本文關(guān)鍵詞：自發(fā)性腦出血中紅細(xì)胞對(duì)AQP-4的影響及其與血腦屏障通透性的關(guān)系，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景:自發(fā)性腦出血(spontaneous intracerebral hemorrhage,SICH)是指在非外傷所致的大腦實(shí)質(zhì)內(nèi)突然自發(fā)性的出血,是臨床上致殘、致死率很高的神經(jīng)系統(tǒng)常見(jiàn)的疾病之一。在亞洲國(guó)家占腦卒中的20%~30%,但是其死亡率卻是最高,而導(dǎo)致腦出血死亡率高的主要原因之一就是腦水腫,自發(fā)性腦出血后血腫的不斷擴(kuò)大是導(dǎo)致患者的病情漸惡化的主要原因。SICH后腦水腫的形成機(jī)制至今尚未闡明。研究顯示,SICH后血腫中的主要成分(本課題擬研究紅細(xì)胞)與出血后不同階段腦水腫的形成關(guān)系密切,并且水通道蛋白4(AQP-4)在腦組織中水的運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中起著重要作用。本課題從紅細(xì)胞對(duì)腦水腫形成和對(duì)AQP-4表達(dá)影響的角度來(lái)研究在SICH中,紅細(xì)胞與腦水腫形成、AQP-4的表達(dá)、血腦屏障(Blood brain barrier,BBB)通透性之間的關(guān)系,以期為SICH后腦水腫防治方面提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù),這是本課題的創(chuàng)新之處,目前國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)報(bào)道。目的:1.闡明SICH中,紅細(xì)胞對(duì)AQP-4表達(dá)的影響;2.探討SICH后腦水腫形成過(guò)程中,AQP-4的表達(dá)與BBB通透性的關(guān)系。方法:本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型選用健康成年清潔級(jí)SD(Sprague Dawley)大鼠共195只,雄性,體重約210~300g,由河南科技大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。將SD大鼠隨機(jī)分為四組;即紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)組,全血(Whole blood,WB)組、假手術(shù)(sham operation,SO))組、正常對(duì)照(Normal controls,NC)組。其中RBC組、WB組、SO組按處死時(shí)間(6h、1d、3d、5d)再分為四個(gè)亞組,每組15只(5只測(cè)腦水含量、AQP-4m RNA,5只用于檢測(cè)水腫區(qū)域病理改變和AQP-4陽(yáng)性細(xì)胞分布情況,5只用于檢測(cè)EB含量)。制作模型:用腦立體定位儀向各組SD大鼠右側(cè)尾狀核注入自體WB或RBC以建立SICH模型,并按Bederson方法判斷模型是否成功。采集標(biāo)本,檢測(cè)腦組織依文思藍(lán)(Evans blue,EB)含量;AQP-4 m RNA變化;腦含水量;HE染色及免疫組化AQP-4的陽(yáng)性細(xì)胞分布情況。結(jié)果:1.腦組織EB含量:在RBC、WB、SO、NC組6h、1d、3d、5d的組內(nèi)比較,其中在RBC組-3d顯著高于6h、1d、5d組;組間相比,RBC組-6h時(shí)出現(xiàn)升高,第1d時(shí)升高明顯,3d達(dá)到高峰(P0.01),5d時(shí)降低但仍高于正常水平(P0.05),WB組與RBC組在各時(shí)間點(diǎn)EB含量變化規(guī)律相似,但均低于RBC組;SO組與NC組比較無(wú)差異(P0.05)。2.腦含水量檢測(cè):在RBC組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)相比,其第3d時(shí)結(jié)果提示顯著比6h、1d、5d組高(P0.01);組間相比,RBC與WB組各時(shí)間點(diǎn)間相比,其腦組織水含量變化趨勢(shì)規(guī)律基本相似,但WB組稍低于RBC組。3.RT-PCR檢測(cè)AQP-4 m RNA表達(dá):RBC組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)相比,RBC組-3d顯著高于6h、1d、5d組(P0.01),RBC組-6h后腦組織AQP-4 m RNA表達(dá)開(kāi)始增高,第3d達(dá)到高峰(P0.01),之后逐漸下降,在第5d時(shí)仍高于正常水平(P0.01);WB組與RBC組AQP-4 m RNA的表達(dá)規(guī)律基本相似,但低于RBC組。4.免疫組化檢測(cè)AQP-4表達(dá)結(jié)果示:RBC組和WB組的3d時(shí)都可見(jiàn)AQP-4在神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞以及其足突的表達(dá),其胞漿呈棕黃著色。結(jié)論:1.腦組織水含量在RBC組和WB組在第3d時(shí)最高,提示RBC在SICH后第3d腦水腫的形成中有作用,說(shuō)明RBC是SICH后腦水腫形成過(guò)程中的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。2.在RBC組和WB組第3d時(shí)AQP-4陽(yáng)性表達(dá)最強(qiáng),提示RBC可引起AQP-4的表達(dá)。3.BBB通透性在RBC組和WB組的通透率最高,而且從6h時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)升高,第3d達(dá)到高峰,說(shuō)明SICH后RBC影響B(tài)BB通透性。4.綜合AQP-4表達(dá)、腦水含量、EB檢測(cè)的結(jié)果,AQP-4的陽(yáng)性表達(dá)與腦含水量、BBB通透性的變化一致,即RBC組和WB組第3d時(shí)腦含水量和EB含量最高,同時(shí)AQP-4的陽(yáng)性表達(dá)最強(qiáng)。說(shuō)明三者的變化趨勢(shì)一致,提示SICH第3d腦水腫的加重與BBB通透性的增加和AQP-4的陽(yáng)性表達(dá)增強(qiáng)關(guān)系密切。
