【摘要】：第一部分普拉克索誘導(dǎo)大鼠低體溫的研究目的:研究普拉克索是否具有降溫作用以及不同劑量的普拉克索誘導(dǎo)大鼠低體溫的效果。方法:將42只成年健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組,每組6只,分別接受0 mg/kg,0.125 mg/kg,0.25 mg/kg,0.5 mg/kg,1.0 mg/kg,1.5 mg/kg和2.0 mg/kg體重的普拉克索腹腔注射,持續(xù)監(jiān)測大鼠體溫變化,選擇合適的藥物濃度。結(jié)果:1.持續(xù)動物體溫檢測顯示,與0.125 mg/kg體重相比,0.25 mg/kg體重的普拉克索可以更穩(wěn)定地維持大鼠體溫在34~36℃,給藥間隔時間為8 h。2.與0.25mg/kg體重組死亡率(0%)相比,0.5 mg,1.0 mg,1.5 mg,2.0 mg/kg體重組均出現(xiàn)不同程度死亡。結(jié)論:1.多巴胺受體激動劑普拉克索可以誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生低體溫;2.0.25 mg/kg體重的普拉克索可以安全有效地誘導(dǎo)大鼠體溫在34~36℃之間第二部分普拉克索誘導(dǎo)的低體溫對大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的抑制作用目的:研究普拉克索誘導(dǎo)的低體溫對蛛網(wǎng)膜下腔出血(SAH)后早期腦損傷(EBI)的影響。方法:將30只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、SAH組以及SAH+普拉克索,SAH+普拉克索+復(fù)溫組等5組,每組6只。所有SAH大鼠經(jīng)自體股動脈抽取非肝素化動脈血注入視交叉前池,致SAH模型,在SAH后48h處死大鼠。假手術(shù)組大鼠進(jìn)行股動脈采血并予顱骨鉆孔,但未進(jìn)行注血,于處理后48h處死大鼠。此外,普拉克索處理:在SAH建模后立即接受0.25 mg/kg體重的普拉克索腹腔注射。復(fù)溫處理:進(jìn)行普拉克索腹腔注射后通過加熱毯維持大鼠體溫在37℃。各組大鼠均接受持續(xù)體溫監(jiān)測。建模后48h,大鼠安樂死,取材。首先通過TUNEL染色方法檢測腦細(xì)胞的凋亡情況;通過western blot檢測腦組織中的白蛋白含量(即白蛋白泄露)分析血腦屏障的完整性;通過行為學(xué)評分評估行為能力;分析在SAH條件下,普拉克索是否可以誘導(dǎo)體低溫,以及普拉克索對SAH引起的早期腦損傷的影響。其次,對SAH組,SAH+普拉克索以及SAH+普拉克索+復(fù)溫組進(jìn)行血腦屏障完整性和行為能力評估,分析普拉克索是否通過誘導(dǎo)低體溫發(fā)揮作用。綜上分析,在SAH條件下,普拉克索對SAH引起的早期腦損傷的影響,普拉克索是否通過誘導(dǎo)體低溫發(fā)揮作用。結(jié)果:1.持續(xù)動物體溫檢測顯示,在SAH條件下,腹腔注射0.25 mg/kg體重的普拉克索可以穩(wěn)定地維持大鼠體溫在34~36℃,給藥間隔時間為8 h。2.TUNEL染色結(jié)果顯示,正常組和假手術(shù)組中僅出現(xiàn)少量的TUNEL陽性細(xì)胞;與假手術(shù)組相比,SAH組TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量極其顯著的增多,而普拉克索誘導(dǎo)的低體溫可以有效地降低SAH引起的TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)量增多。3.Western blot檢測腦組織中白蛋白的含量,結(jié)果顯示正常組和假手術(shù)組腦組織中白蛋白含量極低,且之間沒有顯著差異;與假手術(shù)組相比,SAH組腦組織中白蛋白含量極其顯著的升高,而普拉克索誘導(dǎo)的低體溫可以有效地降低SAH引起的腦組織中白蛋白含量的升高。