【摘要】：腦卒中是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,缺血性腦卒中是引起人類死亡的三大原因之一,其高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率給社會(huì)和人民生活帶來了巨大的負(fù)擔(dān)。腦缺血涉及的機(jī)制十分復(fù)雜,是一個(gè)多環(huán)節(jié)、多因素、多機(jī)制的惡性級(jí)聯(lián)過程,如:興奮性毒性氨基酸釋放、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞凋亡、梗死周圍去極化等。其中炎癥反應(yīng)是引起神經(jīng)元損傷的重要因素。研究發(fā)現(xiàn),腦缺血后,多種炎性細(xì)胞因子表達(dá)和炎癥細(xì)胞在缺血區(qū)內(nèi)浸潤,促進(jìn)炎癥性損傷的發(fā)生和發(fā)展,導(dǎo)致缺血區(qū)腦組織壞死,并加重腦水腫和神經(jīng)元的損傷。因此,以神經(jīng)炎癥的調(diào)控為切入點(diǎn)進(jìn)行相關(guān)研究有助于明確CNS炎性相關(guān)疾病的發(fā)病機(jī)理,同時(shí)也有益于發(fā)現(xiàn)相關(guān)疾病的新治療靶點(diǎn)。單核細(xì)胞趨化蛋白誘導(dǎo)的蛋白1(MCP-induced protein 1,MCPIP1),是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種CCCH型鋅指蛋白,參與了心臟病、炎癥性疾病、自身免疫性疾病的病理學(xué)過程。MCPIP能夠參與腦缺血后的炎癥調(diào)控,具有抑制腦缺血早期炎癥反應(yīng)的作用,研究發(fā)現(xiàn)其可能通過調(diào)節(jié)NF-κB通路的活性從而發(fā)揮抗炎作用。蜂毒肽(melittin,MEL)又稱蜂毒溶血肽,是一種小分子多肽類生物毒素,約占蜂毒干重的50%左右,是蜜蜂毒中主要的功能物質(zhì)。它是由26個(gè)氨基酸組成的線性多肽,具有較強(qiáng)的表面活性,能通過卵磷脂膜和混合膜。蜂毒肽MEL具有許多生物學(xué)活性,包括抗菌、抗病毒、抗炎、抗腫瘤、抗風(fēng)濕等活性。研究涵蓋感染性疾病、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈硬化和腫瘤方向。近期有研究通過體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)證實(shí),MEL能夠通過抗凋亡、抑制NF-κB信號(hào)通路的抗炎癥反應(yīng)作用在神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病肌萎縮側(cè)索硬化中發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)和器官保護(hù)作用。基于既往文獻(xiàn)研究,我們推測蜂毒肽可通過抑制神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)而在缺血性腦損傷中發(fā)揮保護(hù)作用,因此本研究采用健康成年雄性C57BL/6小鼠為研究對象,建立電凝法遠(yuǎn)端大腦中動(dòng)脈閉塞(distal middlecerebral artery occlusion,dMCAO)模型,通過行為學(xué)、形態(tài)學(xué)及分子生物學(xué)等多個(gè)層面,觀察蜂毒肽對局灶性腦缺血小鼠潛在的神經(jīng)保護(hù)及抗炎癥損傷作用,并建立了脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥損傷模型,并且通過轉(zhuǎn)染敲低BV2小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)MCPIP1基因,探討蜂毒肽是否通過調(diào)節(jié)MCPIP1蛋白水平和NF-κB信號(hào)通路,降低炎癥反應(yīng),從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,同時(shí)也進(jìn)一步研究證實(shí)了炎癥保護(hù)因子MCPIP1與TLR4/NF-κB信號(hào)通路相互作用關(guān)系,以期為缺血性腦卒中的治療和預(yù)防提供更多科研依據(jù)和研究思路。第一部分蜂毒肽對局灶性腦缺血小鼠的神經(jīng)功能保護(hù)及抗炎癥損傷作用目的:通過評(píng)價(jià)蜂毒肽處理后局灶性腦缺血小鼠的神經(jīng)功能缺損評(píng)分、腦組織含水量、腦梗死體積變化,及腦血流量的檢測評(píng)價(jià)蜂毒肽對局灶性腦缺血小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用并確定有效劑量。再通過檢測各炎性因子的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平,研究蜂毒肽的抗炎癥損傷作用。方法:采用健康成年雄性C57BL/6小鼠為研究對象,通過電凝法建立dMCAO模型。將C57BL/6小鼠隨機(jī)分為以下各組:蜂毒肽低劑量組0.1μg/g、中劑量組0.2μg/g、高劑量組0.4μg/g。小鼠術(shù)術(shù)后即刻給藥1次,后每日1次,直至取材。