【摘要】：目的通過體外培養(yǎng)原代大鼠海馬神經(jīng)元體系的建立,研究在原代大鼠海馬神經(jīng)元中Sema3F與VEGF mRNA及蛋白表達(dá)的相關(guān)性,通過與Sema3F相關(guān)的海馬神經(jīng)元生長錐塌陷機制研究,為與Sema3F相關(guān)的疾病提供治療依據(jù)和方法。方法1.取新生24小時內(nèi)的Wistar大鼠,在超凈臺內(nèi)無菌條件下分離出雙側(cè)海馬,進行原代大鼠海馬神經(jīng)元的培養(yǎng)工作;2.實驗組:提取原代大鼠海馬神經(jīng)元,培養(yǎng)基中加入Sema3F,分別取0分鐘、5分鐘、15分鐘、30分鐘的樣本。對照組:提取原代大鼠海馬神經(jīng)元,培養(yǎng)基中加入相同濃度的胎牛血清,分別取0分鐘、5分鐘、15分鐘、30分鐘的樣本。3.應(yīng)用Realtime-PCR和Western Blot技術(shù)分別檢測實驗組和對照組原代大鼠海馬神經(jīng)元中VEGF mRNA及其蛋白表達(dá)的含量。應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析,所得數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量方差分析,P㩳0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果實驗組原代大鼠海馬神經(jīng)元中加入Sema3F后在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平可見VEGF mRNA及蛋白表達(dá)的下降,而對照組原代大鼠海馬神經(jīng)元中VEGF mRNA及其蛋白表達(dá)無明顯變化。結(jié)論1.成功建立體外大鼠原代海馬神經(jīng)元的培養(yǎng)體系;2.原代大鼠海馬神經(jīng)元中在轉(zhuǎn)錄水平上Sema3F可以抑制VEGF mRNA的表達(dá),并且具有時間依賴性;3.原代大鼠海馬神經(jīng)元中Sema3F可以抑制VEGF蛋白的合成,并且具有時間依賴性。
【圖文】：

體外培養(yǎng)1天的新生大鼠原代海馬神經(jīng)元×200

體外培養(yǎng)3天的新生大鼠原代海馬神經(jīng)元×200
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R742.1

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