組(control):生理鹽水(ns,ip.)+ns(ip.);d-ser2-oxm單給藥組(oxy):ns(ip.)+oxy(ip.);mptp組(mptp):mptp(ip.)+ns(ip.);d-ser2-oxm治療組(mptp+oxy):mptp(ip.)+oxy(ip.)。皮下注射mptp20mg/kg,1h后腹腔注射丙磺舒250mg/kg,一周兩次,連續(xù)5周;注射mptp1h前用給予ns或d-ser2-oxm(ip.),連續(xù)腹腔注射5周。2.最后一次MPTP注射后3天,進(jìn)行轉(zhuǎn)棒及曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn),行為學(xué)完成后取腦。3.免疫組織化學(xué)方法觀察黑質(zhì)及紋狀體中TH陽性表達(dá),Western Blotting分別檢測(cè)各組小鼠黑質(zhì)中TH、α-synuclein表達(dá)變化。結(jié)果:1.成功復(fù)制了慢性PD小鼠模型,并觀察到D-Ser_2-OXM改善了MPTP對(duì)小鼠造成的行為學(xué)障礙。行為學(xué)檢測(cè)小鼠協(xié)調(diào)運(yùn)動(dòng)能力與肢體的靈活性。與對(duì)照組進(jìn)行比較,MPTP模型組小鼠的直立次數(shù)、爬格數(shù)、掉落潛伏期顯著降低。而D-Ser_2-OXM治療組小鼠的行為活動(dòng)較MPTP模型組小鼠有所改善。2.免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示:MPTP模型組小鼠黑質(zhì)及紋狀體TH陽性表達(dá)較對(duì)照組顯著減少,與MPTP模型組相比,D-Ser_2-OXM治療組小鼠紋狀體及黑質(zhì)TH陽性表達(dá)明顯增加。3.Western blotting方法檢測(cè)結(jié)果顯示:MPTP模型組小鼠黑質(zhì)區(qū)TH陽性表達(dá)較對(duì)照組顯著降低,α-synuclein表達(dá)量顯著增加;給予D-Ser_2-OXM治療后,可增加TH表達(dá)量,降低α-synuclein表達(dá)量。結(jié)論:D-Ser_2-OXM能夠改善MPTP誘導(dǎo)的PD小鼠行為學(xué)障礙,減少中腦黑質(zhì)及紋狀體DA能神經(jīng)元的凋亡,抑制α-synuclein的沉積。
【關(guān)鍵詞】：帕金森病 D-Ser_2-OXM 神經(jīng)保護(hù) 細(xì)胞凋亡 PI3K/Akt通路
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R742.5;R-332
【目錄】：

• 中文摘要6-10
• 英文摘要10-15
• 常用縮寫詞中英文對(duì)照表15-17
• 前言17-19
• 第一部分 D-Ser~2-OXM對(duì)MPTP誘導(dǎo)的亞急性PD模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用19-45
• 1 材料與方法19-27
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料19-22
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法22-27
• 2 結(jié)果27-40
• 2.1 D-Ser~2-OXM對(duì)亞急性PD模型小鼠的行為學(xué)表現(xiàn)的影響27-30
• 2.2 D-Ser~2-OXM對(duì)黑質(zhì)及紋狀體區(qū)TH陽性細(xì)胞的影響30-32
• 2.3 D-Ser~2-OXM對(duì)黑質(zhì)區(qū)TH、α-synuclein表達(dá)的影響32-33
• 2.4 D-Ser~2-OXM對(duì)突觸數(shù)量的影響33-34
• 2.5 D-Ser~2-OXM對(duì)黑質(zhì)神經(jīng)炎癥的影響34-37
• 2.6 D-Ser~2-OXM對(duì)細(xì)胞凋亡及相關(guān)凋亡蛋白表達(dá)的影響37-39
• 2.7 D-Ser~2-OXM對(duì)中腦黑質(zhì)內(nèi)p-Akt蛋白表達(dá)的影響39-40
• 3 討論40-44
• 4 結(jié)論44-45
• 第二部分 D-Ser~2-OXM對(duì)MPTP誘導(dǎo)的慢性PD模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用45-54
• 1 材料與方法45-47
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料45
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法45-47
• 2 結(jié)果47-51
• 2.1 D-Ser~2-OXM對(duì)PD模型小鼠的行為學(xué)表現(xiàn)的影響47-48
• 2.2 D-Ser~2-OXM對(duì)慢性PD模型小鼠黑質(zhì)及紋狀體區(qū)TH陽性細(xì)胞的影響48-50
• 2.3 D-Ser~2-OXM對(duì)PD模型小鼠黑質(zhì)區(qū)TH、α-synuclein表達(dá)的影響50-51
• 3 討論51-53
• 4 結(jié)論53-54
• 參考文獻(xiàn)54-61
• 綜述61-76
• 參考文獻(xiàn)69-76
• 致謝76-77
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果77-78
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷78

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 盧玲;血小板源性生長(zhǎng)因子神經(jīng)保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(生理、病理科學(xué)與臨床分冊(cè));2003年05期

2 吳樂,陳文軍;雌激素的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)理[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2005年01期

3 馬鐵軍;高宗科;王毅;王東平;周其全;;新型彈性蛋白酶抑制劑——西維來司鈉的神經(jīng)保護(hù)作用[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2011年04期