【關(guān)鍵詞】：自發(fā)性腦出血 紅細(xì)胞 腦水腫 血腦屏障 水通道蛋白-4
【學(xué)位授予單位】：河南科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R743.34
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-11
• 第1章 緒論11-29
• 1.1 研究背景11-28
• 1.1.1 腦出血的研究現(xiàn)狀11-12
• 1.1.2 SICH后血腦屏障的改變12-16
• 1.1.3 SICH后腦水腫的形成16-21
• 1.1.4 SICH后腦水腫過(guò)程中紅細(xì)胞的作用21-22
• 1.1.5 SICH后腦水腫過(guò)程中水通道蛋白-4（AQP-4）的進(jìn)展研究22-25
• 1.1.6 總結(jié)與展望25-28
• 1.2 研究目的28
• 1.3 研究意義28-29
• 第2章 材料與方法29-38
• 2.1 材料來(lái)源和主要設(shè)備29-30
• 2.1.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑29
• 2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備29-30
• 2.1.3 動(dòng)物分組30
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法30-32
• 2.2.1 麻醉30
• 2.2.2 全血標(biāo)本的制備30-31
• 2.2.3 紅細(xì)胞標(biāo)本的制備31
• 2.2.4 自發(fā)性腦出血?jiǎng)游锬Ｐ偷闹谱?/span>31
• 2.2.5 神經(jīng)功能缺損評(píng)分（neurological deficit score NDS））方法31-32
• 2.2.6 標(biāo)本采集32
• 2.3 檢測(cè)方法32-37
• 2.3.1 血腦屏障通透性的檢測(cè)32-33
• 2.3.2 腦含水量的檢測(cè)33
• 2.3.3 大鼠腦組織切片的制備33
• 2.3.4 病理切片HE染色步驟33-34
• 2.3.5 免疫組化檢測(cè)AQP-4 的表達(dá)34-35
• 2.3.6 AQP-4mRNA的檢測(cè)35-37
• 2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法37-38
• 第3章 結(jié)果38-50
• 3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物情況38
• 3.2 病理學(xué)檢測(cè)38-40
• 3.2.1 肉眼觀察38-39
• 3.2.2 HE染色光鏡觀察39-40
• 3.3 免疫組化檢測(cè)AQP-4 蛋白40-42
• 3.4 腦組織EB含量的變化42-44
• 3.4.1 EB標(biāo)準(zhǔn)曲線42
• 3.4.2 各組 6h時(shí)EB含量變化42-43
• 3.4.3 各組 1d時(shí)EB含量變化43
• 3.4.4 各組 3d時(shí)EB含量變化43
• 3.4.5 各組 5d時(shí)EB含量變化43-44
• 3.4.6 各組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)腦組織EB含量的比較44
• 3.5 AQP-4 mRNA的表達(dá)44-47
• 3.5.1 各組 6h時(shí)AQP-4 mRNA的表達(dá)44-45
• 3.5.2 各組 1d時(shí)AQP-4 mRNA的表達(dá)45
• 3.5.3 各組 3d時(shí)AQP-4 mRNA的表達(dá)45-46
• 3.5.4 各組 5d時(shí)AQP-4 mRNA的表達(dá)46
• 3.5.5 各組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)AQP-4 m RNA表達(dá)的比較46-47
• 3.6 腦組織含水量的變化47-50
• 3.6.1 各組 6h時(shí)腦含水量的變化47
• 3.6.2 各組 1d時(shí)腦含水量的變化47-48
• 3.6.3 各組 3d時(shí)腦含水量的變化48
• 3.6.4 各組 5d時(shí)腦含水量的變化48-49
• 3.6.5 各組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)腦含水量的比較49-50
• 第4章 討論50-56
• 4.1 動(dòng)物模型50-51
• 4.2 SICH后腦水腫形成過(guò)程中紅細(xì)胞的作用51-52
• 4.3 SICH后腦水腫過(guò)程中與BBB通透性的關(guān)系52-54
• 4.4 SICH后腦水腫形成過(guò)程中AQP-4 的作用54
• 4.5 結(jié)語(yǔ)54-56
• 第5章 結(jié)論56-57
• 參考文獻(xiàn)57-66
• 縮略語(yǔ)詞匯表66-67
• 附錄 附圖67-69
• 致謝69-70
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果70

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 武士京,陳世uo;血腦屏障——解剖與生理[J];現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志;2003年02期

  本文關(guān)鍵詞：自發(fā)性腦出血中紅細(xì)胞對(duì)AQP-4的影響及其與血腦屏障通透性的關(guān)系，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：274957