4,行為學(xué)評分結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,SAH組行為學(xué)能力顯著降低,而普拉克索誘導(dǎo)的低體溫可以有效緩解SAH引起的行為學(xué)能力降低。5,對SAH組,SAH+普拉克索以及SAH+普拉克索+復(fù)溫組進(jìn)行血腦屏障完整性和行為能力評估,結(jié)果顯示:SAH條件下,普拉克索對血腦屏障的保護(hù)和行為學(xué)的改善均被復(fù)溫處理顯著抑制。結(jié)論:1.SAH條件下,大鼠腦細(xì)胞凋亡和血腦屏障破壞,行為學(xué)能力下降。2.普拉克索誘導(dǎo)的低體溫可以有效地抑制SAH引起的腦細(xì)胞凋亡和血腦屏障破壞,有效改善行為學(xué)能力,發(fā)揮腦保護(hù)作用。3..復(fù)溫抑制普拉克索的腦保護(hù)作用,進(jìn)一步說明普拉克索通過誘導(dǎo)低體溫發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。4.SAH條件下,普拉克索通過誘導(dǎo)低體溫抑制SAH引起的EBI。第三部分普拉克索誘導(dǎo)的低體溫在蛛網(wǎng)膜下腔出血后發(fā)揮腦保護(hù)的作用機(jī)制目的:研究普拉克索誘導(dǎo)的藥物性低溫是否通過PI3K/AKT/GSK3β這一信號通路發(fā)揮保護(hù)作用。方法:將30只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為SAH組(n=6)和SAH+普拉克索組(n=24);SAH+普拉克索組的24只大鼠又隨機(jī)分為溶劑對照組,PI3K抑制劑LY294002組,AKT抑制劑MK-2206組以及GSK3β抑制劑CHIR99021組等4組,每組6只。各抑制劑與普拉克索同時進(jìn)行腹腔注射。首先,通過western blot檢測普拉克索處理對bcl-2的蛋白水平,caspase3活化以及PI3K/AKT/GSK3β通路的影響;其次,通過western blot檢測各抑制劑在該動物模型中是否發(fā)揮作用;最后,通過western blot檢測各組腦組織中白蛋白含量和活化的caspase3水平,以及通過TUNEL和FJB染色,行為學(xué)評分檢測在PI3K/AKT/GSK3β這一通路被阻斷的情況下,普拉克索誘導(dǎo)的低體溫是否還能發(fā)揮腦保護(hù)作用。結(jié)果:1,在SAH條件下,普拉克索處理有效地上調(diào)了bcl-2的蛋白水平,抑制了caspase3的活化,激活了PI3K/AKT/GSK3β通路。2,在SAH條件下,LY294002可以有效地抑制PI3K,AKT和GSK3β的磷酸化;MK-2206可以有效地抑制AKT和GSK3β的磷酸化;CHIR99021可以有效地抑制GSK3β的磷酸化。3,在各阻斷劑存在的情況下,普拉克索誘導(dǎo)的低體溫不能有效地抑制SAH誘導(dǎo)的caspase3的活化,血腦屏障破壞,腦細(xì)胞凋亡和神經(jīng)元壞死,行為能力喪失。結(jié)論:1.在SAH條件下,普拉克索有可能是通過激活了PI3K/AKT/GSK3β通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。2.在SAH條件下,加入PI3K抑制劑LY294002可抑制下游蛋白AKT和GSK3β磷酸化,不能發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。3.在SAH條件下,PI3K抑制劑LY294002,AKT抑制劑MK-2206以及GSK3β抑制劑CHIR99021均可抑制普拉克索誘導(dǎo)的藥物性低溫的腦保護(hù)作用。4.在SAH條件下,普拉克索至少部分的是通過PI3K/AKT/GSK3β通路發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R743.35

