【摘要】：目的探討M型鉀離子通道開放劑瑞替加濱(Retigabine,RTG)對大鼠腦梗死缺血再灌注損傷的腦保護作用。方法采用雄性SD大鼠為研究對象,選取90只,年齡8周齡,體重240~260g。通過線栓法暫時造成大鼠右側頸總動脈/大腦中動脈閉塞(MCAO)誘發(fā)梗死灶。SD大鼠共分為6組:假手術(Sham)組、模型對照(MCAO)組、RTG0h治療組、RTG1h治療組、RTG3h治療組和RTG6h治療組。Sham組將大鼠麻醉后,只將其右側大腦中動脈分離,不插入線栓,經尾靜脈給與等量的生理鹽水。MCAO組將大鼠麻醉后,將線栓插入右側大腦中動脈,堵塞血管,60min后拔出線栓,恢復血流,制備大鼠右側大腦中動脈阻塞模型。RTG治療組大鼠在成功制備MCAO模型后,分別在再灌注后0h、1h、3h及6h經尾靜脈注射M型鉀離子通道開放劑瑞替加濱(10mg/kg)。在局部缺血和再灌注的第一個小時期間,通過加熱墊將大鼠核心體溫維持在37℃。在給藥處理24小時后對各組大鼠進行神經功能評分,TTC染色檢測腦梗死面積,免疫組化染色檢測缺血半影區(qū)星形膠質細胞數量、凋亡細胞的數量以及腦梗死皮質區(qū)神經元的密度,western blot檢測缺血半影區(qū)小膠質細胞的數量。結果1神經功能缺損評分及腦梗死面積:假手術組大鼠腦組織未發(fā)現腦梗死病灶,神經功能正常。MCAO組及RTG治療組大鼠右側大腦中動脈供血區(qū)域可見不同程度的腦梗死病灶,同時各組大鼠左側肢體出現不同程度的神經功能缺損癥狀。與MCAO組比較,RTG治療組腦梗死面積與Longa評分明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與RTG6h治療組比較,RTG0h治療組、RTG1h治療組及RTG3h治療組大鼠腦梗死面積及神經功能缺損評分降低更為明顯,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2 HE染色:Sham組大鼠海馬CA1區(qū)神經元無水腫,形態(tài)正常,細胞排列緊密。MCAO組及RTG治療組大鼠海馬CA1區(qū)神經元出現明顯的水腫與壞死,但是在RTG治療組中,各組大鼠神經細胞的損傷明顯減輕。3免疫組化染色:Sham組大鼠缺血半影區(qū)GFAP陽性細胞和caspase-3陽性細胞少見,皮質區(qū)神經元排列致密。在MCAO組及RTG治療組中,缺血半影區(qū)GFAP陽性細胞和caspase-3陽性細胞數量明顯增加,梗死皮質區(qū)Neun陽性細胞數量明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與MCAO組比較,RTG治療組大鼠缺血半影區(qū)GFAP陽性細胞和caspase-3陽性細胞數量明顯減少,梗死皮質區(qū)Neun陽性細胞數量明顯增多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與RTG6h治療組比較,RTG0h治療組、RTG1h治療組及RTG3h治療組缺血半影區(qū)GFAP陽性細胞和caspase-3陽性細胞數量明顯減少,梗死皮質區(qū)Neun陽性細胞數量明顯增多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 Western blot:Sham組大鼠缺血半影區(qū)無CD11b蛋白表達,在MCAO組及RTG治療組中,缺血半影區(qū)CD11b蛋白的表達明顯增加,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與MCAO組比較,RTG治療組大鼠缺血半影區(qū)CD11b蛋白表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與RTG6h治療組比較,RTG0h治療組及RTG3h治療組大鼠缺血半影區(qū)CD11b蛋白的表達明顯減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1 M型鉀離子通道開放劑能夠減少大鼠腦梗死面積及神經功能缺損評分,減輕缺血半影區(qū)星形膠質細胞及小膠質細胞的增殖與活化,同時減少缺血半影區(qū)神經細胞的凋亡。2在缺血再灌注后6h給藥,M型鉀離子通道開放劑對大鼠腦缺血再灌注損傷的腦保護會減弱。
【圖文】：

無壞死。在模型對照組及RTG治療組中，神經細胞不同程度發(fā)生壞死，細胞水腫，，細胞排列紊亂，細胞核深染、破碎。但是RTG各治療組海馬CA1 區(qū)神經細胞的水腫及壞死較MCAO組減輕（見圖1）。

各治療組大鼠梗死周圍區(qū)星形膠質細胞數增殖明顯減少，且形態(tài)變化小，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。與RTG6h給藥組相比，RTG0h給藥組、RTG1h給藥組及RTG3h給藥組星形膠質細胞數明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），（見圖2，表2）。結果提示M型鉀離子通道開放劑能夠抑制腦梗死缺血再灌注損傷大鼠梗死周圍區(qū)星形膠質細胞的增殖與活化，并且，當在再灌注后6h給藥，這種治療作用會減弱。
【學位授予單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R743.3

【參考文獻】

相關期刊論文 前4條

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相關博士學位論文 前1條

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相關碩士學位論文 前4條

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本文編號：2622822