Sham組(假手術(shù)組)和Vehicle組(大腦中動(dòng)脈閉塞組)分別于相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)給予等體積生理鹽水腹腔注射。對各實(shí)驗(yàn)組小鼠進(jìn)行mNSS評(píng)分、體重監(jiān)測、跑輪實(shí)驗(yàn)等行為學(xué)評(píng)估,以及TTC染色法測定腦梗死體積,干濕重法測定腦組織含水量,激光散斑實(shí)時(shí)監(jiān)測腦缺血后兩半球的腦血流量,以及通過qRT-PCR、Western blot、ELISA法檢測并分析各組小鼠的炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB、MCPIP1的mRNA和蛋白水平,從而評(píng)價(jià)蜂毒肽對局灶性腦缺血小鼠的神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果:1.體重變化結(jié)果示:Sham組小鼠和dMCAO術(shù)后各組小鼠于24h、48h、72h與術(shù)前相比體重均有顯著下降(P0.01);但Vehicle組各觀察時(shí)間點(diǎn)與Sham組相比均無顯著差異(P0.05);各時(shí)間點(diǎn),不同劑量給藥組與Vehicle組相比,差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.mNSS結(jié)果示:在腦缺血之前,小鼠沒有表現(xiàn)出神經(jīng)功能缺陷,dMCAO術(shù)后24h、48h、72h神經(jīng)功能均表現(xiàn)出明顯下降(P0.01);術(shù)后24h各劑量給藥組與Vehicle組相比評(píng)分無明顯差異(P0.05),但48h、72h后MEL中、高劑量組較Vehicle組神經(jīng)功能有顯著恢復(fù)(P0.05),且神經(jīng)功能恢復(fù)呈劑量相關(guān)性(P0.05)。3.Rota-Rod test結(jié)果顯示:各組小鼠dMCAO術(shù)后24h神經(jīng)功能顯著降低(P0.01),Vehicle組與高劑量MEL藥物處理組相比,神經(jīng)功能下降更加明顯(P0.05)。術(shù)后48h、72h,中、高劑量MEL組較Vehicle組,神經(jīng)功能恢復(fù)更加顯著(48h:P0.05;72h:P0.01),且神經(jīng)功能恢復(fù)呈劑量相關(guān)性(P0.05)。4.TTC法測定腦梗死體積結(jié)果顯示,MEL組與Vehicle組相比,術(shù)后24h、48h、72h腦梗死體積均有縮小(24h,72h:P0.05;48h:P0.01)。5.通過干濕稱重法檢測腦組織含水量結(jié)果顯示,隨時(shí)間延長,Vehicle組小鼠病灶側(cè)腦組織含水量逐漸升高,以72h升高最為明顯(P0.05)。MEL組與Vehicle組相比,病灶側(cè)腦組織含水量于24h、48h、72h均比同時(shí)段的Vehicle組顯著下降(P0.05)。6.腦血流量監(jiān)測結(jié)果顯示,各組小鼠dMCAO術(shù)后24h至72h各觀察時(shí)間點(diǎn),病灶側(cè)和對側(cè)CBF均顯著下降(P0.01)。MEL組于術(shù)后即刻、術(shù)后6h的病灶側(cè)CBF與Vehicle組基本持平,無顯著差異,但在12h至72h病灶側(cè)腦血流灌注恢復(fù)更加明顯(P0.05)。Vehicle組和MEL組的病灶對側(cè)CBF均于6h緩慢恢復(fù),兩組之間無明顯差異(P0.05)。7.qRT-PCR結(jié)果顯示,蜂毒肽能夠降低缺血腦組織炎性因子IL-1β(Vehicle vs.Sham:P0.01;MEL-L vs.Vehicle:P0.05;MEL-M vs.Vehicle:P0.05;MEL-H vs.Vehicle:P0.01)、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88、NF-κB(Vehicle vs.Sham:P0.001;MEL-L vs.Vehicle:P0.05;MEL-M vs.Vehicle:P0.05;MEL-H vs.Vehicle:P0.05)mRNA水平。8.ELISA結(jié)果顯示,蜂毒肽能夠降低缺血腦組織炎性因子IL-1β(Vehicle vs.Sham:P0.001;MEL-L vs.Vehicle:P0.05;MEL-M vs.Vehicle:P0.01;MEL-H vs.Vehicle:P0.01)、IL-6(Vehicle vs.Sham:P0.001;MEL-L vs.Vehicle:P0.05;MEL-M vs.Vehicle:P0.05;MELH vs.Vehicle:P0.01)、TNFα(Vehicle vs.Sham:P0.05;MEL-L vs.Vehicle:P0.05;MEL-M vs.Vehicle:P0.05;MEL-H vs.Vehicle:P0.05)的蛋白濃度水平。9.