發(fā)布時(shí)間：2020-06-10 13:30

【摘要】：目的:為給急性腦梗死患者個(gè)體化治療提供更多的參考和依據(jù),本課題選取血小板活化標(biāo)志物CD62P、PAC-1及NIHSS評(píng)分作為主要評(píng)價(jià)指標(biāo),分析不同P2Y12和CYP2C19基因型患者應(yīng)用氯吡格雷后的指標(biāo)差異,探討急性腦梗死患者P2Y12和CYP2C19基因多態(tài)性對(duì)氯吡格雷抗血小板作用及臨床療效的影響。方法:1.根據(jù)病例入選及排除標(biāo)準(zhǔn)選取商丘市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科2016年12月至2017年11月之間收治的急性腦梗死患者111例作為研究對(duì)象。2.采用PCR-RFLP法對(duì)納入本研究的111例急性腦梗死患者進(jìn)行P2Y12和CYP2C19基因多態(tài)性檢測(cè)。根據(jù)P2Y12基因上G52T位點(diǎn)是否存在突變將入選患者分為G52T突變組和G52T非突變組,根據(jù)CYP2C19基因分型情況將入選患者分為快代謝組(CYP2C19*1/*1,EM組),中代謝組(CYP2C19*1/*2、CYP2C19*1/*3,IM組),慢代謝組(CYP2C19*2/*2、CYP2C19*2/*3和CYP2C19*3/*3,PM組)。3.利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)入選患者應(yīng)用氯吡格雷治療前、治療第7天和治療第14天血小板活化標(biāo)志物CD62P、PAC-1的陽(yáng)性表達(dá)率,以陽(yáng)性表達(dá)率表示其表達(dá)水平。4.利用美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表(NIHSS)對(duì)入選患者應(yīng)用氯吡格雷治療前、治療第7天和治療第14天的神經(jīng)功能缺損程度進(jìn)行評(píng)分,評(píng)估各組急性腦梗死患者應(yīng)用氯吡格雷的臨床治療效果。5.采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較各組患者治療前后血小板活化標(biāo)志物CD62P、PAC-1表達(dá)水平及NIHSS評(píng)分的組內(nèi)差異和組間差異,評(píng)價(jià)急性腦梗死患者P2Y12和CYP2C19基因多態(tài)性與氯吡格雷抗血小板作用及臨床療效的相關(guān)性。結(jié)果:1.入選本研究的111例急性腦梗死患者中,G52T突變組患者36例,占比32.4%,G52T非突變組患者75例,占比67.6%;快代謝組患者42例,占比37.8%,中代謝組患者53例,占比47.7%,慢代謝組患者16例,占比14.5%。2.應(yīng)用氯吡格雷治療前,各組急性腦梗死患者血小板活化標(biāo)志物CD62P、PAC-1表達(dá)水平及NIHSS評(píng)分比較均無顯著差異(P0.05)。與應(yīng)用氯吡格雷治療前相比,應(yīng)用氯吡格雷治療第7天和治療第14天,G52T突變組、G52T非突變組、快代謝組和中代謝組血小板CD62P、PAC-1表達(dá)水平及NIHSS評(píng)分均顯著減少(P0.05),慢代謝組血小板CD62P、PAC-1表達(dá)水平雖然有降低趨勢(shì),但無顯著差異(P0.05)。3.應(yīng)用氯吡格雷治療第7天、治療第14天,G52T突變組與G52T非突變組的血小板CD62P、PAC-1表達(dá)水平及NIHSS評(píng)分比較均無顯著差異(P0.05);慢代謝組和中代謝組血小板CD62P、PAC-1表達(dá)水平均顯著高于快代謝組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);慢代謝組的NIHSS評(píng)分均顯著高于快代謝組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.急性腦梗死患者CYP2C19基因多態(tài)性與氯吡格雷的抗血小板作用和臨床療效密切相關(guān),同等用藥情況下快代謝組患者應(yīng)用氯吡格雷后的抗血小板作用和臨床療效最好,中代謝組次之,慢代謝組患者相對(duì)較差,可根據(jù)患者CYP2C19基因型合理選擇氯吡格雷的使用。2.急性腦梗死患者P2Y12基因G52T位點(diǎn)多態(tài)性可能與氯吡格雷抗血小板作用無明顯相關(guān)性。
【圖文】：

