【摘要】：目的:初步探討運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練促進(jìn)實(shí)驗(yàn)性腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠運(yùn)動(dòng)能力恢復(fù)的可能機(jī)制及不同時(shí)間窗介入運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠功能可塑性及細(xì)胞凋亡的影響,為臨床腦出血患者運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練介入時(shí)間提供指導(dǎo)。方法:1、造模和干預(yù)方法:向大鼠尾狀核內(nèi)注射Ⅰ型膠原酶+肝素鈉制作腦出血模型,而對(duì)照組注入等體積生理鹽水,造模后采用神經(jīng)功能缺損評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(Modified Neurological Severity Scores,m NSS)及micro PET/CT對(duì)模型進(jìn)行評(píng)價(jià)。根據(jù)造模成功后運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練開(kāi)始的時(shí)間不同將運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)的大鼠分為24小時(shí)(24h)組、3天(3d)組、7天(7d)組,每組運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練干預(yù)3周,對(duì)照組及模型組不予任何治療。2、觀察指標(biāo):(1)訓(xùn)練結(jié)束后分別對(duì)各組大鼠進(jìn)行轉(zhuǎn)棒行走評(píng)分、平衡木行走評(píng)分及網(wǎng)屏實(shí)驗(yàn)評(píng)分,觀察各組大鼠運(yùn)動(dòng)功能的變化;(2)采用HE染色法觀察大鼠腦出血區(qū)域組織病理學(xué)改變,免疫組化法檢測(cè)大鼠腦出血區(qū)域周圍皮層腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)及白介素-10(Interleukin 10,IL-10)的表達(dá);(3)采用RT-PCR法檢測(cè)大鼠腦出血區(qū)域周圍皮層Bcl-2 mRNA及Bax mRNA的表達(dá)。3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用IBM SPSS Statitistics 17.0軟件進(jìn)行。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(喁±s)形式表示,各組的IL-10及BDNF的平均光密度值的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),組間兩兩比較采用SLD-t檢驗(yàn);各組Bax mRNA、Bcl-2 mRNA灰度值及Bcl-2 mRNA/Bax mRNA灰度比值的比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA),組間兩兩比較采用SLD-t檢驗(yàn),以p0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.01具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-10與BDNF的相關(guān)性及IL-10與Bcl-2的相關(guān)性分析均采用直線相關(guān)性分析進(jìn)行探討。結(jié)果:1、運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分:三項(xiàng)評(píng)分中運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組均較模型組低,且3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組與模型組比較差異均具有顯著意義(p0.05),3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較相互之間無(wú)顯著差異,對(duì)照組3項(xiàng)運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分均為正常。2、HE染色:對(duì)照組大鼠右側(cè)尾狀核神經(jīng)元細(xì)胞大體形態(tài)結(jié)果完整,輪廓清晰,細(xì)胞排列整齊;模型組大鼠病灶區(qū)血腫基本消失,可見(jiàn)血腫吸收后留下的囊腔,病灶周圍組織疏松,可見(jiàn)大小不等的空泡,并伴有神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞增生及新生血管長(zhǎng)入;與模型組比較,24h組血腫周圍血管增生強(qiáng)于模型組,3d組及7d組病灶周圍血管增生較模型組及24h組更加明顯,但病灶周圍組織疏松程度較24h組有所改善,空泡明顯減少。3、BDNF蛋白的表達(dá):3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組BDNF蛋白表達(dá)均較模型組更高,差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01);而3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組中BDNF蛋白的表達(dá)以3d組最高,其次為24h組,最后為7d組,差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.01)。4、IL-10蛋白的表達(dá):3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組IL-10蛋白的表達(dá)均較模型組更高(p0.01),運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組中以3d組表達(dá)最高,與24h組及7d組比較,差異具有顯著意義(p0.01),但24h組與7d組比較無(wú)顯著差異(p0.05)。5、Bax mRNA、Bcl-2 mRNA的表達(dá):(1)Bax mRNA:與模型組比較,各運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組表達(dá)增加更為明顯(p0.01);運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組中,7d組表達(dá)增加最為明顯(p0.05),而24h組與3d組相比無(wú)差異(p0.05)。(2)Bcl-2 mRNA:運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組中24h組增高不明顯,與模型組比較差異無(wú)顯著性(p0.05),3d組及7d組較模型組有所增加(p0.05),但3個(gè)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組之間差異無(wú)顯著性(p0.05)。(3)Bcl-2 mRNA/Bax mRNA:運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組較模型組增高(p0.01),運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組中24h組、3d組、7d組逐漸增加,以7d組增加最為明顯,與24h組、3d組比較差異均具有顯著性(p0.05),而24h組與3d組比較差異無(wú)顯著性(p0.05)。6、相關(guān)性分析:IL-10與BDNF蛋白的表達(dá)呈正性相關(guān)關(guān)系,IL-10與bcl-2的表達(dá)呈正性相關(guān)關(guān)系。結(jié)論:1、采用膠原酶誘導(dǎo)法向大鼠尾狀核注射Ⅰ膠原酶+肝素鈉,能成功制作腦出血?jiǎng)游锬Ｐ?2、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能夠降低腦出血大鼠的運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分,促進(jìn)血腫周圍運(yùn)動(dòng)皮層IL-10蛋白及BDNF蛋白的表達(dá);3、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練能有效改善腦出血大鼠的運(yùn)動(dòng)功能,上調(diào)Bcl-2基因的表達(dá)、下調(diào)Bax基因的表達(dá);4、大鼠腦出血后3d開(kāi)始運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練較24h及7d開(kāi)始運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練更有利于出血灶周運(yùn)動(dòng)皮層BDNF蛋白及IL-10蛋白的表達(dá);5、大鼠腦出血后7d開(kāi)始運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練較24h及3d開(kāi)始運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練更有利于抑制出血灶周運(yùn)動(dòng)皮層Bax基因的表達(dá),而對(duì)Bcl-2基因表達(dá)的促進(jìn)作用不明顯。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R743.34

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本文編號(hào)：2465987