根據(jù)上述結(jié)果,我們選取了MEL高劑量處理組代表藥物處理組進(jìn)行Western blot實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,與Vehicle組相比,MEL處理組能夠顯著下調(diào)TLR4(Vehicle vs.Sham:P0.01;MEL vs.Vehicle:P0.05)、MyD88(Vehicle vs.Sham:P0.05;MEL vs.Vehicle:P0.05)以及NF-κB(Vehicle vs.Sham:P0.05;MEL vs.Vehicle:P0.05)的蛋白表達(dá)水平,持續(xù)上調(diào)MCPIP1(Vehicle vs.Sham:P0.001;MEL vs.Vehicle:P0.001)蛋白水平。第二部分蜂毒肽對鼠小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥損傷的保護(hù)作用目的:構(gòu)建體外炎癥反應(yīng)模型,檢測LPS不同處理時(shí)間細(xì)胞炎性因子的變化,以及檢測MEL藥物處理后各炎性因子的變化,以研究MEL的神經(jīng)保護(hù)作用是否是通過抗炎作用而發(fā)揮。方法:LPS誘導(dǎo)BV2小膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)建體外炎癥反應(yīng)模型,按LPS處理時(shí)間分為以下組:LPS 3h組、LPS 6h組、LPS 12h組、LPS 24h組。qRT-PCR檢測IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB表達(dá)水平。給予MEL低(0.5μg/ml)、中(1μg/ml)、高劑量(2μg/ml)處理,通過qRT-PCR、Western blot、ELISA法檢測并分析各組細(xì)胞的炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB和MCPIP1的mRNA和蛋白水平,細(xì)胞免疫熒光檢測MCPIP1的表達(dá)定位以及藥物處理后NF-κB的入核情況,并收集處理后BV2的細(xì)胞上清與SH-SY5Y共孵育檢測其神經(jīng)毒性,從而評(píng)價(jià)MEL對BV2炎性損傷的神經(jīng)保護(hù)作用。結(jié)果:1.qRT-PCR法檢測LPS處理不同時(shí)間對BV2炎癥損傷后mRNA的影響,結(jié)果顯示,與Control組相比,IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB和MCPIP1的mRNA水平均隨LPS處理時(shí)間延長而升高(P0.05),提示體外炎癥模型構(gòu)建成功。2.ELISA法檢測蜂毒肽對LPS誘導(dǎo)BV2炎性損傷后炎性因子水平的影響,結(jié)果顯示,與LPS處理組相比,MEL中、高濃度組IL-1β、IL-6、TNFα蛋白水平顯著下降(P0.05)。3.Western blot結(jié)果顯示,與LPS處理組相比,低、中、高M(jìn)EL藥物處理后,TLR4、MyD88以及NF-κB的蛋白水平均有所下降(P0.01)。與LPS處理組相比,MEL藥物處理組抗炎因子MCPIP1的蛋白水平持續(xù)升高(P0.01)。4.蜂毒肽對LPS誘導(dǎo)BV2炎性損傷后NF-κB核定位的影響細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,靜息狀態(tài)下,NF-κB(p65亞單位)主要定位于細(xì)胞漿內(nèi);給予LPS刺激后,NF-κB核定位增加,表明該通路處于激活狀態(tài);給予MEL處理后再給予LPS處理,則發(fā)現(xiàn)NF-κB向細(xì)胞核的遷移受到抑制。5.蜂毒肽對LPS誘導(dǎo)BV2炎性代謝產(chǎn)物的神經(jīng)元毒性的影響為探討B(tài)V2炎癥損傷后的細(xì)胞炎性代謝產(chǎn)物對神經(jīng)元毒性作用,模擬體內(nèi)腦缺血后病理生理過程,本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用BV2細(xì)胞處理后的細(xì)胞上清與SH-SY5Y共孵育,通過檢測孵育后SH-SY5Y的細(xì)胞活力及凋亡相關(guān)因子的變化,反映小膠質(zhì)細(xì)胞的炎性代謝產(chǎn)物對神經(jīng)細(xì)胞的影響。結(jié)果顯示,與Control組相比,LPS處理BV2的上清所孵育的SH-SY5Y細(xì)胞活力下降明顯(P0.01),中、高濃度組MEL藥物處理后的BV2細(xì)胞上清相對毒性下降,細(xì)胞活力升高(P0.05)。通過q RTPCR檢測處理后SH-SY5Y細(xì)胞凋亡相關(guān)因子的mRNA水平評(píng)價(jià)神經(jīng)細(xì)胞的活力。結(jié)果顯示,LPS處理后,與Control組相比,Bax、AIF mRNA水平顯著下降(P0.01),Bcl-2水平顯著上升(P0.01)。與LPS組相比,中、高濃度MEL藥物處理組的細(xì)胞上清孵育的SH-SY5Y Bax、AIF mRNA水平明顯升高(P0.01),Bcl-2水平下降(P0.05),提示藥物處理組的細(xì)胞活力增加。第三部分蜂毒肽對BV2細(xì)胞炎癥損傷的保護(hù)作用相關(guān)機(jī)制研究目的:本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用si-RNA轉(zhuǎn)染BV2細(xì)胞對MCPIP1基因進(jìn)行敲低,檢測各炎癥因子的變化,探究MEL的抗炎作用機(jī)制是否與MCPIP1蛋白相關(guān)。