【摘要】：目的:為探討Sonic Hedgehog(Shh)信號通路激活劑,2,6,9-三取代嘌呤化合物(purmorphamine,PM)對帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型動物中小鼠身體的協(xié)調(diào)能力、多巴胺能神經(jīng)元及小膠質(zhì)細胞細胞活性的影響及可能機制。方法:將47只C57BL/6J雄性8周小鼠隨機分為control組、PM組、MPTP組、PM+MPTP組,使用腹腔注射1-methyl-4-phenyl 1,2,3,6-tet-rahydropyridine(MPTP)制作小鼠的帕金森病模型。應(yīng)用懸桿實驗、免疫組織化學(xué)和實時熒光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)技術(shù)分別檢測小鼠的運動協(xié)調(diào)能力,酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase,TH)陽性的多巴胺(DA)能神經(jīng)元的形態(tài)、數(shù)目,Ionized calcium binding adapter molecule 1(Iba1)陽性的小膠質(zhì)細胞的形態(tài)以及炎癥因子TNF-α的表達情況。結(jié)果:(1)懸桿實驗顯示:在預(yù)處理PM 24 h后MPTP誘導(dǎo)的PD模型小鼠中,與MPTP組相比,PM+MPTP組小鼠后爪抓到橫桿的時間明顯縮短(P0.01);而與control組相比,MPTP組中小鼠后爪抓到橫桿的時間顯著延長(P0.01)。(2)TH免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:control組TH+DA能神經(jīng)元染色很深,胞體密集,突起明顯;與control組相比,MPTP組TH+DA能神經(jīng)元的數(shù)量明顯減少,細胞質(zhì)著色變淺,突起變短或者消失(P0.01);與MPTP組相比,PM+MPTP組TH+DA能神經(jīng)元不僅使損失細胞的數(shù)目明顯減少,而且細胞質(zhì)染色變深,突起有所增多(P0.01)。(3)Iba1免疫組織化學(xué)染色顯示:與control相比,MPTP組小膠質(zhì)細胞變大、形態(tài)不規(guī)則、突起變粗;與MPTP組相比,PM+MPTP組小膠質(zhì)細的胞體形態(tài)較小,突起呈現(xiàn)細長較多。(4)Q-PCR檢測結(jié)果顯示:與control組相比,MPTP組TNF-α和Iba1mRNA表達明顯增加(P0.01);與MPTP組對比,PM+MPTP組表達的TNF-α和Iba1 mRNA水平明顯降低(P0.01)。結(jié)論:PM可改善PD模型小鼠的運動協(xié)調(diào)能力,保護多巴胺能神經(jīng)元,其機制可能與降低小膠質(zhì)細胞的炎癥水平有關(guān)。

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