圖 2.1 P2Y12 基因 PCR 反應(yīng)程序設(shè)置2.2 酶切反應(yīng)P2Y12 基因 G52T 位點(diǎn) PCR 產(chǎn)物的酶切反應(yīng)體系如表 2.3 所示，將混勻后置于 58℃恒溫水浴中酶切 4 h。表 2.3 P2Y12 基因 G52T 位點(diǎn) PCR 產(chǎn)物酶切反應(yīng)體系（30 μL）2.3 酶切產(chǎn)物電泳將酶切產(chǎn)物置于 3.0%的瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳，，具體操作如下：1）用 10 μL 微量移液槍分別吸取 9 μL 的酶切產(chǎn)物和 1 μL 的 Load試劑 劑量PCR產(chǎn)物 15.0 μLBSAJ I內(nèi)切酶 1.5 μLCutSmart Buffer(10×) 3.0 μLddH2O 10.5 μL

⑤72℃終末延伸 5 min⑥4℃保存程序設(shè)置見圖 2.1。經(jīng)反復(fù)優(yōu)化后選擇降落 PCR 技術(shù)對(duì) CYP2C19 基因外顯子 5 片段進(jìn)行特異性擴(kuò)增，反應(yīng)條件為：①95℃高溫預(yù)變性 5 min②94℃變性 30 s③58℃-50℃退火 30 s ×9（每個(gè)循環(huán)下降 1℃）④72℃延伸 30 s⑤95℃變性 30 s⑥50℃退火 30 s ×26⑦72℃延伸 30 s⑧72℃終末延伸 5 min⑨ 4℃保存程序設(shè)置見如圖 2.2 所示。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R743.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 席子惟;劉巍;高雅楠;李格軒;閆振嫻;梁靜;韓宏亞;劉曉麗;周玉杰;;急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者接受P2Y12受體抑制劑治療后出血相關(guān)問題的研究進(jìn)展[J];心肺血管病雜志;2019年04期

2 龍厚元;代偉;張?chǎng)H鵬;宋玉強(qiáng);謝安木;;血小板膜糖蛋白受體P2Y12基因多態(tài)性與缺血性卒中的相關(guān)性研究[J];中國(guó)神經(jīng)精神疾病雜志;2012年12期

3 張璦琪;王亞紅;;新型P2Y12受體拮抗劑與急性冠脈綜合征抗血小板治療的研究進(jìn)展[J];中國(guó)發(fā)明與專利;2014年12期

4 李世武;陳瑤;錢薪榮;周左萍;虞麗麗;;血小板P2Y12受體基因多態(tài)性與氯吡格雷臨床安全關(guān)聯(lián)性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)和Meta分析[J];中國(guó)新藥與臨床雜志;2015年03期

5 譚艷武;羅偉陵;趙迪誠(chéng);;老年不穩(wěn)定型心絞痛患者P2Y12受體基因多態(tài)性對(duì)氯吡格雷抑制血小板聚集率的影響[J];湖南師范大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2014年02期

6 李揚(yáng);王洪巨;李妙男;;P2Y12基因多態(tài)性與冠心病患者氯吡格雷抵抗的相關(guān)性研究[J];臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志;2017年18期

7 王濤;;血小板膜受體P2Y12基因多態(tài)性與冠心病患者氯吡格雷抵抗的相關(guān)性研究[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2015年03期

8 劉青;葉鵬;Wang TY;Kaltenbach LA;Cannon CP;Fonarow GC;Choudhry NK;Henry TD;Cohen DJ;Bhandary D;Khan ND;Anstrom KJ;Peterson ED;;藥物代金券對(duì)P2Y12抑制劑使用和心肌梗死患者主要不良心血管事件的影響:ARTEMIS隨機(jī)臨床試驗(yàn)[J];中華高血壓雜志;2019年02期

9 崔國(guó)禎;李惠民;李納;鄒佳;申慧芳;劉銀花;劉振勇;;從活血化瘀中藥中虛擬篩選P2Y12受體拮抗劑及其抗血小板聚集作用的評(píng)價(jià)[J];世界中西醫(yī)結(jié)合雜志;2018年08期

10 張文斌;張新霞;陳曉燕;莫怡浩;伍貴富;;P2Y12基因多態(tài)性與冠心病患者氯吡格雷抵抗的相關(guān)性研究[J];中國(guó)心血管雜志;2015年01期

