【摘要】：目的:構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs),獲得GFP標(biāo)記的MSCs源性的外泌體(exosomes)。方法:全基因合成CD63序列,連接到穿梭載體,酶切驗證后轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,測定病毒滴度后感染MSCs,72 h后用嘌呤霉素篩選穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞。熒光定量PCR檢測CD63在MSCs中的表達(dá)。取其無血清培養(yǎng)72 h的上清液,獲得提取物,經(jīng)透射電鏡和Western Blot驗證。結(jié)果:提取物為類圓形囊泡,大小約為40~100 nm,具有CD63和Alix表達(dá)。結(jié)論:成功構(gòu)建攜帶GFP標(biāo)記的MSCs源性的外泌體,為研究外泌體在細(xì)胞中的攝取及信號傳遞提供了工具。

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1 秦星;張建軍;陳萬濤;;外泌體在腫瘤微環(huán)境中調(diào)控作用的研究進(jìn)展[J];口腔醫(yī)學(xué);2014年03期

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本文編號：2560062