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 朱敏;葉民;劉衛(wèi)國;張麗;沈偉;;多種多巴胺受體激動劑轉(zhuǎn)換為普拉克索的療效和安全性研究[J];中國全科醫(yī)學(xué);2009年24期

2 李華;陳笑艷;施孝金;詹燕;鐘明康;李中東;鐘大放;;高靈敏度液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定人血漿中普拉克索[J];藥物分析雜志;2011年02期

3 ;普拉克索安全性待審查[J];中國處方藥;2012年05期

4 毛遠(yuǎn)湖;湯磊;王建塔;;鹽酸普拉克索的合成[J];廣州化工;2014年12期

5 武力勇;賈建平;;普拉克索的臨床應(yīng)用及安全性[J];藥物不良反應(yīng)雜志;2007年02期

6 胡瑾;;普拉克索治療帕金森臨床效果分析[J];河北醫(yī)藥;2014年09期

7 蔣玲;劉驊;;美多芭聯(lián)合普拉克索治療血管性帕金森綜合征27例[J];中國藥業(yè);2014年13期

8 金華;李建其;;鹽酸普拉克索的合成研究[J];中國藥物化學(xué)雜志;2011年06期

9 高星樂;鄭兢;;普拉克索致譫妄狀態(tài)1例[J];浙江實(shí)用醫(yī)學(xué);2012年01期

10 徐金軍;徐冬;夏松柏;;普拉克索臨床應(yīng)用不良反應(yīng)分析[J];世界臨床藥物;2012年11期

相關(guān)會議論文 前4條

1 方玲;;普拉克索治療帕金森病伴發(fā)抑郁障礙的對照研究[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會精神病學(xué)分會學(xué)術(shù)年會暨浙江省醫(yī)師協(xié)會精神科醫(yī)師分會第四屆年會論文匯編[C];2011年

2 張醫(yī)芝;孫亞娟;胡國華;;新型多巴胺受體激動劑普拉克索治療帕金森病的臨床研究[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 ;普拉克索治療不同時期帕金森病征文啟事[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會肌電圖與臨床電生理學(xué)習(xí)班資料匯編[C];2012年

4 劉妍梅;陳玲;裴中;劉焯霖;黎錦如;冼文彪;周鴻雁;申存周;張健;;普拉克索治療帕金森病的療效觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前4條

1 殷妤涵　譯;每日給藥一次的普拉克索緩釋片具有良好療效[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

2 劉沖;抗帕金森病新藥 普拉克索國內(nèi)上市[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2007年

3 肖佳;普拉克索和左旋多巴對早期帕金森有效[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào);2004年

4 殷妤涵;歐盟批準(zhǔn)普拉克索緩釋片用于治療帕金森病[N];中國醫(yī)藥報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 馬俊偉;普拉克索誘導(dǎo)的低體溫對蛛網(wǎng)膜下腔出血后早期腦損傷的抑制作用及其機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

2 杜芳;新型多巴胺D3受體激動劑對多巴胺神經(jīng)元的神經(jīng)營養(yǎng)作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 劉英姿;OCT2、DRD2和DRD3遺傳多態(tài)性對普拉克索藥代動力和藥效學(xué)的影響[D];中南大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陶冶;鹽酸普拉克索緩釋片的制備及質(zhì)量研究[D];吉林大學(xué);2015年

2 周婷婷;鹽酸普拉克索治療帕金森病的量效關(guān)系分析[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

3 姚亞妮;普拉克索添加治療帕金森病臨床隨機(jī)對照研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2009年

4 林瑋瑋;左旋多巴與普拉克索的臨床藥學(xué)研究及帕金森統(tǒng)一評分量表的改進(jìn)[D];福建醫(yī)科大學(xué);2008年

5 陳佳;鹽酸普拉克索的合成與質(zhì)量研究[D];中南大學(xué);2012年

6 王玉軍;鹽酸普拉克索的合成工藝研究[D];沈陽藥科大學(xué);2009年

7 李華;人血漿中普拉克索和多潘立酮定量分析方法研究[D];浙江工業(yè)大學(xué);2011年

8 張醫(yī)芝;新型多巴胺受體激動劑普拉克索治療帕金森病的臨床研究[D];吉林大學(xué);2008年

9 余爾涵;普拉克索對帕金森病療效的meta分析[D];福建醫(yī)科大學(xué);2013年

10 左延君;親水相互作用色譜質(zhì)譜聯(lián)用法測定鹽酸普拉克索中有關(guān)物質(zhì)[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

，

本文編號：2428976