CLDN 15在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后Wallerian潰變?cè)缙诘淖饔醚芯?/H1>
發(fā)布時(shí)間：2019-09-25 02:14
【摘要】：目的在周圍神經(jīng)損傷修復(fù)過程中,雪旺細(xì)胞(SCs)分泌多種細(xì)胞因子參與修復(fù)和再生過程,為神經(jīng)再生提供良好的微環(huán)境�；诨蛐酒偷鞍仔酒治鼋Y(jié)果,claudin 15(CLDN 15)在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后早期的信號(hào)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中起核心作用。本實(shí)驗(yàn)旨在研究CLDN 15在Wallerian潰變?cè)缙趯?duì)SCs的功能的影響,并探索其調(diào)控周圍神經(jīng)損傷與修復(fù)的分子機(jī)制,為神經(jīng)再生修復(fù)提供更多的理論基礎(chǔ)。方法1.構(gòu)建大鼠坐骨神經(jīng)橫斷損傷模型;2.IHC、ICC分析CLDN 15定位;3.CLDN 15 si RNA和過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染體外SCs;4.Real-time PCR分析;5.Western Blot分析;6.Ed U增殖、Annexin V凋亡和Transwell小室遷移分析;7.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)都用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±SD)表示,同時(shí)進(jìn)行方差分析,認(rèn)為p0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.IHC和ICC結(jié)果顯示在SCs中CLDN 15和S100B共定位;2.大鼠坐骨神經(jīng)橫斷后,在Wallerian潰變?cè)缙?CLDN 15在神經(jīng)遠(yuǎn)端表達(dá)升高;3.CLDN 15 si RNA干擾后SCs的增殖數(shù)目增多,凋亡數(shù)目減少;4.CLDN 15質(zhì)粒過表達(dá)后SCs的增殖數(shù)目減少,凋亡數(shù)目增多;5.CLDN 15干擾和過表達(dá)之后,相關(guān)基因差異表達(dá);6.CLDN 15干擾和過表達(dá)后相關(guān)通路蛋白變化:p-AKT/AKT、p-ERK/ERK、β-catenin通路沒有差異,p-c-jun/c-jun通路發(fā)生顯著性變化,c-fos和PKCα通路只在過表達(dá)實(shí)驗(yàn)中發(fā)生顯著變化。結(jié)論1.SCs的細(xì)胞膜上表達(dá)CLDN 15。2.CLDN 15可以抑制體外培養(yǎng)SCs的增殖,而促進(jìn)SCs的凋亡,但對(duì)SCs的遷移功能沒有顯著作用。3.CLDN 15可能通過c-jun通路調(diào)節(jié)SCs的功能,CLDN 15還可能調(diào)節(jié)c-fos和PKCα通路。
【圖文】：
19圖 1 大鼠坐骨神經(jīng)損傷遠(yuǎn)端的免疫熒光雙標(biāo)。如圖分別示坐骨神經(jīng)損傷后 0 h、1 h、6 h、12 h、24 h 的免疫熒光雙標(biāo)。紅色熒光表示 CLDN15 蛋白表達(dá)，綠色熒光表示成髓鞘 SCs 的特異性標(biāo)記 S100B，Merge 代表兩者重合部分。Bar=20 μm。
通大學(xué)碩士學(xué)位論文3.2 坐骨神經(jīng)遠(yuǎn)端 CLDN 15 的表達(dá)情況我們運(yùn)用 Real-time PCR（圖 2 A）和 Western Blot（圖 2 B）分析 CLDN 15坐骨神經(jīng)遠(yuǎn)端各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)情況。結(jié)果顯示，在 Wallerian 潰變?cè)缙�，坐神�?jīng)遠(yuǎn)端的 CLDN 15 基因和蛋白表達(dá)均上升，與組織免疫熒光和基因及蛋白片的分析結(jié)果一致。
【學(xué)位授予單位】：南通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R745
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本文編號(hào)：2541176
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【圖文】：
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5 孟浩;光化學(xué)技術(shù)在大鼠坐骨神經(jīng)損傷組織工程修復(fù)中的應(yīng)用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年
6 張為眾;小分子化合物丙戊酸促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)再生的研究[D];吉林大學(xué);2006年
7 李沫;預(yù)防大鼠坐骨神經(jīng)修復(fù)中瘢痕粘連及促進(jìn)神經(jīng)再生的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年
8 李瓦里;明膠酶在大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷后的原位酶譜表達(dá)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2009年
9 宋永周;組織工程神經(jīng)修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2009年
10 高嵩濤;組織工程化周圍神經(jīng)修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2007年
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1 劉沖;鈣通道阻滯劑對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷后神經(jīng)瘢痕形成的影響[D];河北大學(xué);2015年
2 劉義;慢病毒介導(dǎo)的CDNF對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)再生和功能恢復(fù)的作用研究[D];山東大學(xué);2015年
3 成興海;Jab1與p27kip1在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后的表達(dá)變化及意義[D];南通大學(xué);2014年
4 張平安;TGF-β1在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后Wallerian潰變過程中的作用研究[D];南通大學(xué);2014年
5 李沿江;川芎嗪預(yù)處理促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)異體移植后神經(jīng)再生[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年
6 張鈺;外周血單個(gè)核細(xì)胞對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)離斷吻合后修復(fù)與再生的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年
7 彭晴;淫羊藿次苷Ⅱ?qū)Υ笫笞巧窠?jīng)損傷后神經(jīng)再生和Tau蛋白表達(dá)的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2016年
8 賀菊芳;分泌VEGF_(165)的NSCs協(xié)同鼠胎膜移植治療大鼠坐骨神經(jīng)損傷的前期研究[D];貴州醫(yī)科大學(xué);2016年
9 李懷芹;CLDN 15在大鼠坐骨神經(jīng)損傷后Wallerian潰變?cè)缙诘淖饔醚芯縖D];南通大學(xué);2015年
10 李松;660nm紅光對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)鉗壓損傷的治療修復(fù)作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年
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