【摘要】：目的:探討沉默長(zhǎng)鏈非編碼RNA-HOTAIR對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響及其相關(guān)機(jī)制,進(jìn)一步明確腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展,為腦膠質(zhì)瘤的治療開辟新道路。方法:將U251人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞分組成空白對(duì)照組(control),陰性對(duì)照組(sh-NC)及實(shí)驗(yàn)組(sh-HOTAIR),培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,依次應(yīng)用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況;利用qRT-PCR檢測(cè)HOTAIR mRNA表達(dá)水平;采用磷酯酰絲氨酸聯(lián)絡(luò)蛋白-異硫氫酸熒光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)雙標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況;應(yīng)用Transwell體外侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力;利用蛋白免疫印跡法(WesternBlot)檢測(cè)各組凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,侵襲相關(guān)蛋白MMP-2,促凋亡蛋白Bax,PI3K/Akt信號(hào)通路重要蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)的表達(dá)水平。結(jié)果:MTT結(jié)果提示,人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251轉(zhuǎn)染shRNA-HOTAIR增值率低于對(duì)照組(P0.05),qRT-PCR檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染shRNA-HOTAIR后HOTAIR mRNA表達(dá)較對(duì)照組明顯下調(diào)(P0.05),流式細(xì)胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示shRNA-HOTAIR可以降低細(xì)胞凋亡率(P0.05),WesternBlot結(jié)果提示shRNA-HOTAIR可以降低細(xì)胞P-Akt、Bcl-2、MMP-2,增加Bax的表達(dá)程度。結(jié)論:沉默LncRNA-HOTAIR可抑制細(xì)胞增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,降低細(xì)胞侵襲,其分子機(jī)制可能與活化PI3K/AKT信號(hào)通路有關(guān)。
【圖文】：

圖１邋各組ＨＯＴＡ丨Ｒ邋ｍＲＮＡ的表達(dá)水平．逡逑

結(jié)果顯示與ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ｓｈ－ＨＯＴＡＩＲ組細(xì)胞凋亡百分比顯著X椉渝義希ǎ保叮罰擔(dān)ィ觶螅常埃擔(dān)保�，邋Ｐ［E埃埃擔(dān)�，即邋ｓｈ－｝x希裕粒桑義宕俳澹眨玻擔(dān)卞逑赴蟯觶鉅煊型沖義霞蒲б庖澹ǎ校

本文編號(hào)：2626005