方法:將MCPIP1的si-RNA轉(zhuǎn)染入BV2細(xì)胞,再進(jìn)行LPS處理及MEL藥物處理,將細(xì)胞分為si-Control組和si-ZC3H12A組,通過q RTPCR、Western blot、ELISA法檢測并分析各組細(xì)胞的炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB的mRNA和蛋白水平,細(xì)胞免疫熒光檢測NF-κB的入核情況,并收集處理后BV2的細(xì)胞上清與SHSY5Y共孵育檢測其神經(jīng)毒性,從而探討MEL的抗炎作用機(jī)制是否與MCPIP1蛋白相關(guān)。結(jié)果:1.關(guān)于轉(zhuǎn)染效率檢測,分別通過qRT-PCR、Western blot檢測siRNA轉(zhuǎn)染效率,結(jié)果提示,si-ZC3H12A轉(zhuǎn)染BV2細(xì)胞后,與si-Control相比,MCPIP1的mRNA水平和蛋白表達(dá)水平均明顯下降(P0.01),證明轉(zhuǎn)染成功。2.為了進(jìn)一步研究MCPIP對IL-1β、IL-6、TNFα的影響,以及MCPIP與NF-κB之間的關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)在成功敲低MCPIP1基因和蛋白的表達(dá)后,再給予LPS誘導(dǎo)炎性反應(yīng)和MEL藥物處理,分別通過qRTPCR、ELISA、Western blot檢測IL-1β、IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB各炎性因子的mRNA和蛋白表達(dá)的變化,結(jié)果顯示,MCPIP1敲低后,IL-1βmRNA和蛋白水平與si-Control組無顯著差異(P0.05),IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB的mRNA水平均升高(P0.05);IL-6、TNFα、TLR4、MyD88以及NF-κB蛋白表達(dá)水平于MCPIP1敲除后均升高(IL-6,TNFα,TLR4,NF-κB:P0.05;MyD88:P0.01 vs.si-Control)。應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)siZC3H12A組NF-κB核內(nèi)表達(dá)較si-Control組增多,提示MCPIP1基因敲除后,MEL的抗炎癥作用較前減弱,說明MEL的抗炎作用是通過MCPIP1蛋白介導(dǎo),影響了TLR4/MyD88/NF-κB通路的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而發(fā)揮效用的。3.si-RNA轉(zhuǎn)染BV2細(xì)胞后細(xì)胞上清對SH-SY5Y的神經(jīng)元毒性檢測結(jié)果顯示,CCK-8和LDH檢測結(jié)果提示,與si-Control組相比,siZC3H12A組的細(xì)胞上清孵育的SH-SY5Y活性下降(P0.01);qRTPCR提示,si-ZC3H12A組與si-Control組相比,AIF、Bax凋亡相關(guān)因子mRNA水平下降(P0.01),Bcl mRNA水平升高(P0.01),同樣提示了對于敲除MCPIP1的BV2細(xì)胞,盡管給予MEL藥物處理,其LPS誘導(dǎo)炎性損傷的細(xì)胞上清對神經(jīng)元的毒性增加,證實(shí)了MEL的抗炎及神經(jīng)保護(hù)作用由MCPIP1介導(dǎo)完成。結(jié)論:1.蜂毒肽能夠促進(jìn)局灶性腦缺血小鼠的神經(jīng)功能恢復(fù),減小腦梗死體積,減輕腦組織水腫,促進(jìn)缺血腦組織的血流恢復(fù),并且能夠抑制缺血腦組織織炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα和TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)因子的表達(dá),促進(jìn)抗炎因子MCPIP1的表達(dá),具有抗炎癥損傷和神經(jīng)保護(hù)作用。2.蜂毒肽能夠抑制LPS誘導(dǎo)的BV2細(xì)胞中炎性因子IL-1β、IL-6、TNFα、以及TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路各關(guān)鍵因子的基因及蛋白水平的增加,以及抑制NF-κB向細(xì)胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)移,能夠降低BV2炎性代謝產(chǎn)物對神經(jīng)元的毒性,說明蜂毒肽很可能是通過抗炎癥反應(yīng)活性而發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用的。3.蜂毒肽能夠誘導(dǎo)MCPIP1在小鼠腦組織中和BV2小膠質(zhì)細(xì)胞中在腦缺血和炎性損傷過程中的持續(xù)表達(dá),且在炎癥損傷BV2細(xì)胞中MCPIP1功能缺失后,蜂毒肽處理對炎癥相關(guān)因子IL-1β、IL-6、TNFα以及TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路的抑制作用減弱,說明蜂毒肽的抗炎活性是通過MCPIP1介導(dǎo),從而抑制TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)而發(fā)揮作用的。
【圖文】：

