【摘要】：研究背景:缺血性腦卒中(Ischemic stroke)具有高發(fā)病率、高致死率和高致殘率的特點(diǎn),是嚴(yán)重威脅人類健康的常見疾病之一。缺血性腦卒中涉及一系列復(fù)雜的病理生理過程,激活多種細(xì)胞或分子信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng),最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的死亡。但,其病理生理機(jī)制尚未明確。轉(zhuǎn)錄因子的功能紊亂參與多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病的發(fā)病過程,越來越多研究證實(shí),轉(zhuǎn)錄因子及其相關(guān)基因的信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)在卒中引起的缺血損傷和神經(jīng)血管恢復(fù)中起重要的調(diào)節(jié)作用。Krupple-樣因子(Kruuppel-like factors,KLFs)是一類具有鋅指結(jié)構(gòu)域的核轉(zhuǎn)錄因子。KLFs參與多種基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控過程,涉及生長、分化、增殖、凋亡、代謝和炎癥等多種病理生理過程。近年來,越來越多的研究發(fā)現(xiàn)KLF家族參與了多種血管疾病相關(guān)病理過程。目的:探究KLF11基因敲除對(duì)小鼠缺血性腦卒中的影響及其可能相關(guān)的病理過程。方法:將小鼠隨機(jī)分為野生對(duì)照組(wild-type,WT)和KLF11基因敲除組(knock out,KO)。使用大腦中動(dòng)脈阻塞法(middle cerebral artery occlusion,MCAO)誘導(dǎo)小鼠腦梗死模型、利用散斑腦血流儀監(jiān)測術(shù)中小鼠腦血流的變化及術(shù)后的再灌注情況。利用TTC染色法評(píng)定KLF11基因敲除對(duì)術(shù)后小鼠腦梗死體積的影響;三種感覺運(yùn)動(dòng)行為法:Rotarod實(shí)驗(yàn)、Footfault實(shí)驗(yàn)、Adhesive tape romoval實(shí)驗(yàn)來檢測小鼠術(shù)后神經(jīng)功能缺損情況;干濕重法測量KLF11基因敲除對(duì)小鼠術(shù)后腦水腫的影響;使用伊文氏藍(lán)(Evans Blue)和熒光素標(biāo)記的Dextran(TMR-Dextran)檢測兩組小鼠術(shù)后血腦屏障(bloodbrain barrier,BBB)的損傷;利用定量PCR(qPCR)、蛋白質(zhì)印跡法(WesternBlot)及酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELIS A)檢測因子的 mRNA 和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:與WT對(duì)照組小鼠相比,KLF11KO組小鼠表現(xiàn)出較高的神經(jīng)功能評(píng)分、更大的梗死體積和更嚴(yán)重的神經(jīng)行為功能缺失;KLF11 KO組小鼠的梗死側(cè)有更多的伊文氏藍(lán)染料和TMR-Dextran滲漏;KLF11基因敲除后,梗死側(cè)含水量也明顯高于WT組;KLF11基因敲除后,梗死側(cè)IL-6的表達(dá)顯著高于WT組。結(jié)論:KLF11敲除會(huì)加重小鼠的缺血性腦損傷,加劇BBB的破壞,增加炎癥因子IL-6的表達(dá)。以上結(jié)果提示KLF11在缺血引起的大腦功能紊亂中發(fā)揮保護(hù)作用。
【圖文】：

４．１邋ＫＬＦ家族成員在小鼠缺血性腦損傷皮層中的表達(dá)譜逡逑為了探宄ＫＬＦ１１在缺血性腦損傷中的調(diào)節(jié)作用，本研究首先檢測ＫＬＦ家族逡逑１７個(gè)成員的ｍＲＮＡ在Ｃ５７鼠腦缺血后皮層中的表達(dá)變化情況。結(jié)果如下圖１Ａ逡逑所示，與Ｓｈａｍ組比，ＭＣＡＯ組小鼠皮層中ＫＬＦ１１的ｍＲＮＡ表達(dá)在術(shù)后２４小逡逑時(shí)后表達(dá)下降了近３倍，與此相反，ＫＬＦ２，邋ＫＬＦ４，邋ＫＬＦ９在缺血皮層中的表達(dá)逡逑明顯升高。相應(yīng)的，ＫＬＦ１１的蛋白表達(dá)量在缺血皮層中也顯著下降，而ＫＬＦ２，逡逑ＫＬＦ４，，ＫＬＦ９的蛋白表達(dá)量在缺血皮層中明顯升高（圖１邋Ｂ）。這一結(jié)果顯示了逡逑１５逡逑

時(shí)再灌注處理。２４小時(shí)后先進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分（Ｃ），然后灌注取腦做ＴＴＣ染色逡逑（Ａ），用ＩｍａｇｅＪ計(jì)算梗死體積（Ｂ）。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明ＫＬＦ１１基因敲除明顯增加逡逑小鼠缺血后梗死體積和神經(jīng)功能評(píng)分。數(shù)值以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，每組８只逡逑小鼠；＞＜邋０．０５與ＫＬＦＷＴ組相比。逡逑４．３邋ＫＬＦ１１基因敲除加劇缺血性腦血管n蟯稿義希攏攏率譴竽勻毖運(yùn)鶘私顯縊鶘說牟課�，n攏碌墓δ芪陜沂僑毖運(yùn)鶘艘誨義細(xì)齬系納銼曛荊歟矗常蕁１狙芯客ü觳廡∈笫質(zhì)酰玻蔥∈焙筧毖櫓幸廖氖俠跺義蝦停裕停遙模澹簦潁幔釕┝坷雌攔懶階樾∈笫鹺螅攏攏碌乃鴰登榭�。壤_跡乘荊河脲義隙哉兆橄啾齲耍蹋疲保卞澹耍獻(xiàn)樾∈蟮墓Ｋ啦嗉觳獾礁嗟囊廖氖俠度玖蝦灣義希裕停遙模澹簦潁幔�，这覇踞果钡a鰨耍蹋疲保被蚯貿(mào)峒又匭∈蠊Ｋ籃蟮模攏攏縷蘋�。辶x

本文編號(hào)：2643695