【摘要】：目的:探討沉默長鏈非編碼RNA-HOTAIR對腦膠質(zhì)瘤U251細胞惡性生物學(xué)行為的影響及其相關(guān)機制,進一步明確腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展,為腦膠質(zhì)瘤的治療開辟新道路。方法:將U251人腦膠質(zhì)瘤細胞分組成空白對照組(control),陰性對照組(sh-NC)及實驗組(sh-HOTAIR),培養(yǎng)至對數(shù)生長期,依次應(yīng)用MTT法檢測細胞增殖情況;利用qRT-PCR檢測HOTAIR mRNA表達水平;采用磷酯酰絲氨酸聯(lián)絡(luò)蛋白-異硫氫酸熒光素/碘化丙啶(AnnexinV-FITC/PI)雙標(biāo)記流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況;應(yīng)用Transwell體外侵襲實驗檢測細胞的侵襲能力;利用蛋白免疫印跡法(WesternBlot)檢測各組凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,侵襲相關(guān)蛋白MMP-2,促凋亡蛋白Bax,PI3K/Akt信號通路重要蛋白蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(P-Akt)的表達水平。結(jié)果:MTT結(jié)果提示,人腦膠質(zhì)瘤細胞U251轉(zhuǎn)染shRNA-HOTAIR增值率低于對照組(P0.05),qRT-PCR檢測細胞轉(zhuǎn)染shRNA-HOTAIR后HOTAIR mRNA表達較對照組明顯下調(diào)(P0.05),流式細胞術(shù)數(shù)據(jù)顯示shRNA-HOTAIR可以降低細胞凋亡率(P0.05),WesternBlot結(jié)果提示shRNA-HOTAIR可以降低細胞P-Akt、Bcl-2、MMP-2,增加Bax的表達程度。結(jié)論:沉默LncRNA-HOTAIR可抑制細胞增殖,促進細胞凋亡,降低細胞侵襲,其分子機制可能與活化PI3K/AKT信號通路有關(guān)。
【圖文】：

圖１邋各組ＨＯＴＡ丨Ｒ邋ｍＲＮＡ的表達水平．逡逑

結(jié)果顯示與ｃｏｎｔｒｏｌ組相比，ｓｈ－ＨＯＴＡＩＲ組細胞凋亡百分比顯著X椉渝義希ǎ保叮罰擔(dān)ィ觶螅常埃擔(dān)保�，邋Ｐ［E埃埃擔(dān)�，即邋ｓｈ－｝x希裕粒桑義宕俳澹眨玻擔(dān)卞逑赴蟯觶鉅煊型沖義霞蒲б庖澹ǎ校

本文編號：2626005