【摘要】：目的:惡性膠質瘤是最常見的中樞系統(tǒng)腫瘤。研究發(fā)現(xiàn),在許多腫瘤中Prosaposin的表達異常,例如乳腺癌、前列腺癌。Prosaposin在惡性膠質瘤腫瘤形成和發(fā)展過程中的生物作用依然不清晰。研究方法:本研究經(jīng)中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院倫理委員會同意。研究采用100例來自于中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科2012-2017年之間經(jīng)手術切除并被組織病理學確診為膠質瘤的患者標本,所有患者在接受手術前均未行化療或者放療。采用U251、U87膠質瘤細胞系進行研究。本研究采用Western blot、RT-PCR、免疫組化等實驗方法探究Prosaposin在膠質瘤組織中的表達情況。采用MTS和克隆形成實驗測定Prosaposin對U251、U87膠質瘤細胞增殖能力的影響。采用細胞劃痕和Transwell方法測定Prosaposin對U251、U87膠質瘤細胞侵襲及遷移能力的影響。通過Western blot觀察Prosaposin對于U251、U87膠質瘤細胞的作用機制。結果:1、Prosaposin的表達與膠質瘤級別具有相關性,在高級別膠質瘤中表達水平高于在低級別膠質瘤中的表達水平。2、MTS檢測,在72h時,U251、U87細胞實驗組的吸光度值開始降低,與對照組相比(P0.05)。在96h時,U251、U87細胞實驗組的吸光度值明顯降低,與對照組相比(P0.05),差異性具有統(tǒng)計學意義。在克隆形成實驗中,U251細胞,實驗組組克隆細胞數(shù)(155±25)明顯少于對照組克隆細胞數(shù)(300±25),P0.05。U87細胞,實驗組克隆細胞數(shù)(140±25)明顯少于對照組克隆細胞數(shù)(280±25),P0.05。差異性具有統(tǒng)計學意義。3、細胞劃痕法,U251細胞,實驗組細胞劃痕愈合率(23±5)明顯少于對照組細胞劃痕愈合率(56±6),P0.05。U87細胞,實驗組細胞劃痕愈合率(40±5)明顯少于對照組細胞劃痕愈合率(75±6),P0.01。差異性具有統(tǒng)計學意義。4、Transwell法檢測,U251細胞,實驗組侵襲細胞數(shù)(50±25)明顯少于對照組克隆細胞數(shù)(160±35),P0.01。U87細胞,實驗組克隆細胞數(shù)(60±40)明顯少于對照組克隆細胞數(shù)(180±25),P0.01。差異性具有統(tǒng)計學意義。5、通過Western blot檢測,在U251膠質瘤細胞中,與對照組相比,實驗組的p-AKT和p-GSK3β的相對表達量降低,P0.05。在U87膠質瘤細胞中,與對照組相比,實驗組的p-AKT和p-GSK3β的相對表達量降低,P0.05。差異性具有統(tǒng)計學意義。AKT和GSK3β的總蛋白量不改變。結論:我們的研究結果表明,Prosaposin蛋白在惡性膠質瘤的腫瘤形成發(fā)展、侵襲及遷移過程中起到重要作用。Prosaposin蛋白在膠質瘤中表達增高且與膠質瘤的級別以及惡性程度具有相關性。除此之外,我們還闡明了Prosaposin對膠質瘤細胞系的生物學行為的影響,敲除Prosaposin可抑制膠質瘤U251、U87細胞的增殖、遷移及侵襲能力,以及其潛在的作用機制,敲除Prosaposin可降低膠質瘤U251、U87細胞p-AKT,p-GSK3β的表達。Prosaposin可作為有意義的臨床診斷分級生物標記物,同時為人腦膠質瘤的靶向治療提供理論和實驗依據(jù)。在未來的研究中,我們將進一步探究Prosaposin在膠質瘤形成過程中的分子機制以至于更好的了解Prosaposin基因在膠質瘤中功能。
【圖文】：

posin 蛋白在高級別膠質瘤中表達水平高于在低級別膠質rotein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliolow-grade gliomas Prosaposin 蛋白在高級別膠質瘤中表達水平高于在低級別0.05。

3.1.1 Prosaposin 蛋白在高級別膠質瘤中表達水平高于在低級別膠質瘤中的表達 3.1.1 The protein expression of Prosaposin was higher in high-grade gliomas comparlow-grade gliomasn blot 檢測 Prosaposin 蛋白在高級別膠質瘤中表達水平高于在低級別膠質瘤中的中*表示 P<0.05。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R739.41

【參考文獻】

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1 Carlos R.Morales,Haitham Badran;Prosaposin ablation inactivates the MAPK and Akt signaling pathways and interferes with the development of the prostate gland[J];Asian Journal of Andrology;2003年01期

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本文編號：2640938