【摘要】：目的 1、建立大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型，靜脈給予外源性CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，探討腦組織炎性細(xì)胞浸潤(rùn)的變化。 2、觀察CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞靜脈輸注治療后蛛網(wǎng)膜下腔出血大鼠模型腦組織中TLR4、NF-κB，以及血漿中相關(guān)炎性因子表達(dá)的變化，探討CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞對(duì)蛛網(wǎng)膜下腔出血后炎癥反應(yīng)的抑制作用。 方法 1、用免疫磁珠兩步法，從大鼠的脾臟及淋巴結(jié)中分離、獲取高純度的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。枕大池二次注血法制作SAH大鼠模型。隨機(jī)將健康成年雄性wister大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、SAH組，SAH組分為靜脈PBS輸注組（PBS組）、脾細(xì)胞（spleencells，SP）輸注組和Treg輸注組。于術(shù)后2天斷頭取腦，免疫組化法檢測(cè)腦組織中的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況。 2、選用成年健康的雄性wister大鼠，枕大池二次注血法制作大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血模型。隨機(jī)將動(dòng)物分為正常組、假手術(shù)組、蛛網(wǎng)膜下腔出血組（SAH組），蛛網(wǎng)膜下腔出血組分為靜脈PBS輸注組、脾細(xì)胞（spleencells，SP）輸注組和Treg輸注組。術(shù)后第2天斷頭取腦，由股靜脈留取靜脈血，免疫組化法檢測(cè)腦組織中TLR4的表達(dá)，westernbolt法檢測(cè)腦組織中TLR4、NF-κB蛋白水平，ELISA法檢測(cè)外周血中炎性細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、IL-6水平的變化。 結(jié)果 與假手術(shù)組相比，SAH后腦組織中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)明顯增多，TLR4表達(dá)也有明顯升高。同時(shí)，SAH組NF-κB表達(dá)水平顯著增高。血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6表達(dá)顯著增高。與PBS治療組和SP治療組相比，Treg治療組腦組織中TLR4，NF-κB水平顯著降低，，血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6表達(dá)也降低（P0.05）。 結(jié)論 SAH早期出現(xiàn)腦血管痙攣及腦損傷后，炎性因子、NF-κB的表達(dá)與TLR4有關(guān)。TLR4在腦室周圍的血管叢中表達(dá)較多，在小膠質(zhì)、星形膠質(zhì)細(xì)胞，少量分布于腦血管內(nèi)的內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞。TLR4/NF-κB信號(hào)通路被激活進(jìn)而導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)在SAH后的腦血管痙攣及早期腦損傷的發(fā)生過(guò)程中發(fā)揮重要作用。Treg治療SAH后，腦組織中的TLR4、NF-κB以及血漿中IL-1β、TNF-α、IL-6炎性因子表達(dá)水平顯著降低。表明Treg能較好的限制SAH后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)，從而減輕SAH造成的腦組織損傷。
【圖文】：

圖 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂圖 1-2 SAH 大鼠顱底部溶血物覆蓋圖 1-3CD4+CD25+Treg 細(xì)胞流式檢測(cè)結(jié)果圖 1-4 擴(kuò)增后 Treg 細(xì)胞流式檢測(cè)結(jié)果

圖 1-1 SAH 大鼠眼角、鼻周血痂圖 1-2 SAH 大鼠顱底部溶血物覆蓋圖 1-3CD4+CD25+Treg 細(xì)胞流式檢測(cè)結(jié)果圖 1-4 擴(kuò)增后 Treg 細(xì)胞流式檢測(cè)結(jié)果
【學(xué)位授予單位】：泰山醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R743.35

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本文編號(hào)：2571400