腦卒中是一種由于腦血管破裂或阻塞使得血液不能流入大腦,從而引起腦組織損傷的疾病,近年來已成為我國(guó)主要的疾病死亡因素,我國(guó)因腦卒中死亡的患者人數(shù)己占全球腦卒中死亡人數(shù)的三分之一,其主要分為缺血性腦卒中(又稱為“腦梗死”)和出血性腦卒中兩種,以缺血性腦卒中為臨床多見,發(fā)病率約占腦卒中的80%以上[1]。目前,缺血性腦卒中在臨床的最佳治療方法是溶栓治療,即在發(fā)病后4.5小時(shí)內(nèi)的最佳治療時(shí)間窗內(nèi)靜脈注射抗血栓藥物以溶解血栓,從而恢復(fù)腦部血流灌注[2,3]。然而,由于最佳治療時(shí)間窗較短,大部分患者無法及時(shí)接受有效治療;此外,溶栓療法也有引起再灌注損傷和出血等風(fēng)險(xiǎn)[4]。許多臨床前研究表明,神經(jīng)保護(hù)劑(如抗氧化劑、凋亡抑制劑等)在治療缺血性腦卒中方面具有較好的效果,然而血腦屏障(Blood brain barrier,BBB)的存在使得大部分中樞神經(jīng)系統(tǒng)的藥物無法進(jìn)入腦部發(fā)揮療效[5]。鐵蛋白是內(nèi)徑8 nm、外徑12 nm的球形蛋白。它是廣泛存在各種體內(nèi)的儲(chǔ)鐵蛋白,能避免機(jī)體產(chǎn)生鐵中毒,并將鐵地送給所需細(xì)胞。每個(gè)鐵蛋白可以裝載超過4000個(gè)鐵離子,并且這些離子可以被清除從而形成空腔。此外,鐵蛋白具有很好的穩(wěn)定性,能夠在較高的溫度下不變性,能耐微酸和微堿。作為一種天然的載體,鐵蛋白其表面富含的功能基團(tuán)使其易于進(jìn)行表面修飾。此外,最近的研究發(fā)現(xiàn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白有潛在的共同受體-血腦屏障上的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體,因此鐵蛋白是一種潛在中樞神經(jīng)系統(tǒng)給藥載體[6]。此外,針對(duì)缺血性腦卒中,我們利用噬菌體篩選技術(shù)篩選出來的短肽,利用基因工程的方法將其表達(dá)在鐵蛋白上,構(gòu)建針對(duì)缺血性腦卒中具有靶向性的藥物遞送載體。氧化應(yīng)激是缺血性腦卒中再灌注損傷的主要機(jī)制之一,ROS過多引起一系列的級(jí)聯(lián)瀑布反應(yīng),最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡壞死,引起腦組織的損傷。抗氧化劑是治療缺血性再灌注損傷的方法之一[7]。姜黃素作為天然的植物提取物,有較好的生物安全性,具有抗氧化和抗炎等效果。因此在本課題中,我們利用短肽修飾的鐵蛋白裝載姜黃素,在細(xì)胞層面上驗(yàn)證其安全性和清除ROS的功效。進(jìn)一步在體內(nèi)對(duì)其載體的靶向性進(jìn)行驗(yàn)證,并負(fù)載藥物進(jìn)行缺血性腦卒中的治療。
【學(xué)位單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R743.3
【部分圖文】：

在缺血中心的梗死灶，由于沒有血液流動(dòng)，神經(jīng)細(xì)胞死亡。而在“半暗帶”，盡逡逑管有氧化應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡和炎癥反應(yīng)和凋亡，然而還有周圍組織提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，逡逑導(dǎo)致細(xì)胞死亡速度較為緩慢。而缺血再灌注為恢復(fù)原本缺乏血液供應(yīng)組織的血流。逡逑再灌注后“半暗帶”發(fā)生的組織損傷決定了缺血性腦卒中最終的梗死面積。逡逑腦缺血發(fā)生后ＢＢＢ會(huì)遭到一定程度的破壞，ＢＢＢ包括內(nèi)皮細(xì)胞、外周細(xì)胞、逡逑星形膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元和細(xì)胞外基質(zhì)等。正常生理?xiàng)l件下，內(nèi)皮細(xì)胞和外周細(xì)胞逡逑之間由基底膜連接，神經(jīng)元和神經(jīng)血管單元的相互作用由星形膠質(zhì)細(xì)胞參與。當(dāng)逡逑組織發(fā)生缺血時(shí)，半暗帶區(qū)域的微血管無法為神經(jīng)元及時(shí)提供血液，中樞神經(jīng)細(xì)逡逑胞的巨噬細(xì)胞－膠質(zhì)細(xì)胞被激活，釋放細(xì)胞因子和趨化因子等。趨化因子釋放后，逡逑促炎癥因子如白介素－１邋（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１，ＩＬ－１）和腫瘤壞死因子ａ邋（ｔｉｓｓｕｅ邋ｎｅｃｒｏｓｉｓ逡逑ｆａｃｔｏｒ－ａ．ＴＮＦ－ａ邋）表達(dá)上調(diào)，招募白細(xì)胞的入侵，炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激加劇，破逡逑壞邋ＢＢＢ［１３】。逡逑

