【摘要】：目的:小卒中(minor ischaemic stroke,MIS)因?qū)C體造成的損害輕微,極少引起人們重視。小卒中后再發(fā)腦梗死的發(fā)生率高達(dá)12-20%,及早發(fā)現(xiàn)小卒中后再發(fā)腦梗死的高危人群,可有效的降低小卒中后腦梗死的發(fā)病風(fēng)險,但目前有關(guān)小卒中后再發(fā)腦梗死的研究較少。本研究采用非靶向代謝組學(xué)的方法篩選并確定與小卒中發(fā)生有關(guān)的潛在生物標(biāo)志物,進(jìn)而對小卒中患者進(jìn)行隨訪,確定小卒中后再發(fā)腦梗死的人群,采用非靶向代謝組學(xué)的方法篩選并確定與小卒中后再發(fā)腦梗死有關(guān)的潛在生物標(biāo)志物。同時,應(yīng)用靶向代謝組學(xué)的方法對前期篩選的重要代謝物在實驗大鼠體內(nèi)進(jìn)行驗證,確定潛在生物標(biāo)志物對小卒中后再發(fā)腦梗死產(chǎn)生的作用。通過本研究旨在篩選并確定與小卒中及與小卒中后再發(fā)腦梗死有關(guān)的潛在標(biāo)志物,建立小卒中后再發(fā)腦梗死的預(yù)測預(yù)警模型,為小卒中后再發(fā)腦梗死的風(fēng)險預(yù)警和干預(yù)治療提供新的思路,同時為確定小卒中后再發(fā)腦梗死的高危人群提供參考依據(jù)。方法:本次研究對小卒中患者進(jìn)行隨訪觀察,結(jié)合代謝組學(xué)的方法首先進(jìn)行人群研究,同時結(jié)合大鼠腦梗死動物實驗對人群研究的發(fā)現(xiàn)加以驗證。人群研究:(1)選擇在太原市中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院,且臨床確診的400例小卒中患者和同期在太原市中心醫(yī)院體檢中心體檢的210例健康人群作為研究對象。收集受試者的一般人口學(xué)特征資料、空腹血液樣本,并對生物樣品進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)、血糖、血脂、同型半胱氨酸及超敏C反應(yīng)蛋白的指標(biāo)檢測,通過統(tǒng)計學(xué)分析尋找與小卒中相關(guān)的代謝物質(zhì)和影響因素。(2)對小卒中患者進(jìn)行90天隨訪觀察,以小卒中后再發(fā)腦梗死或因其死亡為隨訪結(jié)局,進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)、血糖、血脂、同型半胱氨酸及超敏C反應(yīng)蛋白的指標(biāo)檢測及對比分析,尋找小卒中后再發(fā)腦梗死的影響因素。實驗動物研究:制備小卒中后再發(fā)腦梗死的動物模型,根據(jù)人群的研究結(jié)果,對實驗動物進(jìn)行靶向代謝組學(xué)驗證。通過對實驗動物的飲食中添加不同含量的膽堿,進(jìn)行非靶向代謝組學(xué)、血糖、血脂、同型半胱氨酸及超敏C反應(yīng)蛋白的指標(biāo)檢測,構(gòu)建體內(nèi)不同氧化三甲胺(trimethylamine oxide,TMAO)水平的實驗動物模型,利用液相色譜-質(zhì)譜連用(LS/MS)方法檢測大鼠血漿TMAO及相關(guān)代謝物質(zhì)水平,通過比較不同TMAO水平下大鼠平衡木得分、腦梗死病理改變和動脈粥樣硬化程度來判斷TMAO對小卒中后再發(fā)腦梗死發(fā)生的作用。結(jié)果:1.小卒中相關(guān)因素分析:(1)人群一般人口學(xué)特征資料分析:在吸煙、高血壓和體力活動方面小卒中組與健康對照組差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)血清中代謝物與小卒中相關(guān)因素分析:相較于健康組,小卒中組內(nèi)的纈氨酸、乳酸、丙氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、丙酮酸、TMAO、α-葡萄糖和β-葡萄糖這9種物質(zhì)有所升高,脂質(zhì)、N-乙�；堑鞍住⒛憠A、磷脂酰膽堿有所下降。其中乳酸,丙酮酸,TMAO的含量變化具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.001)。(3)小卒中風(fēng)險模型:高血壓[OR=4.033,95%CI(2.581~6.303),P0.001]、體力活動[OR=0.026,95%CI(0.006~0.113),P0.001]、吸煙[OR=3.104,95%CI(1.783~5.402),P0.001]、TMAO含量升高[OR=1.227,95%CI(1.106~1.483),P=0.034]是小卒中發(fā)生的影響因素。