【摘要】：目的:研究胡黃連苷II對大鼠腦缺血再灌注后線粒體電壓依賴性陰離子通道1(VDAC1)表達(dá)和線粒體膜通透性的影響,進(jìn)一步探討其神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。方法:建立大鼠大腦中動脈閉塞(MCAO)2h/再灌注(R)24h模型,按隨機(jī)數(shù)字表將造模成功的140只成年雄性Wistar大鼠(體質(zhì)量250±20g)分為假手術(shù)組、模型組、胡黃連苷組、釕紅組、胡黃連苷+釕紅組、精胺組、胡黃連苷+精胺組,每組20只。實(shí)驗(yàn)選用釕紅和精胺分別作為VDAC1的抑制劑和激動劑。各組大鼠在恢復(fù)血流灌注24h后檢測相應(yīng)指標(biāo),改良神經(jīng)功能缺損評分(m NSS)檢測大鼠行為功能;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色和原位末端標(biāo)記(TUNEL)分別檢測腦梗死體積和神經(jīng)細(xì)胞凋亡;酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測腦組織活性氧(ROS)和腦神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)含量;酶標(biāo)儀檢測腦線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(m PTP)的通透性;HE染色觀察神經(jīng)細(xì)胞形態(tài);電子光學(xué)顯微鏡觀察大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu);免疫組織化學(xué)(IHC)和Western blot檢測Endo G及VDAC1表達(dá)水平。結(jié)果:與假手術(shù)組比較,模型組大鼠m NSS評分升高明顯,VDAC1表達(dá)上調(diào),m PTP通透性增加,ROS含量增加,BDNF含量降低,神經(jīng)元及線粒體結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,皮質(zhì)區(qū)變性細(xì)胞和凋亡細(xì)胞增加,胞漿及胞核Endo G蛋白表達(dá)增多,線粒體Endo G表達(dá)減少(P0.05)。胡黃連苷干預(yù)后,胡黃連苷組較模型組大鼠m NSS評分降低,VDAC1蛋白表達(dá)減少,m PTP開放程度下降,ROS含量降低,BDNF含量升高,神經(jīng)元及線粒體損傷程度減輕,皮質(zhì)區(qū)變性細(xì)胞和凋亡細(xì)胞減少,胞漿胞核Endo G蛋白含量降低,線粒體Endo G蛋白含量增加(P0.05)。胡黃連苷、釕紅組及胡黃連苷+釕紅組三組相比無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),精胺組與模型組相比亦無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。與精胺組相比,胡黃連苷+精胺組m NSS評分有所下降,VDAC1蛋白表達(dá)下調(diào),m PTP通透性明顯降低,ROS含量降低,BDNF含量升高,神經(jīng)元及線粒體結(jié)構(gòu)損傷程度減輕,變性細(xì)胞及凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯減少,胞漿EndoG蛋白表達(dá)降低,線粒體EndoG蛋白表達(dá)增加(P0.05)。結(jié)論:胡黃連苷II可通過下調(diào)大鼠腦缺血再灌注損傷后VDAC1的表達(dá)而抑制m PTP的開放,減少線粒體凋亡蛋白Endo G的釋放,發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R743
【圖文】：

圖 1 大鼠 mNSS 評分 模型組；C: 胡黃連苷組；D: 釕紅組；E: 釕紅+胡黃連苷組；精胺+胡黃連苷組；*P<0.05 vsA;#P<0.05 vs B;△P<0.05 vs 死體積變化

圖 2 大鼠腦梗死體積的變化（TTC 染色） 假手術(shù)組；B: 模型組；C: 胡黃連苷組；D: 釕紅組；E: 釕紅+胡黃連苷組；F 組: 精胺組精胺+胡黃連苷組；*P<0.05 vs A;#P<0.05 vs B;△P<0.05 vs F3 各組大鼠神經(jīng)細(xì)胞病理形態(tài)結(jié)構(gòu)變化

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2716276