【摘要】：目的:初步探討運動訓練促進實驗性腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠運動能力恢復的可能機制及不同時間窗介入運動訓練對實驗性腦出血大鼠功能可塑性及細胞凋亡的影響,為臨床腦出血患者運動訓練介入時間提供指導。方法:1、造模和干預方法:向大鼠尾狀核內注射Ⅰ型膠原酶+肝素鈉制作腦出血模型,而對照組注入等體積生理鹽水,造模后采用神經功能缺損評分標準(Modified Neurological Severity Scores,m NSS)及micro PET/CT對模型進行評價。根據造模成功后運動訓練開始的時間不同將運動訓練干預的大鼠分為24小時(24h)組、3天(3d)組、7天(7d)組,每組運動訓練干預3周,對照組及模型組不予任何治療。2、觀察指標:(1)訓練結束后分別對各組大鼠進行轉棒行走評分、平衡木行走評分及網屏實驗評分,觀察各組大鼠運動功能的變化;(2)采用HE染色法觀察大鼠腦出血區(qū)域組織病理學改變,免疫組化法檢測大鼠腦出血區(qū)域周圍皮層腦源性神經營養(yǎng)因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)及白介素-10(Interleukin 10,IL-10)的表達;(3)采用RT-PCR法檢測大鼠腦出血區(qū)域周圍皮層Bcl-2 mRNA及Bax mRNA的表達。3、統計學處理:統計學分析采用IBM SPSS Statitistics 17.0軟件進行。數據以均數±標準差(喁±s)形式表示,各組的IL-10及BDNF的平均光密度值的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),組間兩兩比較采用SLD-t檢驗;各組Bax mRNA、Bcl-2 mRNA灰度值及Bcl-2 mRNA/Bax mRNA灰度比值的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),組間兩兩比較采用SLD-t檢驗,以p0.05有統計學意義,p0.01具有顯著統計學意義。IL-10與BDNF的相關性及IL-10與Bcl-2的相關性分析均采用直線相關性分析進行探討。結果:1、運動功能評分:三項評分中運動訓練組均較模型組低,且3個運動訓練組與模型組比較差異均具有顯著意義(p0.05),3個運動訓練組比較相互之間無顯著差異,對照組3項運動功能評分均為正常。2、HE染色:對照組大鼠右側尾狀核神經元細胞大體形態(tài)結果完整,輪廓清晰,細胞排列整齊;模型組大鼠病灶區(qū)血腫基本消失,可見血腫吸收后留下的囊腔,病灶周圍組織疏松,可見大小不等的空泡,并伴有神經膠質細胞增生及新生血管長入;與模型組比較,24h組血腫周圍血管增生強于模型組,3d組及7d組病灶周圍血管增生較模型組及24h組更加明顯,但病灶周圍組織疏松程度較24h組有所改善,空泡明顯減少。3、BDNF蛋白的表達:3個運動訓練組BDNF蛋白表達均較模型組更高,差異均具有顯著統計學意義(p0.01);而3個運動訓練組中BDNF蛋白的表達以3d組最高,其次為24h組,最后為7d組,差異均具有顯著統計學意義(p0.01)。4、IL-10蛋白的表達:3個運動訓練組IL-10蛋白的表達均較模型組更高(p0.01),運動訓練組中以3d組表達最高,與24h組及7d組比較,差異具有顯著意義(p0.01),但24h組與7d組比較無顯著差異(p0.05)。5、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA的表達:(1)Bax mRNA:與模型組比較,各運動訓練組表達增加更為明顯(p0.01);運動訓練組中,7d組表達增加最為明顯(p0.05),而24h組與3d組相比無差異(p0.05)。(2)Bcl-2 mRNA:運動訓練組中24h組增高不明顯,與模型組比較差異無顯著性(p0.05),3d組及7d組較模型組有所增加(p0.05),但3個運動訓練組之間差異無顯著性(p0.05)。(3)Bcl-2 mRNA/Bax mRNA:運動訓練組較模型組增高(p0.01),運動訓練組中24h組、3d組、7d組逐漸增加,以7d組增加最為明顯,與24h組、3d組比較差異均具有顯著性(p0.05),而24h組與3d組比較差異無顯著性(p0.05)。6、相關性分析:IL-10與BDNF蛋白的表達呈正性相關關系,IL-10與bcl-2的表達呈正性相關關系。結論:1、采用膠原酶誘導法向大鼠尾狀核注射Ⅰ膠原酶+肝素鈉,能成功制作腦出血動物模型;2、運動訓練能夠降低腦出血大鼠的運動功能評分,促進血腫周圍運動皮層IL-10蛋白及BDNF蛋白的表達;3、運動訓練能有效改善腦出血大鼠的運動功能,上調Bcl-2基因的表達、下調Bax基因的表達;4、大鼠腦出血后3d開始運動訓練較24h及7d開始運動訓練更有利于出血灶周運動皮層BDNF蛋白及IL-10蛋白的表達;5、大鼠腦出血后7d開始運動訓練較24h及3d開始運動訓練更有利于抑制出血灶周運動皮層Bax基因的表達,而對Bcl-2基因表達的促進作用不明顯。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R743.34

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本文編號：2465987