2.小卒中再發(fā)腦梗死的風(fēng)險評估:(1)人群臨床特征資料比較:冠心病、心房顫動在小卒中后再發(fā)組與未再發(fā)組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)血清中代謝物與小卒中再發(fā)腦梗死相關(guān)因素分析:TMAO、β-葡萄糖、α-葡萄糖、乳酸、纈氨酸、谷氨酰胺、丙酮酸、谷氨酸、異亮氨酸、丁二酸、檸檬酸和丙氨酸這12種物質(zhì)小卒中再發(fā)組較未再發(fā)組高,而脂質(zhì)、膽堿和磷脂酰糖蛋白這3種物質(zhì)在小卒中再發(fā)組中有所減少,其中乳酸、丁二酸、丙酮酸及TMAO的含量變化具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)小卒中再發(fā)風(fēng)險模型:心房顫動[RR=4.597,95%CI(1.791~11.798),P=0.002],冠心病[RR=2.279,95%CI(1.074~4.836),P=0.032],以及TMAO含量升高[RR=1.214,95%CI(1.006~1.465)P=0.043]可增加小卒中再發(fā)腦梗死的發(fā)生風(fēng)險。3.TMAO對小卒中后再發(fā)腦梗死的影響研究:(1)將實驗大鼠分為小卒中發(fā)作組、小卒中后再發(fā)正常飲食組、小卒中后再發(fā)低膽堿飲食干預(yù)組、小卒中后再發(fā)高劑量膽堿飲食組、假手術(shù)組和對照組6組,在靶向代謝組學(xué)檢測后進(jìn)行方差分析,結(jié)果顯示:TMAO(F值=38.965,P0.001)的含量各組之間差別有統(tǒng)計學(xué)意義,隨后對小卒中未再發(fā)組、小卒中再發(fā)正常飲食組、小卒中再發(fā)低干預(yù)組和小卒中再發(fā)高干預(yù)組進(jìn)行了兩兩比較,TMAO在各組之間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),且呈逐漸增高趨勢。(2)通過觀察小卒中發(fā)作組、小卒中后再發(fā)正常飲食組、小卒中后再發(fā)低膽堿飲食干預(yù)組、小卒中后再發(fā)高劑量膽堿飲食組、假手術(shù)組和對照組6組大鼠的平衡木試驗得分、大鼠腦梗死病理改變情況和大鼠主動脈病理學(xué)改變,發(fā)現(xiàn)隨著膽堿干預(yù)的增高和體內(nèi)TMAO水平的上升,神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死病理改變和動脈粥樣硬化嚴(yán)重程度也逐漸加重。氧化三甲胺與神經(jīng)功能評分、腦組織梗死面積、主動脈病理改變均呈正相關(guān)。通過繪制ROC曲線,獲得TMAO對神經(jīng)功能、腦組織梗死面積和主動脈病理改變的ROC曲線下面積(Az)分別為0.875、0.713和0.904,顯示TMAO對神經(jīng)功能缺損、腦梗死面積及主動脈粥樣硬化具有中高度診斷價值。提示血漿TMAO水平可能是預(yù)測小卒中后腦梗死再發(fā)的潛在重要指標(biāo)。結(jié)論:1.小卒中患者血清代謝物乳酸、丙酮酸、TMAO在體內(nèi)含量增加,發(fā)現(xiàn)氧化三甲胺含量增加可增加小卒中的發(fā)生風(fēng)險,高血壓、體力活動少、吸煙和TMAO含量增加為小卒中的潛在預(yù)警指標(biāo)。2.小卒中后再發(fā)腦梗死的發(fā)生率為16.25%。小卒中后再發(fā)腦梗死患者血清代謝物乳酸、丁二酸、丙酮酸、氧化三甲胺在體內(nèi)含量增加,氧化三甲胺對小卒中后再發(fā)腦梗死有促進(jìn)作用。心房顫動、冠心病和TMAO含量增加為小卒中后再發(fā)腦梗死的預(yù)警指標(biāo)。3.飲食中膽堿含量越高,氧化三甲胺的含量越高,進(jìn)而引發(fā)神經(jīng)功能缺損加重,動脈粥樣硬化及腦組織的損傷程度也越重。提示高膽堿飲食所致的體內(nèi)高氧化三甲胺狀態(tài)可能與動脈粥樣硬化及腦梗死的發(fā)生有關(guān)。4.氧化三甲胺對于神經(jīng)功能缺損、動脈粥樣硬化、腦梗死面積等反應(yīng)腦梗死的重要神經(jīng)病理變化具有中高度的診斷價值,因此檢測人群體內(nèi)的TMAO水平,有可能會及早發(fā)現(xiàn)小卒中后腦梗死再次發(fā)生的潛在人群,對于潛在發(fā)病人群進(jìn)行TMAO的檢測,為小卒中后再發(fā)腦梗死提供輔助判斷依據(jù),對于預(yù)防腦梗死的發(fā)生具有重要意義。
【圖文】：