圖 1.蜂毒肽對局灶性腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用Fig.1 Neuroprotective effects of melittin on focal cerebral ischemia(A) The changes of body weight were monitored during the whole experiment procedure(n=12).mNSS assessment (B) and Rota-rod test (C) were performed at indicated time pointsto evaluate neurological deficit (n=12,*P＜0.05,**P＜0.01). (D, E) Representative imagesof brain slices stained with TTC on 72h were displayed, and infarct volume was comparedbetween MEL-treated mice (0.4μg/g MEL) versus vehicle-treated mice (n=6,*P＜0.05,**P＜0.01). (F) Effect of melittin (0.4μg/g) on brain edema in ischemic hemisphere (n = 6,vehicle vs. Sham:#P＜0.05,##P＜0.01; MEL vs. vehicle:*P＜0.05).

圖 2.蜂毒肽對局灶性腦缺血小鼠腦血流的影響Fig.2 Melittin improves cerebral reperfusion after ischemia injury(A) CBF was examined with 2-dimensional laser speckle imaging at indicated time points.(B) Representative recordings of CBF in a vehicle-treated mouse before and immediatelyafter dMCAO. Inserted image shows two recording areas in the infarct region (red) and thecontralateral side (blue). (C,D) CBF was quantified and expressed as percentage changefrom baseline (MELvs. Vehicle group: *P＜0.05).
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R743.3

