【摘要】：目的:探討酒精中毒對氯化鉆誘導(dǎo)神經(jīng)母細(xì)胞SK-N-SH細(xì)胞缺氧損傷的影響。方法:將SK-N-SH細(xì)胞分成4組,依次為空白組、氯化鈷組、低濃度酒精組、高濃度酒精組。空白組未作任何處理;氯化鉆組用含250μmol/L氯化鈷的培養(yǎng)液處理6h;酒精組分別用含酒精(300mg/L、900mg/L)的培養(yǎng)液預(yù)處理lh,加入含250μmol/L氯化鉆的培養(yǎng)液處理6h;4組細(xì)胞均選自對數(shù)生長期,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)(37℃、5%C02);倒置顯微鏡下觀察4組SK-N-SH細(xì)胞形態(tài)學(xué);MTT檢測4組細(xì)胞活力;Hoechst染色法測定4組細(xì)胞凋亡數(shù)目;Western blot法測定4組細(xì)胞Bax、Bcl-2、HIF-lα等蛋白的表達(dá)。結(jié)果:(1)鏡下觀察SK-N-SH細(xì)胞形態(tài),氯化鈷組和酒精組SK-N-SH細(xì)胞神經(jīng)突出數(shù)目減少,摻雜死亡細(xì)胞;酒精組SK-N-SH細(xì)胞神經(jīng)突出減少顯著,死亡細(xì)胞數(shù)目增多;高濃度酒精組SK-N-SH細(xì)胞神經(jīng)突出減少明顯,死亡細(xì)胞數(shù)目增多。(2)MTT檢測結(jié)果顯示:與空白對照組比較,氯化鉆組SK-N-SH細(xì)胞存活率明顯降低(P0.001);與氯化鉆組比較,低、高濃度酒精組SK-N-SH細(xì)胞存活率均明顯降低(P0.01或P0.001);與低濃度酒精組比較,高濃度酒精組細(xì)胞存活率明顯降低(P0.001)。(3)Hoechst法,倒置顯微鏡下觀察氯化鉆組SK-N-SH細(xì)胞核固縮,呈現(xiàn)為藍(lán)色熒光,凋亡細(xì)胞數(shù)目增加;酒精組SK-N-SH細(xì)胞核固縮,藍(lán)色熒光數(shù)目增加,凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯增加;高濃度酒精組細(xì)胞核固縮,藍(lán)色熒光數(shù)目增加,凋亡細(xì)胞數(shù)目明顯增加。(4)Westernblot結(jié)果顯示:與空白組比較,氯化鈷組和酒精組Bax、HIF-1α蛋白表達(dá)明顯上調(diào)(P0.001),氯化鈷組Bcl-2蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P0.001),低、高濃度酒精組Bcl-2蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P0.001或P0.01);與氯化鈷組比較,酒精組Bax、HIF-1α表達(dá)上調(diào)(P0.001),Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)(P0.001);與低濃度酒精組比較,高濃度酒精組Bax、HIF-1α表達(dá)上調(diào)(P0.001),8c1-2表達(dá)下調(diào)(P0.001)。結(jié)論:1.酒精中毒可以降低缺氧所致SK-N-SH細(xì)胞的生存率,加重缺氧細(xì)胞的損傷。2.酒精中毒使氯化鉆致SK-N-SH細(xì)胞凋亡增加,其作用機(jī)制與通過上調(diào)HIF-1α、Bax表達(dá)、下調(diào)Bcl-2表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R595.6;R743.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2367070