載脂蛋白 E 4.45±0.74 5.28±0.58 -0.011 0.991甘油三酯 1.21±0.39 1.12±0.47 2.159 0.031總膽固醇 4.02±0.61 4.00±0.60 0.622 0.534低密度脂蛋白 2.52±0.35 2.51±0.34 0.188 0.851高密度脂蛋白 1.30±0.26 1.43±0.28 -4.251 ＜0.001超敏 C 反應(yīng)蛋白 2.21±0.94 1.84±1.45 2.099 0.036同型半胱氨酸 8.93±1.32 9.59±1.74 -0.581 0.5612.3 代謝組學(xué)檢測結(jié)果通過分析血清核磁圖譜的化學(xué)位移、耦合常數(shù)及峰型等核磁數(shù)據(jù)分析，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)品、數(shù)據(jù)庫 HMDB（http://www.hmdb.ca）、BMRB（http://www.bmrb.wisc.edu）、以及文獻(xiàn)對照[27-29]，，一共指認(rèn)出 30 種化合物（見圖 1-1 及表 1-3）。

苯丙氨酸 2 or 6-CH, 3 or 5-CH 7.32(m), 7.42(m) 甲酸 CH 8.46(s) singlet 單自由基, d: doublet 雙線態(tài), t: triplet 三線態(tài), m: multiplet 多線態(tài), dd: doublet峰;2.S:serum 血清;3. NAG: N-乙酰化糖蛋白; PC: 磷脂酰膽堿; GPC: 甘油磷酸膽堿胺 .卒中組與對照組的血清代謝物分離趨勢監(jiān)督的模式識別方法進(jìn)行主成分分析（principal component analysis，PC據(jù)的原始狀態(tài)，直觀地顯示不同樣品之間的整體差異，通過對小卒中組與 分析。由圖 1-2 中可以看出，兩組血清有分離的趨勢，說明小卒中組與對謝組學(xué)檢測結(jié)果存在差異。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R743.3

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 吳喜紅;;腦梗死合并糖尿病患者血清 血脂 血糖水平監(jiān)測及預(yù)后探討[J];中國實用神經(jīng)疾病雜志;2015年17期

2 房博,王萬鵬,江明慶;C-反應(yīng)蛋白升高和腦梗死面積及預(yù)后的關(guān)系[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2003年03期

3 周玉森;馬景賀;;血清同型半胱氨酸和高敏C反應(yīng)蛋白濃度與腦梗死面積關(guān)系[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2009年05期

4 楊駿;倪桂蓮;;心血管因素及血清半胱氨酸水平升高與腦梗死患者1年死亡風(fēng)險的相關(guān)性研究[J];中華全科醫(yī)學(xué);2018年05期

5 常霞;;動脈粥樣硬化血栓形成性腦梗死血清D二聚體與神經(jīng)功能、腦梗死面積的關(guān)系[J];血栓與止血學(xué);2017年06期

6 溫克,蔣宇,李紅,楊世杰;掃描儀在大腦中動脈阻斷腦梗死面積測量中的應(yīng)用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2002年04期

7 李靜;陳妹紅;;經(jīng)顱多普勒對腦梗死患者預(yù)后評估的意義[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2017年11期

8 劉祖春;;房顫患者發(fā)生心源性腦梗死的危險評估[J];家庭醫(yī)學(xué)(下半月);2017年11期

9 張娟;;血清與腦脊液胱抑素C測定在腦梗死中的臨床意義[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2018年47期

10 劉明全;楊敏;黃飛;袁雪;范靜;;老年2型糖尿病伴腦梗死患者血液流變學(xué)及凝血功能指標(biāo)檢測及意義[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2018年01期

相關(guān)會議論文 前1條

1 鄭麗云;邱偉文;鄔志平;黃良通;彭瀟;黃躍金;;SCF/c-kit信號通路在間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療腦梗死后血管再生的作用機制[A];華東六省一市第二十三次神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議暨2016年浙江省神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2016年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 陳晨;小卒中后再發(fā)腦梗死風(fēng)險預(yù)警研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

2 于進(jìn)超;SWI靜脈不對稱征在缺血性腦血管病中的臨床應(yīng)用[D];山東大學(xué);2017年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 張笑娣;急性腦梗死患者外周血中循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞含量的變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2016年

本文編號：2699141