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6 李開誠;陳軍;;蜜蜂毒肽通過激活外周辣椒素受體誘致持續(xù)性自發(fā)痛和熱痛敏[A];中國生理學(xué)會(huì)第六屆全國青年生理學(xué)工作者學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要[C];2003年

7 于耀清;陳軍;;神經(jīng)源性成分對皮下注射蜜蜂毒肽誘發(fā)的局部炎癥的貢獻(xiàn)[A];中國神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)第六屆學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)會(huì)成立十周年慶祝大會(huì)論文摘要匯編[C];2005年

8 楊申;張雪梅;陸利民;江明華;;蜂毒肽對心肌Na~+,K~+-ATP酶活性及基因表達(dá)的影響[A];第七屆全國生化藥理學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2000年

9 謝小燕;程通;管寶全;張軍;夏寧邵;;昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)分泌型表達(dá)載體的構(gòu)建和初步應(yīng)用[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2001年

10 楊文超;田媛媛;張中印;吳珍紅;繆曉青;;蜂毒肽及蜂毒制劑神蜂精對受照射小鼠存活率的影響[A];第四屆中國畜牧科技論壇論文集[C];2009年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前2條

1 劉道安;合成蜂毒肽抗“類風(fēng)濕”[N];健康報(bào);2005年

2 曉暉;蜂毒的現(xiàn)代藥理研究與臨床應(yīng)用[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前7條

1 邢星;蜂毒肽對腦缺血炎癥損傷的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2018年

2 陳亞寧;蜜蜂毒肽能成分的提純及其生物學(xué)功能的鑒定[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2006年

3 費(fèi)丹;特異性抗體介導(dǎo)的蜂毒肽對骨肉瘤的抑制作用[D];吉林大學(xué);2014年

4 李晶華;基于蜂毒肽的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎基因治療研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2010年

5 黃川;可系統(tǒng)性給藥的蜂毒肽脂質(zhì)納米顆粒及其抗黑色素瘤作用研究[D];華中科技大學(xué);2015年

6 楊曦;乏氧誘導(dǎo)因子-1α抑制劑鹽酸小檗堿和蜂毒肽對乏氧腫瘤細(xì)胞放射敏感性的影響及機(jī)制研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

7 朱文赫;重組導(dǎo)向毒素DLM表達(dá)、抗腫瘤活性及作用機(jī)制的初步研究[D];吉林大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 楊文超;蜂毒肽的分離純化及其抗輻射作用機(jī)理研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2007年

2 楊光勇;抗IL-4R單鏈抗體制備及其與蜂毒肽的融合蛋白的構(gòu)建、表達(dá)與純化[D];貴陽中醫(yī)學(xué)院;2016年

3 邵光燦;蜂毒肽與基因變構(gòu)IL-2融合蛋白在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)及生物學(xué)活性研究[D];青島大學(xué);2015年

4 楊小浪;基于介孔硅的蜂毒肽控制釋放研究[D];福建農(nóng)林大學(xué);2014年

5 王宏亮;蜂毒肽對玉米植生效應(yīng)的研究[D];遼寧師范大學(xué);2014年

6 郭毅斌;蜂毒肽MP-1抗菌/抗內(nèi)毒素作用的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2004年

7 葉雨辰;蜂毒肽抑制終板軟骨細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)的相關(guān)性研究[D];蚌埠醫(yī)學(xué)院;2017年

8 鄭旭;蜂毒素與基因變構(gòu)人白細(xì)胞介素-2融合基因的原核質(zhì)粒構(gòu)建、表達(dá)、純化及活性測定[D];青島大學(xué);2009年

9 毛兵;高速逆流色譜法分離制備蜂毒肽[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2008年

10 潘凌子;蜂毒肽的抑菌作用及其基因表達(dá)研究[D];遼寧師范大學(xué);2007年

本文編號(hào)：2631347