相關(guān)會(huì)議論文 前5條

1 孫瑩;韓雅玲;張效林;王濤;梁振洋;馮雪瑤;白凈;;P2Y12基因T744C單核苷酸多態(tài)性與中國(guó)北方漢族冠心病人群氯吡格雷抵抗的關(guān)聯(lián)研究[A];中國(guó)心臟大會(huì)（CHC）2011暨北京國(guó)際心血管病論壇論文集[C];2011年

2 唐曉芳;袁晉青;何晨;孟憲敏;楊躍進(jìn);高潤(rùn)霖;;血小板膜受體P2Y12基因多態(tài)性(C34T和G52T)與冠心病患者介入術(shù)后服用氯吡格雷臨床預(yù)后的相關(guān)性研究[A];中國(guó)心臟大會(huì)（CHC）2011暨北京國(guó)際心血管病論壇論文集[C];2011年

3 于杉;何志義;;血小板膜P2Y12受體基因C34T、G52T位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中的相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

4 孫瑩;韓雅玲;張效林;王濤;梁振洋;馮雪瑤;白凈;;P2Y12基因T744C單核苷酸多態(tài)性與中國(guó)北方漢族人群氯吡格雷抵抗的關(guān)聯(lián)研究[A];第十三次全國(guó)心血管病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2011年

5 Xingyang Yi;Qiang Zhou;Chun Wang;Jing Lin;Ping Liu;Cheng Fu;;Association of Polymorphisms in the Platelet Receptor Gene(P2Y12, P2Y1) and Platelet Glycoprotein Gene(GPIIIa) with Response to Antiplatelet Drug and Clinical Outcomes after Acute Minor Ischemic Stroke Genetic determinants of response to antiplatelet drugs[A];四川省醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次精神病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨第三次心身醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編集[C];2016年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 梁f ;小兒特發(fā)性血小板減少性紫癜GPⅠbα、GPⅢa、P2Y1和P2Y12基因變異的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2014年

2 金國(guó)棟;血小板ADP受體P2Y12與凝血因子XIII基因多態(tài)性與冠心病的研究[D];浙江大學(xué);2010年

3 鹿樹軍;血小板膜受體P2Y1基因C893T、P2Y12基因H1/H2多態(tài)性與腦梗死關(guān)系的研究[D];山東大學(xué);2016年

4 李文慶;ADP受體p2y12在血管發(fā)育中的功能及其分子機(jī)制研究[D];上海交通大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 曹繼宗;急性腦梗死患者P2Y12和CYP2C19基因多態(tài)性對(duì)氯吡格雷抗血小板作用的影響[D];鄭州大學(xué);2019年

2 孟楊;P2Y12抑制劑在接受DAPT治療的氯吡格雷低反應(yīng)性患者中的有效性及安全性評(píng)價(jià)[D];鄭州大學(xué);2017年

3 孫瑩;P2Y12基因單核苷酸多態(tài)性與中國(guó)北方漢族人群氯吡格雷抵抗的關(guān)聯(lián)研究[D];遼寧醫(yī)學(xué)院;2011年

4 耿嘉正;血小板膜受體P2Y12基因功能性單核苷酸多態(tài)與冠心病及氯吡格雷藥物療效相關(guān)性研究[D];四川大學(xué);2006年

5 于杉;血小板膜P2Y12受體基因C34T、G52T位點(diǎn)多態(tài)性與缺血性腦卒中的相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2010年

6 李曉靜;氯吡格雷抵抗與血小板ADP受體P2Y12基因多態(tài)性的相關(guān)性研究[D];寧波大學(xué);2013年

7 李慕鵬;P2Y12和GPIIb基因多態(tài)性對(duì)替格瑞洛體外抗血小板活性的影響[D];中南大學(xué);2013年

8 胡閱兵;急性心梗和腦�；颊咄庵苎猰iR-223及其靶基因P2Y12表達(dá)變化研究[D];中南大學(xué);2012年

9 高潔;血栓彈力圖指導(dǎo)下替格瑞洛在急性冠脈綜合征患者中療效觀察及P2Y12和ABCB1基因多態(tài)性對(duì)其抗血小板活性的影響[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2016年

10 李揚(yáng);P2Y12基因多態(tài)性（C34T與G52T）與急性冠脈綜合征患者氯吡格雷抵抗及冠脈介入術(shù)后臨床預(yù)后的相關(guān)性研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2017年

本文編號(hào)：2706358