本文關(guān)鍵詞：膠質(zhì)瘤干祖細胞誘導(dǎo)宿主腹腔巨噬細胞惡性轉(zhuǎn)化及機制的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：第一部分:膠質(zhì)瘤干祖細胞與小鼠巨噬細胞共培養(yǎng)產(chǎn)生的融合細胞可轉(zhuǎn)化成惡性巨噬細胞目的我們曾推測膠質(zhì)瘤間質(zhì)中的巨噬細胞(macrophage,MP)惡性轉(zhuǎn)化是通過膠質(zhì)瘤干祖細胞(Glioma Stem Progenitor cells,GSPCs)與MP融合導(dǎo)致的。本文旨在通過GSPCs與MP共培養(yǎng)來驗證這種推測是否正確。方法將轉(zhuǎn)有紅色熒光蛋白基因(RFP)的GSPCs(SU3)與表達增強型綠色熒光蛋白(EGFP)的小鼠腹腔沖洗出的MP進行體外共培養(yǎng);用單克隆方法建立表達RFP+/GFP+雙色熒光(黃色)的細胞系,然后進行癌細胞相關(guān)表型分析、致瘤性試驗、鼠巨噬細胞標記物檢測。結(jié)果(1)這兩種細胞共培養(yǎng)后,細胞群中出現(xiàn)為數(shù)不多的黃色細胞,并成功單克隆到C3,C4和C12三株細胞。(2)C12繼續(xù)傳代培養(yǎng)后分化出RFP+、EGFP+和RFP+/EGFP+三種類型細胞,但隨著傳代次數(shù)增多,EGFP+(綠色)細胞比例逐漸升高而成為主體,RFP+/EGFP+(黃色)細胞比例逐漸下降并維持在較低水平,而RFP+(紅色)細胞基本消失。(3)C12細胞株中的EGFP+細胞具有:①生長接觸抑制消失,增殖速度快,染色體異倍體等癌細胞特征;②在裸小鼠體內(nèi)具有高致瘤率(5/5);③表達巨噬細胞特異性標記CD68,大部分染色體為鼠端著絲粒。結(jié)論體外模型證明我們之前在實體瘤中觀察到的人腦膠質(zhì)瘤干祖細胞誘導(dǎo)宿主巨噬細胞惡性轉(zhuǎn)化可通過細胞融合途徑實現(xiàn)。與我們先前從荷瘤鼠實體瘤組織中克隆到惡性轉(zhuǎn)化的巨噬細胞株(ih CTC)的體內(nèi)實驗一起,相互印證了腫瘤微環(huán)境中宿主巨噬細胞惡性轉(zhuǎn)化是客觀存在的。宿主細胞與腫瘤干祖細胞融合后發(fā)生的惡變既為腫瘤惡性進展和腫瘤異質(zhì)性增添了新的內(nèi)涵;又為腫瘤靶向治療增加了新的靶標。第二部分:膠質(zhì)瘤干祖細胞與巨噬細胞共培養(yǎng)時的社會活動:細胞連接、融合及胞釋事件的縮時攝影觀察目的已有用細胞社會學(xué)去理解實時監(jiān)測到的單個免疫細胞分泌的因子在免疫疾病中所起作用的報告,通過分析免疫細胞社會中的腫瘤細胞與宿主巨噬細胞之間的關(guān)系,旨在探尋腫瘤細胞社會中打破免疫平衡的大事件。方法懫用紅綠雙色熒光示蹤膠質(zhì)瘤干/祖細胞與宿主巨噬細胞共培養(yǎng),單克隆其中的黃色細胞,體外擴X椗嘌笥諢釹赴ぷ髡臼凳鄙閿八跏背上癲⑹悠搗治瞿勘晗赴納緇嶁形＝峁喙叵赴凳倍鄄旆⑾，

本文編號：278481