本文關(guān)鍵詞：普朗克127修飾氧化石墨烯載鹽酸阿霉素抗人神經(jīng)膠質(zhì)瘤的體外實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:檢測氧化石墨烯(Graphene oxide,GO)及普朗克127修飾的氧化石墨烯(Pluronic F127 modified graphene oxide,PF127-GO)對(duì)人星形膠質(zhì)細(xì)胞、人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞是否具有毒性作用。制備PF127-GO-DOX并研究其抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用。為探索治療膠質(zhì)瘤的新技術(shù)提供思路。方法:實(shí)驗(yàn)主要分為分三部分:第一部分研究GO及PF127-GO的毒性作用,此部分應(yīng)用人星形膠質(zhì)細(xì)胞(AS)和人膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U251),采用CCK-8法檢測不同濃度的GO及PF127-GO對(duì)上述細(xì)胞的存活率的影響。實(shí)驗(yàn)分組:(1)GO組:5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml;(2)PF127-GO組:5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml;(3)對(duì)照組。用不同濃度的GO、PF127-GO分別作用于AS細(xì)胞和U251細(xì)胞24h、48h、72h,CCK-8法檢測細(xì)胞存活率,分析GO及PF127-GO對(duì)AS細(xì)胞和U251細(xì)胞的毒性作用。確定納米材料的安全濃度范圍。本部分所用的星形膠質(zhì)細(xì)胞為原代分離培養(yǎng)的人胎腦星形膠質(zhì)細(xì)胞,用GFAP采用免疫熒光法進(jìn)行鑒定。第二部分制備PF127-GO-DOX并對(duì)其進(jìn)行檢測。應(yīng)用紫外分光光度計(jì)檢測是否載藥成功,繪制DOX標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算載藥量。此部分實(shí)驗(yàn)還制備了FITC-PF127-GO和FITC-PF127-GO-DOX,應(yīng)用熒光顯微鏡觀察納米粒子分布情況,觀察載藥體系是否進(jìn)入細(xì)胞。第三部分研究了PF127-GO-DOX的抗人神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用,主要為體外實(shí)驗(yàn)。此部分應(yīng)用人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞,采用CCK-8法檢測PF127-GO-DOX對(duì)U251細(xì)胞存活率的影響。此部分實(shí)驗(yàn)首先測定了一系列不同濃度的PF127-GO-DOX和DOX對(duì)U251細(xì)胞的影響,比較兩者間的差異,選取合適的濃度進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。之后用不同濃度的PG、DOX、PF127-GO-DOX作用于U251細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞變化,CCK-8法測定細(xì)胞存活率,分析并比較三者之間的關(guān)系,評(píng)價(jià)PF127-GO-DOX抗人神經(jīng)膠質(zhì)瘤作用。結(jié)果:(1)5μg/ml及以下的PF127-GO及GO對(duì)人星型膠質(zhì)細(xì)胞無明顯的毒性作用。(2)50μg/ml及以下的PF127-GO及GO對(duì)U251細(xì)胞無明顯的毒性作用(3)成功制備PF127-GO-DOX,載藥量為0.83mg/mg,包封率為83%。(4)在DOX劑量相同的情況下,隨著PF127-GO-DOX、DOX濃度的增高,細(xì)胞存活率下降,兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在實(shí)驗(yàn)所用濃度范圍內(nèi),PF127-GO對(duì)U251細(xì)胞無明顯毒性作用。結(jié)論:(1)小濃度的GO及PF127-GO對(duì)AS及U251細(xì)胞無明顯毒性作用。(2)成功制備PF127-GO-DOX,載藥量為0.83mg/mg,包封率為83%。(3)PF127-GO-DOX對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的殺傷作用。
【關(guān)鍵詞】：氧化石墨烯 PF127 鹽酸阿霉素 載藥 膠質(zhì)瘤
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R739.41
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 中英文縮略詞對(duì)照表11-12
• 第1章 引言12-14
• 第2章 文獻(xiàn)綜述14-19
• 2.1 載藥14-16
• 2.2 熱療16-17
• 2.2.1 光熱療法16-17
• 2.2.2 熱療聯(lián)合化療17
• 2.3 GO免疫治療17
• 2.4 小結(jié)與展望17-19
• 第3章 GO及PF127-GO的毒性檢測19-29
• 3.1 材料19-20
• 3.1.1 主要儀器與設(shè)備19
• 3.1.2 主要試劑19-20
• 3.1.3 GO及PF127-GO20
• 3.1.4 細(xì)胞20
• 3.2 方法20-23
• 3.2.1 GO及PF127-GO對(duì)人星形膠質(zhì)AS細(xì)胞的毒性研究20-22
• 3.2.2 GO及PF127-GO對(duì)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的毒性研究22-23
• 3.2.2.1 U251細(xì)胞的復(fù)蘇、培養(yǎng)與凍存22
• 3.2.2.2 實(shí)驗(yàn)分組22
• 3.2.2.3 CCK-8法檢測不同濃度GO及PF127-GO對(duì)U251的毒性22-23
• 3.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析23
• 3.3 結(jié)果23-27
• 3.3.1 人星形膠質(zhì)AS細(xì)胞鑒定23-24
• 3.3.2 不同濃度GO、PF127-GO作用AS細(xì)胞后細(xì)胞存活率24-26
• 3.3.3 不同濃度GO、PF127-GO作用U251細(xì)胞后細(xì)胞存活率26-27
• 3.3.4 不同濃度PF127-GO與GO作用U251細(xì)胞后細(xì)胞存活率比較27
• 3.4 討論27-28
• 3.5 結(jié)論28-29
• 第4章 PF127-GO-DOX的制備及檢測29-36
• 4.1 材料29-30
• 4.1.1 主要儀器與設(shè)備29-30
• 4.1.2 主要試劑30
• 4.2 方法30-31
• 4.2.1 PF127-GO-DOX的制備30
• 4.2.2 紫外-可見光分光光度計(jì)檢測載藥情況30-31
• 4.2.3 檢測PF127-GO-DOX是否進(jìn)入人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞31
• 4.3 結(jié)果31-34
• 4.3.1 紫外-可見光分光光度計(jì)檢測PF127-GO-DOX制備成功31-32
• 4.3.2 PF127-GO-DOX載藥量測定32-33
• 4.3.3 熒光顯微鏡檢測PF127-GO-DOX分布情況33-34
• 4.4 討論34-35
• 4.5 結(jié)論35-36
• 第5章 PF127-GO-DOX抗人膠質(zhì)瘤U251的體外實(shí)驗(yàn)研究36-43
• 5.1 材料36-37
• 5.1.1 主要儀器與設(shè)備36
• 5.1.2 主要試劑36-37
• 5.2 方法37-38
• 5.2.1 CCK-8 法檢測細(xì)胞存活率37
• 5.2.2 細(xì)胞形態(tài)學(xué)37-38
• 5.2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析38
• 5.3 結(jié)果38-41
• 5.3.1 DOX和PF127-GO-DOX作用于U251細(xì)胞比較38
• 5.3.2 PF127-GO-DOX、DOX、PF127-GO作用于人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251后細(xì)胞存活率38-40
• 5.3.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化40-41
• 5.4 討論41-42
• 5.5 結(jié)論42-43
• 第6章 結(jié)論43-44
• 參考文獻(xiàn)44-50
• 作者簡介及在學(xué)期間所取得的科研成果50-52
• 致謝52

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