【摘要】：Ⅱ型局灶性皮質發(fā)育不良(Focal cortical dysplasia type Ⅱ,FCD Ⅱ)是皮質發(fā)育畸形疾病的一種,以局部皮質結構紊亂、出現異常神經元和難治性癲癇為主要特征。近些年來,一些研究發(fā)現PI3K/AKT/mTOR通路中一些基因的體細胞突變可以導致FCDⅡ。在本研究中,我們旨在尋找能夠導致FCDⅡ疾病發(fā)生的其它基因的異常體細胞突變。首先,我們對來自四名FCDⅡ患者的血-腦樣品DNA進行了全外顯子組測序(Whole Exome Sequencing,WES)及成對比較分析。在其中一名FCDⅡ患者腦組織樣品中發(fā)現了RHE 基因的腦體細胞雙突變c.(A104T,C105A),并通過TA載體克隆和Sanger測序進行了證實。該雙突變會導致RHEB蛋白第35位氨基酸由酪氨酸突變成亮氨酸,記為RHEB p.Y35L。我們對該患者腦樣品進行免疫印跡和免疫組織化學分析,以及通過體外轉染和胚胎電轉實驗來研究該突變在mTOR通路活化中的影響。結果發(fā)現,與對照組相比,RHEBp.Y35L突變攜帶者在受損部位表現出顯著增加了的核糖體蛋白S6的磷酸化,提示mTOR信號通路的激活。細胞實驗顯示,與野生型RHEB相比,在培養(yǎng)細胞中過表達RHEB p.Y35L突變體會導致S6磷酸化水平的升高。同樣,在胎鼠腦內胚胎電轉RHEB p.Y35L突變體會誘導S6的磷酸化、巨細胞神經元和神經元遷移受阻。而經胚胎電轉后攜帶有RHEB p.Y35L突變體的出生小鼠表現出癲癇癥狀和異常的腦電波。我們的研究結果表明,腦體細胞RHEB p.Y35L突變可以導致FCDⅡ,這不僅發(fā)現了一個可以導致FCDⅡ的新基因突變,而且進一步證明了 mTOR信號的異常激活是FCDⅡ發(fā)病機制的主要因素。
【圖文】：

最晚、持續(xù)時間比較短［３７］。逡逑１．１．３局灶性皮質發(fā)育不良１１型的病理特征逡逑ＦＣＤＩＩ型表現的病理特征為皮質畸形和巨細胞神經元。如圖１．１所示，ＦＣＤＩＩ逡逑型患者的ＭＲＩ顯示手術切除部位（白色箭頭所示），腦切片Ｈ＆Ｅ染色逡逑（Ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ－Ｅｏｓｉｎ邋ｓｔａｉｎｉｎｇ，Ｈ＆Ｅ）可見形態(tài)增大的神經元細胞（黑色箭頭所７Ｋ），逡逑甚至出現氣球樣細胞（ＦＣＤＩＩｂ型）。ＦＣＤＩＩ型通常在低倍顯微鏡下檢查無誤，并逡逑且容易在組織切片上鑒定，由于神經元變大并且變形，其通常分散在所有層＂５’３８’逡逑３９］。一般來說，異形神經元可以聚集在特定層內（例如，第二層）Ｍ，不符合皮逡逑層放射狀或者柱狀組織模式。正常定向的肥大錐體細胞和正常神經元都可能存在逡逑于發(fā)育不良區(qū)域，正常神經元在其邊緣。孤立的或成簇的氣球樣細胞通常在白質逡逑中更清晰可見［４１］，，它們增大的細胞質使其具有星形細胞形態(tài)。氣球樣細胞通常聚逡逑集在第一層中

ＰＫＢ／ＡＫＴ）信號通路，該通路涉及控制細胞生長、細胞大小、大腦皮質發(fā)育和逡逑神經元遷移等重要過程［２６＿邋８１‘邐Ｍ］。逡逑如圖１．２所示，ｍＴＯＲ信號通路主要通過營養(yǎng)和生長因子來調控細胞的生長，逡逑生長因子主要為胰島素和胰島素樣生長因子（Ｉｎｓｕｌｉｎ邋ｌｉｋｅ邋Ｇｒｏｗｔｈ邋Ｆａｃｔｏｒ，邋ＩＧＦ），逡逑營養(yǎng)主要為葡萄糖和氨基酸。當生長因子與受體結合或者營養(yǎng)豐富時，觸發(fā)ＰＩ３Ｋ逡逑的激活，活化的ＰＩ３Ｋ可以募集下游關鍵分子ＡＫＴ到細胞膜上，使其活化。活逡逑化的ＡＫＴ可以直接激活ｍＴＯＲ，也可通過抑制結節(jié)性硬化癥基因ＴＳＣ１和ＴＳＣ２逡逑形成復合物激活ｍＴＯＲ［８５］。逡逑９逡逑
【學位授予單位】：廈門大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R742

【參考文獻】

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本文編號：2691263