過表達(dá)cathepsin L在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251侵襲遷移中的作用
發(fā)布時(shí)間:2017-03-30 05:05
本文關(guān)鍵詞:過表達(dá)cathepsin L在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251侵襲遷移中的作用,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:研究過表達(dá)溶酶體組織蛋白酶L (cathepsin L)在人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251侵襲遷移中的作用及探討其調(diào)控機(jī)制。方法:以X射線照射U251細(xì)胞,采用過表達(dá)cathepsin L慢病毒感染的方式增加U251細(xì)胞中cathepsin L的表達(dá),通過細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U251細(xì)胞的遷移、侵襲能力的改變,通過集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U251細(xì)胞的增殖能力;Western blotting和免疫熒光法檢測(cè)U251細(xì)胞中cathepsin L的變化及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化標(biāo)志物(E-cadherin、vimentin、N-cadherin)的表達(dá);G-LISA RhoA/CDC42 Activation Assay的方法測(cè)定細(xì)胞骨架蛋白R(shí)hoA及CDC42的活性;鬼筆環(huán)肽染色法觀察細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的改變。通過western blotting方法檢測(cè)臨床人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本中的cathepsin L和EMT標(biāo)志物表達(dá)情況。結(jié)果:X射線和過表達(dá)cathepsin L慢病毒均能增加U251細(xì)胞中cathepsin L的表達(dá)進(jìn)而加強(qiáng)細(xì)胞的遷移侵襲能力,過表達(dá)cathepsin L能促進(jìn)U251細(xì)胞的增殖并使RhoA 和 CDC42的活性升高、降低E-cadherin以及增加N-cadherin, vimentin 和 snail的表達(dá)。鬼筆環(huán)肽實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示過表達(dá)cathepsin L引起了U251細(xì)胞的骨架重構(gòu)。在13例臨床人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本中,有9例標(biāo)本的cathepsin L 和 E-cadherin的表達(dá)量呈反比關(guān)系,與間質(zhì)型標(biāo)志物(N-cadherin, vimentin)和 snail呈正比關(guān)系。結(jié)論:過表達(dá)cathepsin L對(duì)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的侵襲能力具有一定的作用,其分子機(jī)制可能涉及細(xì)胞骨架蛋白以及上皮問質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)蛋白表達(dá)的調(diào)控。
【關(guān)鍵詞】:cathepsin L 腦膠質(zhì)瘤 上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化 細(xì)胞骨架
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R739.41
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-8
- 序言8-11
- 一、組織蛋白酶cathepsin L與腫瘤侵襲遷移8
- 二、電離輻射與腫瘤侵襲遷移8-9
- 三、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化與腫瘤侵襲遷移9
- 四、Rho GTPase與腫瘤侵襲遷移9-11
- 實(shí)驗(yàn)部分11-22
- 材料與方法11-22
- 一、材料11
- 二、實(shí)驗(yàn)方法11-22
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-29
- 1、X射線對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251的侵襲遷移能力的影響22-23
- 2、過表達(dá)cathepsin L對(duì)U251細(xì)胞的侵襲遷移能力的影響23-24
- 3、過表達(dá)cathepsin L對(duì)U251細(xì)胞增殖能力的影響24
- 4、X射線對(duì)EMT標(biāo)志物的影響24-25
- 5、過表達(dá)cathepsin L對(duì)U251細(xì)胞中EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響25-26
- 6、過表達(dá)cathepsin L對(duì)U251細(xì)胞中RhoA及CDC42活性和細(xì)胞骨架的影響26-28
- 7、臨床腦膠質(zhì)瘤患者樣本分析28-29
- 討論29-31
- 結(jié)論31-32
- 參考文獻(xiàn)32-36
- 英文縮略詞表36-37
- 綜述37-46
- 參考文獻(xiàn)41-46
- 致謝46
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):276268
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