本文關(guān)鍵詞：雷帕霉素與TAT-apoptin協(xié)同抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞成瘤性的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：神經(jīng)膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)發(fā)病率最高的惡性腫瘤,侵襲性強(qiáng),中位生存期通常不足一年。研究表明,mTOR信號通路的異常活化與膠質(zhì)瘤、肺癌、乳腺癌等多種腫瘤的發(fā)生有關(guān),因此以mTOR為靶點(diǎn)治療腫瘤成為研究新熱點(diǎn)。雷帕霉素(rapamycin.Rapa)是一種從吸水性鏈霉菌發(fā)酵液中提取的mTOR抑制劑,具有抗腫瘤的作用。凋亡素(apoptin)是雞貧血病毒中的VP3蛋白質(zhì)。由于其能夠特異性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,對正常細(xì)胞無任何毒副作用,可以成為一種理想的抗腫瘤靶向藥物。凋亡素通過抑制熱休克蛋白70(Hsp70)的表達(dá),切斷Hsp70對腫瘤細(xì)胞的保護(hù)作用,引起腫瘤細(xì)胞凋亡。本文通過體外與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究雷帕霉素與TAT-apoptin聯(lián)合應(yīng)用對膠質(zhì)瘤的影響,探討聯(lián)合應(yīng)用是否比單獨(dú)用藥效果好。聯(lián)合與單獨(dú)用藥后,使用MTT檢測U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖率,AO/EB熒光染色檢測凋亡形態(tài),流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率；在裸鼠C6膠質(zhì)瘤皮下移植模型中進(jìn)行單獨(dú)及聯(lián)合用藥,探討單獨(dú)用藥及聯(lián)合用藥的效果。結(jié)果顯示,雷帕霉素與TAT-apoptin單獨(dú)用藥均能抑制U87細(xì)胞的增殖,且隨著藥物濃度的增加細(xì)胞增殖率逐漸降低；在聯(lián)合用藥與單獨(dú)用藥對比實(shí)驗(yàn)中,聯(lián)合用藥組細(xì)胞增殖率明顯低于單獨(dú)用藥組。聯(lián)合用藥組細(xì)胞核染呈橘紅色,為晚期凋亡狀態(tài),凋亡率明顯高于兩種藥物單獨(dú)使用。動物實(shí)驗(yàn)中Rapa組抑瘤率為29.49%,TAT-apoptin組為24.11%,聯(lián)合用藥組為65.5%,聯(lián)合組抑瘤率比單獨(dú)組高。因此,Rapa與TAT-apoptin聯(lián)合用藥可增強(qiáng)對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的抑制作用,促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的凋亡,產(chǎn)生協(xié)同的抗腫瘤作用。
【關(guān)鍵詞】：雷帕霉素 凋亡素 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 抗腫瘤藥物聯(lián)合治療
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R739.4
【目錄】：

• 摘要6-7
• ABSTRACT7-12
• 第一章 緒論12-26
• 1.1 膠質(zhì)瘤的分子靶向治療12-16
• 1.1.1 膠質(zhì)瘤的研究進(jìn)展12
• 1.1.2 分子靶向治療的研究概況12-16
• 1.2 mTOR信號通路及雷帕霉素16-21
• 1.2.1 mTOR的分子結(jié)構(gòu)與功能16-17
• 1.2.2 mTOR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及調(diào)節(jié)17-18
• 1.2.3 其它信號通路與mTOR的相互作用18-19
• 1.2.4 mTOR信號通路抑制劑的研究進(jìn)展19-20
• 1.2.5 雷帕霉素及其衍生物20-21
• 1.3 凋亡素及熱休克蛋白7021-25
• 1.3.1 細(xì)胞凋亡與腫瘤21
• 1.3.2 凋亡素誘導(dǎo)腫瘤凋亡的研究進(jìn)展21-23
• 1.3.3 熱休克蛋白70與凋亡素的關(guān)系23-24
• 1.3.4 熱休克蛋白70與mTOR的關(guān)系24-25
• 1.4 小結(jié)25-26
• 第二章 雷帕霉素與TAT-apoptin在體外對膠質(zhì)瘤的影響26-42
• 2.1 材料與儀器26-32
• 2.1.1 主要材料26-27
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器27-28
• 2.1.3 主要試劑的配制方法28-32
• 2.2 實(shí)驗(yàn)原理32-34
• 2.2.1 鎳柱親和層析32-33
• 2.2.2 凝膠過濾層析33
• 2.2.3 MTT實(shí)驗(yàn)原理33
• 2.2.4 細(xì)胞凋亡檢測原理33-34
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法34-42
• 2.3.1 TAT-apoptin的分離純化34-37
• 2.3.2 細(xì)胞復(fù)蘇、傳代、凍存及運(yùn)輸37-38
• 2.3.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)38-39
• 2.3.4 體外細(xì)胞相對活性檢測39-40
• 2.3.5 AO/EB雙染檢測40
• 2.3.6 流式細(xì)胞儀檢測40-42
• 第三章 雷帕霉素與TAT-apoptin對膠質(zhì)瘤在體內(nèi)成瘤的影響42-44
• 3.1 材料及試劑42
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器42
• 3.1.2 主要試劑的配制42
• 3.2 C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞的培養(yǎng)42-43
• 3.3 建立裸鼠皮下C6膠質(zhì)瘤模型43-44
• 第四章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-52
• 4.1 TAT-apoptin的表達(dá)及純化44-45
• 4.2 體外細(xì)胞活性檢測45-47
• 4.3 AO/EB熒光染色檢測結(jié)果47
• 4.4 流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果47-48
• 4.5 裸鼠皮下移植瘤實(shí)驗(yàn)48-52
• 第五章 討論52-55
• 第六章 總結(jié)與展望55-57
• 6.1 總結(jié)55-56
• 6.2 展望56-57
• 致謝57-58
• 參考文獻(xiàn)58-67
• 附錄A 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文67-68
• 附錄B68

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 楊群英;陳忠平;;惡性膠質(zhì)瘤分子靶向藥物聯(lián)合治療新動態(tài)[J];中國神經(jīng)腫瘤雜志;2007年04期

  本文關(guān)鍵詞：雷帕霉素與TAT-apoptin協(xié)同抗神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞成瘤性的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：268065