【摘要】：目的探討丁苯酞對(duì)1-甲基-4-苯基-吡啶離子(MPP+)誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞混合譜系激酶3(MLK3)通路的影響,及其對(duì)細(xì)胞增殖與凋亡的作用機(jī)制。方法對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期SH-SY5Y細(xì)胞分為對(duì)照組、MPP+組、丁苯酞組和URMC-099組,對(duì)照組正常培養(yǎng),MPP+組加1 mmol/L MPP+培養(yǎng)24 h,丁苯酞組予10μmol/L丁苯酞預(yù)處理3 h后,加入MPP+培養(yǎng)24 h,URMC-099組予200nmol/L MLK3通路特異性抑制劑URMC-099預(yù)處理3 h后,加入MPP+培養(yǎng)24 h。倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),噻唑藍(lán)比色法檢測(cè)細(xì)胞活性,Annexin-V/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,Hoechst33342熒光染色法觀察凋亡細(xì)胞,Western blotting檢測(cè)MLK3磷酸化蛋白(p-MLK3)、c-Jun氨基末端激酶磷酸化蛋白(p-JNK)和細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶磷酸化蛋白(p-ERK1/2)的表達(dá)。結(jié)果 MPP+組細(xì)胞存活率低于對(duì)照組(P0.05),丁苯酞組和URMC-099組細(xì)胞存活率高于MPP+組(P0.05);MPP+組細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組(P0.05),丁苯酞組和URMC-099組細(xì)胞凋亡率低于MPP+組(P0.05);與對(duì)照組相比,MPP+組p-MLK3、p-JNK蛋白表達(dá)量增加(P0.05),p-ERK1/2蛋白表達(dá)量降低(P0.05);與MPP+組相比,丁苯酞組和URMC-099組p-MLK3、p-JNK蛋白表達(dá)量降低(P0.05),p-ERK1/2蛋白表達(dá)量升高(P0.05)。結(jié)論丁苯酞可減少M(fèi)PP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡,促進(jìn)細(xì)胞增殖,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制MLK3通路,調(diào)節(jié)下游p-JNK、p-ERK1/2蛋白表達(dá)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of butylphthalide on the mixed lineage kinase 3 (MLK3) pathway induced by 1-methyl-4-phenyl-pyridine ion (MPP) in SH-SY5Y cells and its mechanism of cell proliferation and apoptosis. Methods SH-SY5Y cells in logarithmic growth phase were divided into control group, MPP group, butyrophthalide group and URMC-099 group. The control group was cultured for 24 h, MPP group was cultured with 1 mmol/L MPP for 24 h, butylphthalide group was pretreated with 10 渭 mol/L butylphthalide for 3 h. URMC-099 group was pretreated with 200nmol/L MLK3 pathway specific inhibitor URMC-099 for 3 h and MPP for 24 h. Cell morphology was observed by inverted phase contrast microscope, cell activity was detected by thiazolyl blue colorimetry, apoptosis rate was detected by Annexin-V/PI double staining flow cytometry, and MLK3 phosphorylated protein (p-MLK3) was detected by, Western blotting by Hoechst33342 fluorescence staining. Expression of c-Jun amino-terminal kinase phosphorylation protein (p-JNK) and extracellular regulated protein kinase phosphorylation protein (p-ERK1/2). Results the cell survival rate of MPP group was lower than that of control group (P0.05). The cell survival rate of butyphthalide group and URMC-099 group was higher than that of MPP group (P0.05). The apoptosis rate of MPP group was higher than that of control group (P0.05), and that of butyphthalide group and URMC-099 group was lower than that of MPP group (P0.05). Compared with the control group, the expression of p-MLK3PJNK protein in MPP group was increased (P0.05), and the expression of p-ERK1/2 protein was decreased (P0.05). Compared with MPP group, butyphthalide group and URMC-099 group decreased the expression of p-MLK _ 3, p-JNK protein (P0.05), and increased the expression of p-ERK1/2 protein (P0.05). Conclusion Butylphthalide can reduce the apoptosis and promote the proliferation of SH-SY5Y cells induced by MPP. The mechanism may be that butyphthalide can regulate the expression of p-JNKP p-ERK 1 / 2 protein downstream by inhibiting the MLK3 pathway.
【作者單位】： 華北理工大學(xué)護(hù)理與康復(fù)學(xué)院;華北理工大學(xué)冀唐學(xué)院;
【基金】：華北理工大學(xué)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目(No.2017S37);華北理工大學(xué)博士科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(No.35647699) 河北省高等學(xué)校科學(xué)研究青年基金項(xiàng)目(No.QN201722)
【分類(lèi)號(hào)】：R742.5

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邵宏元;;丁苯酞膠囊治療急性缺血性腦卒中療效觀察[J];中國(guó)藥物與臨床;2009年06期

2 薛麗霞;張進(jìn);;丁苯酞添加治療急性缺血性腦卒中60例臨床療效觀察[J];中國(guó)臨床神經(jīng)科學(xué);2010年06期

3 王冰;呂關(guān)健;;丁苯酞氯化鈉治療急性缺血性腦卒中54例臨床觀察[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2012年08期

