【摘要】：目的:在大鼠腦缺血再灌注(IR)模型中,觀察平衡型核苷轉(zhuǎn)運體-1(ENT1)在大鼠腦組織的表達情況,并探討ENT1抑制劑硝基苯硫嘌呤核苷(NBTI)對大鼠神經(jīng)功能缺損程度和腦梗死體積的影響。方法:雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為正常組、假手術(shù)組、模型組(3h,6h,24h,72h,1w五個時間點)、硝基苯硫嘌呤核苷(NBTI)組(即ENT1抑制劑組)及二甲基亞砜(DMSO)組。應(yīng)用大腦中動脈阻塞法(MCAO)建立大鼠腦缺血再灌注模型,免疫組織化學、免疫熒光雙重標記技術(shù)及蛋白印跡實驗檢測各組別中ENT1的表達情況,Zea-Longa評分評估大鼠神經(jīng)功能缺損程度,TTC染色測定大鼠腦組織梗死體積。結(jié)果:1、蛋白印跡實驗結(jié)果示:在正常組及假手術(shù)組大鼠腦組織中ENT1有基礎(chǔ)水平表達。在大鼠腦缺血再灌注模型腦組織中,再灌注3h ENT1表達量較正常組及假手術(shù)組下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。隨著再灌注時間的延長,ENT1表達出現(xiàn)波動,于再灌注6h和24h表達回升,24h時ENT1表達回到基線水平,與正常組及假手術(shù)組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。而在再灌注72h及1w,ENT1表達再次下降,與正常組及假手術(shù)組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。2、免疫組織化學結(jié)果示:ENT1在大鼠海馬CA3區(qū)有廣泛表達,進一步用免疫熒光雙重標記發(fā)現(xiàn)ENT1在大鼠海馬CA3區(qū)的星形膠質(zhì)細胞及神經(jīng)元樣細胞的胞膜上及胞漿內(nèi)均有表達。3、神經(jīng)功能缺損評分結(jié)果示:正常組、假手術(shù)組、模型3h組、模型6h組、模型24h組、模型72h組、模型1W組、NBTI組及DMSO組神經(jīng)功能缺損評分分別為(分)(0)、(0)、(2.42±0.51)、(2.50±0.52)、(2.67±0.49)、(2.58±0.51)、(2.42±0.51)、(2.20±0.45)、(2.60±0.55)。大鼠腦缺血再灌注模型各亞組、DMSO組大鼠均可見不同程度神經(jīng)功能缺損癥狀,但其Zea-Longa評分相比,差異無顯著性(P0.05)。應(yīng)用NBTI干預(yù)后,NBTI可顯著降低大鼠神經(jīng)功能缺損評分,與模型組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05);DMSO對大鼠神經(jīng)功能缺損評分沒有影響,與模型組比較,差異無顯著性(P0.05)。4、TTC染色檢測結(jié)果示:正常組、假手術(shù)組、模型3h組、模型6h組、模型24h組、模型72h組、模型1W組、NBTI組及DMSO組的腦梗死體積百分比分別為(%)(0)、(0)、(52.84±6.95)、(45.80±3.15)、(45.41±14.65)、(49.72±4.31)、(51.69±5.55)、(18.00±3.09)、(50.66±7.47)。正常組及假手術(shù)組中均未見梗死灶,其余組別中均可見梗死灶,且腦梗死體積各組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。應(yīng)用NBTI干預(yù)后,NBTI可顯著減小大鼠腦梗死體積,與模型組比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。DMSO對大鼠腦梗死體積沒有影響,與模型組比較,差異無顯著性(P0.05)。結(jié)論:在腦缺血再灌注后,大鼠腦組織中ENT1表達降低,并且應(yīng)用ENT1抑制劑NBTI干預(yù)后可降低大鼠神經(jīng)功能缺損評分及減小大鼠腦梗死體積,提示ENT1可能參與了腦缺血再灌注后腦組織保護作用。
【學位授予單位】：遵義醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：R743.3

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本文編號：2559720