【摘要】：目的急性腦血管疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)出逐漸上升趨勢(shì),然其發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚,因而缺乏相應(yīng)的有效治療措施。本文旨在探討胡黃連苷Ⅱ通過作用于線粒體細(xì)胞色素C(Cyt C)信號(hào)通路對(duì)腦缺血/再灌注損傷發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。方法成年健康雄性Wistar大鼠128只,按隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、模型組、胡黃連苷Ⅱ組、抑制劑組、抑制劑+胡黃連苷Ⅱ組、激動(dòng)劑組、激動(dòng)劑+胡黃連苷Ⅱ組、溶媒(DMSO)組。實(shí)驗(yàn)選用Cyt C選擇性激動(dòng)劑蒼術(shù)苷(Atr)和特異性抑制劑環(huán)孢素(Cs A)作為工具藥,胡黃連苷Ⅱ作為治療藥物,采用改良Longa線栓法制備大鼠腦缺血2h/再灌注24h模型。大鼠腦缺血/再灌注24h后行改良神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分(m NSS);TTC染色法檢測(cè)大鼠腦梗死體積;HE染色法檢測(cè)大鼠神經(jīng)細(xì)胞損傷情況;原位末端標(biāo)記方法(TUNEL)檢測(cè)缺血/再灌注損傷后大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的情況;電鏡觀察線粒體超微結(jié)構(gòu)變化;ELISA法檢測(cè)大鼠缺血區(qū)腦組織活性氧(ROS)的含量;免疫組織化學(xué)法和Western blot法檢測(cè)再灌注損傷區(qū)Cyt C、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果與假手術(shù)組相比,模型組大鼠腦缺血/再灌注損傷后呈現(xiàn)出改良神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分升高,TTC染色示梗死區(qū)面積較明顯,HE結(jié)果顯示大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞損傷程度比較嚴(yán)重,TUNEL結(jié)果顯示神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量增加,線粒體結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,ELISA法結(jié)果顯示大鼠腦組織中ROS含量升高;免疫組織化學(xué)和Western blot結(jié)果顯示Cyt C、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達(dá)量均較假手術(shù)組升高(P0.05)。與模型組相比,胡黃連苷Ⅱ組大鼠m NSS神經(jīng)學(xué)評(píng)分及腦梗死體積降低,HE結(jié)果顯示大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞損傷程度有所減輕,TUNEL結(jié)果示神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)量減少,線粒體損傷減輕,腦組織中ROS含量下降;免疫組織化學(xué)和Western blot結(jié)果顯示Cyt C、Caspase-9和Caspase-3蛋白表達(dá)量均較模型組顯著降低(P0.05)。Cs A組與胡黃連苷Ⅱ組相比,Cs A組腦組織ROS含量較高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。余組相比未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論胡黃連苷Ⅱ?qū)衷钚阅X缺血/再灌注損傷大鼠產(chǎn)生神經(jīng)保護(hù)的作用機(jī)制,可能與清除過量活性氧、保護(hù)線粒體結(jié)構(gòu)以及下調(diào)Cyt C、Caspase-9和Caspase-3蛋白表達(dá)量有關(guān)。
[Abstract]:Objective the incidence of acute cerebrovascular disease (ACD) is increasing gradually, but its pathogenesis is not clear, so it lacks effective treatment. The aim of this study was to investigate the neuroprotective mechanism of hexacycline 鈪，

本文編號(hào)：2285425