目的:膠質(zhì)瘤是目前成人中最常見的腦腫瘤,其發(fā)病率占顱內(nèi)腫瘤的81%?由于膠質(zhì)瘤是占比最大、侵襲性強以及惡性程度高的腫瘤,膠質(zhì)母細胞瘤患者的5年生存率僅有5%?盡管針對膠質(zhì)瘤近年來的研究取得了很大的進展,但對膠質(zhì)瘤治療臨床上尚無實質(zhì)性突破,膠質(zhì)瘤的預后仍然不容樂觀?KDR編碼的蛋白質(zhì)也稱為血管內(nèi)皮生長因子受體-2(Vascular endothelial growth factor receptor-2,VEGFR-2),它是VEGF信號相關的血管生成因子的重要受體。本研究目的旨在將蟲草素提取物應用于人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞U87,探討蟲草素對人膠質(zhì)瘤細胞U87的抑制作用及其作用機制,為臨床治療人膠質(zhì)瘤提供新思路?方法:以人膠質(zhì)瘤細胞U87為研究對象,研究分析蟲草素對膠質(zhì)瘤細胞U87作用后,細胞生長活性的量效和時效的特征?應用流式細胞儀,MTT比色法,實時熒光定量PCR檢測蟲草素作用后的膠質(zhì)瘤細胞U87生長抑制作用、凋亡率以及KDR基因的表達的情況?在0、20、40、80、160、320μmol/L濃度蟲草素作用下,以0μmol/L濃度蟲草素作為陰性對照,TMZ作為陽性對照,觀察膠質(zhì)瘤細胞U87形態(tài)?細胞劃痕實驗、流式細胞儀、MTT法以及實時熒光定量PCR等方法用于研究膠質(zhì)瘤細胞U87的抑制效應及其作用機制?結果:1.在0、20、40、80、160、320μmol/L不同濃度的蟲草素作用下,膠質(zhì)瘤細胞U87逐漸收縮、變圓、折光率變差?隨著濃度增高、作用時間延長,細胞脫落現(xiàn)象加劇,細胞形態(tài)發(fā)生改變?2.80μmol/L濃度的蟲草素分別作用24h和48h后,膠質(zhì)瘤細胞U87增殖受到不同程度的抑制?3.在0、20、40、80、160、320μmol/L濃度的蟲草素培養(yǎng)48h后的U87細胞,流式細胞儀檢測結果顯示:隨著濃度增大,U87細胞凋亡逐漸增加?4.膠質(zhì)瘤細胞U87經(jīng)0、20、40、80、160、320μmol/L濃度蟲草素作用不同時間后,細胞增殖均受到不同程度的抑制,并呈劑量-時間依賴性?5.Real-time PCR結果顯示,蟲草素組和TMZ組的KDR基因的mRNA表達水平與對照組相比均顯著降低,且蟲草素的劑量越大,KDR基因的表達程度越低?結論:1.經(jīng)蟲草素作用后,U87細胞出現(xiàn)明顯的細胞活性降低現(xiàn)象,細胞脫落加劇,且具有濃度依賴性和時間依賴性;2.膠質(zhì)瘤細胞U87經(jīng)蟲草素作用后,細胞增殖能力顯著抑制,細胞遷移能力降低,且凋亡顯著增加,具有時間依賴性及劑量依賴性;3.蟲草素作用膠質(zhì)瘤U87細胞后,KDR mRNA表達顯著降低,具有與蟲草素抑制U87細胞效應相一致,表明蟲草素通過調(diào)控KDR的表達發(fā)揮抑瘤效應。
【學位單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R739.4
【部分圖文】：

圖 3.1 蟲草素作用膠質(zhì)瘤細胞 U87 形態(tài)變化3.1.2 蟲草素抑制膠質(zhì)瘤細胞 U87 的時效特征經(jīng) 20、80、320μmol/L 蟲草素和 TMZ 分別處理 U87 細胞 24h 和 48h。隨著

.2 蟲草素作用 24h 和 48h 膠質(zhì)瘤細胞 U87 形態(tài)變化3.2 細胞劃痕實驗膠質(zhì)瘤細胞 U87 經(jīng) 80 μmol/L 濃度蟲草素和 TMZ 作用 24h 和 48h 后(見圖3.3)，經(jīng) 100 倍光學顯微鏡放大，觀察到細胞增殖均受到不同程度的抑制，0μmol/L 濃度蟲草素生長活躍，情況正常；TMZ 隨著時間增加，細胞生長緩慢，細胞生長受到抑制；80 μmol/L 濃度蟲草素與 0 μmol/L 濃度蟲草素相比，隨著時間增加，細胞生長緩慢，受到抑制。80 μmol/L 濃度蟲草素與同濃度 TMZ 相比，細胞生長情況大致相同，并呈時效依賴性。圖 3.3 細胞劃痕實驗結果

圖 3.4 流式細胞儀檢測膠質(zhì)瘤細胞 U87表 3.1 不同濃度蟲草素處理后膠質(zhì)瘤細胞 U87 凋亡率/% ( )度/ μmol/L 重復批次 凋亡率/%

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本文編號：2812054