4 朱慧琛;何征宇;王祥瑞;;右美托咪定的神經(jīng)保護(hù)作用及其臨床應(yīng)用[J];上海醫(yī)學(xué);2012年08期

5 張雅德;;雙重作用的藥物可提供良好的神經(jīng)保護(hù)作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)情報(bào);2001年03期

6 歐冊(cè)華,張毅,李惠芳;鎂對(duì)兔全腦缺血神經(jīng)保護(hù)作用及氨基酸在其中作用的實(shí)驗(yàn)研究(摘要)[J];昆明醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2003年03期

7 郭家彬;鐵璐;Diana N Krause;Sue P Duckles;李學(xué)軍;;雌激素神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制:線粒體功能的調(diào)節(jié)[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2010年03期

8 王潔潔;徐家麗;;粒細(xì)胞集落刺激因子的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制[J];臨床兒科雜志;2011年04期

9 徐蓉;盧明;;銅及銅鋅超氧化物歧化酶對(duì)神經(jīng)保護(hù)作用的研究進(jìn)展[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2011年05期

10 徐濤,曲方;阿司匹林的神經(jīng)保護(hù)作用[J];中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué);2004年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李大祥;鮮殊;楊衛(wèi);宛曉春;;茶葉的神經(jīng)保護(hù)作用研究進(jìn)展[A];經(jīng)濟(jì)發(fā)展方式轉(zhuǎn)變與自主創(chuàng)新——第十二屆中國(guó)科學(xué)技術(shù)協(xié)會(huì)年會(huì)（第二卷）[C];2010年

2 金昔陸;胡江元;唐放鳴;王銘潔;金國(guó)章;;四氫原小檗堿同類物抗氧化和神經(jīng)保護(hù)作用[A];第七屆全國(guó)生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

3 曲方;徐濤;劉興;車鋒;何凡;陳團(tuán)芝;;阿司匹林的神經(jīng)保護(hù)作用[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

4 王文;艾厚喜;張麗;孫芳林;李林;;莫諾苷神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究[A];2009全國(guó)抗衰老與老年癡呆學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

5 吳嬋姬;陸正齊;;粒細(xì)胞集落刺激因子在大鼠局灶性腦缺血損傷中的神經(jīng)保護(hù)作用[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

6 王文;李林;艾厚喜;安易;黃文婷;孫芳林;;莫諾苷神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

7 李博宇;苑玉和;胡金鳳;陳乃宏;;化合物K抗帕金森神經(jīng)保護(hù)作用的體外評(píng)價(jià)[A];第三屆中國(guó)藥理學(xué)會(huì)補(bǔ)益藥藥理專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

8 周慧芳;王建軍;薛冰;王曉民;;雷公藤單體T_(10)的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[A];中國(guó)生理學(xué)會(huì)第21屆全國(guó)代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2002年

9 王文;李林;艾厚喜;安易;黃文婷;孫芳林;;中藥有效成分莫諾苷神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制研究[A];2008年全國(guó)抗衰老與老年癡呆學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

10 石勝良;;ERK參與了蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)的神經(jīng)保護(hù)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 記者 白毅;新型抗炎化合物有抗炎和神經(jīng)保護(hù)作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2011年

2 張中橋;安定對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)有保護(hù)作用[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Sunisa Seetapun;丹參素衍生物作為抗缺血?jiǎng)┰赟H-SY5Y神經(jīng)元性細(xì)胞和大鼠大腦上發(fā)揮的神經(jīng)保護(hù)作用[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 馬磊;線粒體CB1受體的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

3 王彤宇;小類泛素修飾蛋白家族成員在腦缺血后的活化及其神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

4 何瑛琨;基于腦能量代謝研究半夏瀉心湯的神經(jīng)保護(hù)作用[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

5 劉愛軍;腦內(nèi)冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白的表達(dá)及其神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

6 范佳;粒細(xì)胞集落刺激因子在急性腦缺血中的神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];吉林大學(xué);2005年

7 張姝;K-ATP通道開放劑埃他卡林的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2007年

8 王國(guó)華;組蛋白去乙酰化酶抑制劑對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

9 付守鵬;β-羥丁酸對(duì)LPS誘發(fā)的帕金森病模型的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制[D];吉林大學(xué);2015年

10 葉俊麗;HSP70介導(dǎo)細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)及扇貝多肽的神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2010年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮帥;異丙酚對(duì)宮內(nèi)窘迫胎鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 陳毅美;京尼平苷對(duì)MPTP誘導(dǎo)的PD模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

3 周泉;Hsp22對(duì)PINK1突變PD轉(zhuǎn)基因果蠅模型神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

4 王嬌;遠(yuǎn)程缺血后處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

5 黃強(qiáng);Parkin表達(dá)上調(diào)對(duì)AD轉(zhuǎn)基因果蠅模型神經(jīng)保護(hù)作用及其機(jī)制的研究[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2015年

6 紀(jì)超男;米索前列醇對(duì)APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

7 向月;miR-124-3p通過負(fù)調(diào)控Caveolin-1表達(dá)在AD中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 杜慧杰;蛋氨酸—腦腓肽非受體途徑神經(jīng)保護(hù)作用的研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2015年

9 惠新晨;17β-雌二醇和GPR30的選擇性激動(dòng)劑G1在小鼠CA/CPR模型中的神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];東南大學(xué);2015年

10 孟憲珂;蓽茇酰胺類化合物的設(shè)計(jì)合成及神經(jīng)保護(hù)作用研究[D];蘭州大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：D-Ser~2-OXM對(duì)MPTP誘導(dǎo)的帕金森模型小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

，

本文編號(hào)：282483