4 魏立平;李文波;張耀慧;何玉清;;丁苯酞治療急性缺血性腦梗死療效觀察[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2013年01期

5 梁江紅;;丁苯酞對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎大鼠的保護(hù)作用[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2013年01期

6 應(yīng)忠明;;丁苯酞治療急性缺血性腦卒中臨床研究[J];心腦血管病防治;2013年03期

7 陳威;易佳;;丁苯酞對(duì)急性缺血性腦卒中患者血清C-反應(yīng)蛋白的影響及臨床療效觀察[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2014年02期

8 李和平;吳麗娥;;丁苯酞對(duì)急性缺血性腦卒中的作用及保護(hù)機(jī)制[J];中華腦血管病雜志(電子版);2013年06期

9 董治燕;郭改艷;;丁苯酞對(duì)急性缺血性腦卒中患者血清C反應(yīng)蛋白的影響及療效觀察[J];中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志;2014年02期

10 徐長(zhǎng)水;徐軍;臧衛(wèi)周;宋云曄;李學(xué);李燕;;丁苯酞膠囊治療急性缺血性腦卒中[J];中國(guó)新藥與臨床雜志;2006年07期

相關(guān)會(huì)議論文 前7條

1 孔雙艷;李其富;羊潔;何俐;;丁苯酞對(duì)腦缺血的保護(hù)效應(yīng)及其機(jī)制的研究[A];第九次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編[C];2006年

2 劉佳;吳江;;丁苯酞注射液對(duì)急性腦梗死患者腦血流量的影響及臨床療效觀察[A];第十一屆全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2008年

3 寧文婧;杜業(yè)亮;;丁苯酞對(duì)腦缺血大鼠AQP9mRNA表達(dá)的影響[A];山東省2013年神經(jīng)內(nèi)科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)神經(jīng)免疫大會(huì)2013論文匯編[C];2013年

4 章玉坤;;丁苯酞聯(lián)合烏司他丁等預(yù)防治療結(jié)腦血管相關(guān)性腦損害的臨床研究[A];江西省第六次中西醫(yī)結(jié)合神經(jīng)科學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2013年

5 姜慧軼;胡林森;;蛋白酶體抑制劑處理的未分化及分化SH-SY5Y細(xì)胞的蛋白質(zhì)組學(xué)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

6 李勤;索麗松;謝海燕;張耀陽(yáng);鄧玉林;;免疫熒光法檢測(cè)DAT在SH-SY5Y細(xì)胞中的分布[A];第六屆全國(guó)光生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2004年

7 楊威;麻琦;唐力;鄧玉林;;SH-SY5Y細(xì)胞內(nèi)羥自由基水平的HPLC-ECD測(cè)定方法研究[A];第十五次全國(guó)色譜學(xué)術(shù)報(bào)告會(huì)文集（下冊(cè)）[C];2005年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前1條

1 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院 王伊龍 秦海強(qiáng) 陳盼;面對(duì)卒中負(fù)擔(dān) 學(xué)界在行動(dòng)[N];健康報(bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 張平;丁苯酞對(duì)急性缺血性腦卒中HGF表達(dá)、認(rèn)知功能及腦灌注的影響[D];鄭州大學(xué);2016年

2 張新勇;丁苯酞注射液治療進(jìn)展性腦梗死臨床療效觀察[D];南京醫(yī)科大學(xué);2016年

3 孫允霄;順鉑通過(guò)miR-16下調(diào)BDNF表達(dá)抑制SH-SY5Y細(xì)胞生長(zhǎng)的研究[D];山東大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張瑤;丁苯酞通過(guò)抗凋亡作用而減輕實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠的神經(jīng)損害[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 孟然;丁苯酞通過(guò)PGC-1α/Nrf2通路發(fā)揮對(duì)多發(fā)性硬化小鼠神經(jīng)系統(tǒng)線粒體的保護(hù)作用[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 劉敬;丁苯酞氯化鈉注射液對(duì)腦梗死患者神經(jīng)功能及VEGF水平的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

4 張?jiān)?HO-1、SOD2和Mfn2在實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠中的表達(dá)及丁苯酞保護(hù)作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

5 付子娟;超早期丁苯酞治療急性腦梗死的臨床研究[D];華北理工大學(xué);2015年

6 趙素晨;丁苯酞對(duì)MPP~+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞凋亡及相關(guān)因子表達(dá)的影響[D];華北理工大學(xué);2015年

7 胡杰杰;丁苯酞氯化鈉注射液對(duì)急性缺血性腦卒中患者內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響[D];河北北方學(xué)院;2015年

8 張瑞丹;丁苯酞對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎小鼠Na+/K+ATPase、ERK1/2表達(dá)的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 紀(jì)海茹;丁苯酞預(yù)處理對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的神經(jīng)保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];承德醫(yī)學(xué)院;2015年

10 劉凌云;丁苯酞對(duì)急性腦梗死患者療效及血清BDNF、VEGF、bFGF水平的影響[D];南華大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：2390997