【摘要】：目的 1、建立大鼠蛛網膜下腔出血模型，靜脈給予外源性CD4+CD25+調節(jié)性T細胞，探討腦組織炎性細胞浸潤的變化。 2、觀察CD4+CD25+調節(jié)性T細胞靜脈輸注治療后蛛網膜下腔出血大鼠模型腦組織中TLR4、NF-κB，以及血漿中相關炎性因子表達的變化，探討CD4+CD25+調節(jié)性T細胞對蛛網膜下腔出血后炎癥反應的抑制作用。 方法 1、用免疫磁珠兩步法，從大鼠的脾臟及淋巴結中分離、獲取高純度的調節(jié)性T細胞。枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型。隨機將健康成年雄性wister大鼠隨機分為正常組、假手術組、SAH組，SAH組分為靜脈PBS輸注組（PBS組）、脾細胞（spleencells，SP）輸注組和Treg輸注組。于術后2天斷頭取腦，免疫組化法檢測腦組織中的炎性細胞浸潤情況。 2、選用成年健康的雄性wister大鼠，枕大池二次注血法制作大鼠蛛網膜下腔出血模型。隨機將動物分為正常組、假手術組、蛛網膜下腔出血組（SAH組），蛛網膜下腔出血組分為靜脈PBS輸注組、脾細胞（spleencells，SP）輸注組和Treg輸注組。術后第2天斷頭取腦，由股靜脈留取靜脈血，免疫組化法檢測腦組織中TLR4的表達，westernbolt法檢測腦組織中TLR4、NF-κB蛋白水平，ELISA法檢測外周血中炎性細胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平的變化。 結果 與假手術組相比，SAH后腦組織中性粒細胞浸潤明顯增多，TLR4表達也有明顯升高。同時，SAH組NF-κB表達水平顯著增高。血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6表達顯著增高。與PBS治療組和SP治療組相比，Treg治療組腦組織中TLR4，NF-κB水平顯著降低，，血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6表達也降低（P0.05）。 結論 SAH早期出現腦血管痙攣及腦損傷后，炎性因子、NF-κB的表達與TLR4有關。TLR4在腦室周圍的血管叢中表達較多，在小膠質、星形膠質細胞，少量分布于腦血管內的內皮細胞和平滑肌細胞。TLR4/NF-κB信號通路被激活進而導致的炎癥反應在SAH后的腦血管痙攣及早期腦損傷的發(fā)生過程中發(fā)揮重要作用。Treg治療SAH后，腦組織中的TLR4、NF-κB以及血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6炎性因子表達水平顯著降低。表明Treg能較好的限制SAH后中樞神經系統(tǒng)的炎癥反應，從而減輕SAH造成的腦組織損傷。
【圖文】：

圖 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂圖 1-2 SAH 大鼠顱底部溶血物覆蓋圖 1-3CD4+CD25+Treg 細胞流式檢測結果圖 1-4 擴增后 Treg 細胞流式檢測結果

圖 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂圖 1-2 SAH 大鼠顱底部溶血物覆蓋圖 1-3CD4+CD25+Treg 細胞流式檢測結果圖 1-4 擴增后 Treg 細胞流式檢測結果
【學位授予單位】：泰山醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R743.35

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本文編號：2571400