【摘要】：目的:探討柯里拉京(Corilagin)與替莫唑胺(Temozolomide)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U373的形態(tài)學(xué)變化、細(xì)胞遷移能力、細(xì)胞增殖活性、細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡的影響及其對(duì)TNF-α、NF-КB、Caspase-3/7/9mRNA表達(dá)量的影響。方法:培養(yǎng)U373細(xì)胞,以不同濃度的Corilagin(25、50、100、200μg/ml)與Temozolomide(40、80、160、320μg/ml)分別進(jìn)行干預(yù),在24、48和72h時(shí),用光學(xué)顯微鏡觀察U373細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,采用Cell Counting Kit-8試劑盒檢測(cè)U373細(xì)胞的增殖活性,細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)U373細(xì)胞的遷移能力。在藥物干預(yù)48h后,用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)U373細(xì)胞的凋亡與周期,并使用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)U373細(xì)胞NF-КB、TNF-α、Caspase-3/7/9 mRNA表達(dá)量。結(jié)果:1.未經(jīng)干預(yù)的U373細(xì)胞,其細(xì)胞狀態(tài)良好,結(jié)構(gòu)完整,胞體圓潤(rùn),隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),U373細(xì)胞的生長(zhǎng)密度和體積均明顯增加;而分別經(jīng)過柯里拉京與替莫唑胺干預(yù)的U373細(xì)胞,其胞體均有不同程度的皺縮,并可見大量的細(xì)胞碎片;隨著兩種藥物濃度的升高和干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),U373細(xì)胞的生長(zhǎng)密度與體積顯著降低,細(xì)胞的生長(zhǎng)受到明顯抑制。2.U373細(xì)胞的存活率,在藥物干預(yù)時(shí)間相同的前提下,隨著柯里拉京或替莫唑胺的藥物濃度增加不斷降低(P0.05);在相同藥物濃度的前提下,隨著柯里拉京或替莫唑胺藥物干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng),U373細(xì)胞的存活率也不斷降低(P0.05);改良寇氏法計(jì)算柯里拉京干預(yù)24、48和72h后U373細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度均明顯低于替莫唑胺。3.與未經(jīng)藥物干預(yù)的U373細(xì)胞相比,柯里拉京與替莫唑胺分別干預(yù)的U373細(xì)胞的遷移度明顯降低,并且細(xì)胞的遷移度隨著兩種藥物濃度的增加降低越明顯(P0.05)。4.在柯里拉京與替莫唑胺分別干預(yù)48h后,U373細(xì)胞的凋亡率均隨著兩種藥物濃度的增加不斷增加(P0.05);在兩種藥物濃度逐漸增加的前提下,柯里拉京使U373細(xì)胞周期在G2M期被阻滯,而替莫唑胺使U373細(xì)胞周期在S期被阻滯。5.U373細(xì)胞在柯里拉京或替莫唑胺干預(yù)48h后,隨著兩種藥物濃度的增加,TNF-α與NF-КB的mRNA表達(dá)量總體呈下調(diào)的趨勢(shì)(P0.05);而Caspase-3/7/9的mRNA表達(dá)量總體呈上調(diào)的趨勢(shì)(P0.05)。結(jié)論:1.替莫唑胺能夠抑制膠質(zhì)瘤U373細(xì)胞的生長(zhǎng),誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡,抑制細(xì)胞遷移,使U373細(xì)胞周期在S期被阻滯,其作用機(jī)制可能與下調(diào)TNF-α、NF-КB的mRNA表達(dá)水平有關(guān)。2.與替莫唑胺相比,柯里拉京采用較低的藥物濃度同樣能夠有效誘導(dǎo)U373細(xì)胞凋亡,抑制細(xì)胞遷移,使細(xì)胞周期在G2M期被阻滯,因此對(duì)膠質(zhì)瘤U373細(xì)胞的增殖具有更強(qiáng)的抑制作用,其機(jī)制可能與下調(diào)TNF-α、NF-КB和上調(diào)Caspase-3/7/9的mRNA表達(dá)水平有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R739.4

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李根華;馮嵩;劉陽(yáng);于喜貞;孔令勝;靳峰;;替莫唑胺對(duì)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞抗凋亡與多重耐藥基因及細(xì)胞周期的影響[J];中華神經(jīng)外科雜志;2015年07期

2 張樹峰;明艷林;林毅;陳良華;童慶宣;;葉下珠屬植物活性成分柯里拉京研究進(jìn)展(綜述)[J];亞熱帶植物科學(xué);2010年04期

本文編號(hào)：2727472