【摘要】：目的:惡性膠質(zhì)瘤是最常見(jiàn)的中樞系統(tǒng)腫瘤。研究發(fā)現(xiàn),在許多腫瘤中Prosaposin的表達(dá)異常,例如乳腺癌、前列腺癌。Prosaposin在惡性膠質(zhì)瘤腫瘤形成和發(fā)展過(guò)程中的生物作用依然不清晰。研究方法:本研究經(jīng)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院倫理委員會(huì)同意。研究采用100例來(lái)自于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科2012-2017年之間經(jīng)手術(shù)切除并被組織病理學(xué)確診為膠質(zhì)瘤的患者標(biāo)本,所有患者在接受手術(shù)前均未行化療或者放療。采用U251、U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞系進(jìn)行研究。本研究采用Western blot、RT-PCR、免疫組化等實(shí)驗(yàn)方法探究Prosaposin在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況。采用MTS和克隆形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定Prosaposin對(duì)U251、U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖能力的影響。采用細(xì)胞劃痕和Transwell方法測(cè)定Prosaposin對(duì)U251、U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響。通過(guò)Western blot觀察Prosaposin對(duì)于U251、U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞的作用機(jī)制。結(jié)果:1、Prosaposin的表達(dá)與膠質(zhì)瘤級(jí)別具有相關(guān)性,在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)水平高于在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá)水平。2、MTS檢測(cè),在72h時(shí),U251、U87細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組的吸光度值開(kāi)始降低,與對(duì)照組相比(P0.05)。在96h時(shí),U251、U87細(xì)胞實(shí)驗(yàn)組的吸光度值明顯降低,與對(duì)照組相比(P0.05),差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在克隆形成實(shí)驗(yàn)中,U251細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組組克隆細(xì)胞數(shù)(155±25)明顯少于對(duì)照組克隆細(xì)胞數(shù)(300±25),P0.05。U87細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組克隆細(xì)胞數(shù)(140±25)明顯少于對(duì)照組克隆細(xì)胞數(shù)(280±25),P0.05。差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、細(xì)胞劃痕法,U251細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞劃痕愈合率(23±5)明顯少于對(duì)照組細(xì)胞劃痕愈合率(56±6),P0.05。U87細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞劃痕愈合率(40±5)明顯少于對(duì)照組細(xì)胞劃痕愈合率(75±6),P0.01。差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4、Transwell法檢測(cè),U251細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組侵襲細(xì)胞數(shù)(50±25)明顯少于對(duì)照組克隆細(xì)胞數(shù)(160±35),P0.01。U87細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組克隆細(xì)胞數(shù)(60±40)明顯少于對(duì)照組克隆細(xì)胞數(shù)(180±25),P0.01。差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5、通過(guò)Western blot檢測(cè),在U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的p-AKT和p-GSK3β的相對(duì)表達(dá)量降低,P0.05。在U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞中,與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組的p-AKT和p-GSK3β的相對(duì)表達(dá)量降低,P0.05。差異性具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。AKT和GSK3β的總蛋白量不改變。結(jié)論:我們的研究結(jié)果表明,Prosaposin蛋白在惡性膠質(zhì)瘤的腫瘤形成發(fā)展、侵襲及遷移過(guò)程中起到重要作用。Prosaposin蛋白在膠質(zhì)瘤中表達(dá)增高且與膠質(zhì)瘤的級(jí)別以及惡性程度具有相關(guān)性。除此之外,我們還闡明了Prosaposin對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的生物學(xué)行為的影響,敲除Prosaposin可抑制膠質(zhì)瘤U251、U87細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力,以及其潛在的作用機(jī)制,敲除Prosaposin可降低膠質(zhì)瘤U251、U87細(xì)胞p-AKT,p-GSK3β的表達(dá)。Prosaposin可作為有意義的臨床診斷分級(jí)生物標(biāo)記物,同時(shí)為人腦膠質(zhì)瘤的靶向治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。在未來(lái)的研究中,我們將進(jìn)一步探究Prosaposin在膠質(zhì)瘤形成過(guò)程中的分子機(jī)制以至于更好的了解Prosaposin基因在膠質(zhì)瘤中功能。
【圖文】：

posin 蛋白在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)水平高于在低級(jí)別膠質(zhì)rotein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliolow-grade gliomas Prosaposin 蛋白在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)水平高于在低級(jí)別0.05。

3.1.1 Prosaposin 蛋白在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)水平高于在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的表達(dá) 3.1.1 The protein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliomas comparlow-grade gliomasn blot 檢測(cè) Prosaposin 蛋白在高級(jí)別膠質(zhì)瘤中表達(dá)水平高于在低級(jí)別膠質(zhì)瘤中的中*表示 P<0.05。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R739.41

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Carlos R.Morales,Haitham Badran;Prosaposin ablation inactivates the MAPK and Akt signaling pathways and interferes with the development of the prostate gland[J];Asian Journal of Andrology;2003年01期

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本文編號(hào)：2640938