圖１．３不同ＲＯＳ的產(chǎn)生途徑逡逑Ｆｉｇｌ．３邋Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｒｏｕｔｅｓ邋ｔｏ邋ｐｒｏｄｕｃｅ邋ＲＯＳ逡逑當(dāng)體內(nèi)氧化與抗氧化失衡后會(huì)產(chǎn)生氧化應(yīng)激。在各種ＲＯＳ中，＊０２？會(huì)攻擊逡逑細(xì)胞內(nèi)的大分子如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和ＤＮＡ等，是較為重要的ＲＯＳ。在超氧化物歧逡逑化酶（ＳＯＤ）會(huì)催化超氧陰離子產(chǎn)生過氧化氫，Ｈ２０２有三種途徑被清除，首先體逡逑內(nèi)過氧化氫酶會(huì)將過氧化氫清除生成Ｈ２０和０２，其次，谷胱甘肽過氧化物酶逡逑（ＧＰＸ）和氧化型谷胱甘肽會(huì)將Ｈ２０２反應(yīng)成Ｈ２０，此外，在Ｆｅ２＋的作用下，丨七０２逡逑會(huì)被催化成？邋０Ｈ，進(jìn)一步引起氧化損傷，而自由基清除劑的作用就是抑制＿ＯＨ逡逑進(jìn)一步引起氧化損傷，盡管？邋0Ｈ的半衰期非常短，但是它對(duì)大部分生物分子都逡逑有損傷作用。逡逑當(dāng)細(xì)胞穩(wěn)態(tài)遭到破壞時(shí)，會(huì)引起氧化應(yīng)激，即組織中促氧化物的含量高于抗逡逑氧化物。ＲＯＳ過多會(huì)激活核因子Ｅ２相關(guān)因子和核轉(zhuǎn)錄因子（ＮＦ）和絲裂原活化逡逑

Ｆｉｇｌ．４邋Ｔｈｅ邋ｍｅｃｈａｎｉｓｍ邋ｏｆ邋ｐｒｏｂａｂｌｅ邋ｔｈｒｅｅ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｓｉｔｅｓ邋ｏｆ邋ｃｕｒｃｕｍｉｎ邋ｒｅａｃｔｉｏｎｓ逡逑ｗｉｔｈ邋ｆｒｅｅ邋ｒａｄｉｃａｌｓ＇２３＇逡逑盡管姜黃素有各種生物活性，然而它的吸收率低、代謝率氋導(dǎo)致其最終的低逡逑生物利用度，并阻斷了其臨床試驗(yàn)。小鼠口腔給予１邋ｇ／ｋｇ的姜黃素后，１５分鐘逡逑后血團(tuán)含量只有０．１３邋（ｉｇ／ｍＬ，ｌｈ后含量達(dá)到０．２２邋ｐｇ／ｍＬ，之后便不斷的下降。逡逑而腹腔給藥（0．丨ｇ／ｋｇ）后，血漿的姜黃素含量在丨５分鐘達(dá)到２．２５ｎｇ／ｍＬ。除了逡逑藥物的血漿水平外，體內(nèi)的組織分布也對(duì)生物利用度影響較大。通過３Ｈ標(biāo)記姜逡逑黃素，分別給予１０，邋８０．邋４００邋ｍｇ的姜黃素，最終姜黃素的吸收率都是６０－６６％，逡逑說明提高姜黃素的給藥量并不會(huì)提高吸收率。逡逑為了提高其生物利用度，可以利用佐劑來阻斷藥物代謝，阻斷姜黃素代謝途逡逑徑的佐劑主要采用胡椒堿。胡椒堿是常見的肝臟和腸道中葡萄糖苷酸化的阻斷劑，逡逑單純服用２邋ｇ姜黃素時(shí)，血清中幾乎探測(cè)不到姜黃素。而和胡椒堿一起服用時(shí)，逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 羅廷順;李洪文;劉正文;劉光明;;姜黃素的提取分離與藥理作用研究進(jìn)展[J];現(xiàn)代藥物與臨床;2011年02期

2 杜江洪;滲透性藥物治療在腦卒中后腦水腫治療中的應(yīng)用[J];華西醫(yī)學(xué);2004年01期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 龍偉;急性缺血腦組織靶向肽的篩選、鑒定及分子成像研究[D];東南大學(xué);2015年

本文編號(hào)：2811870